Name: Um ensaio planário de motilidade para medir as propriedades biomodulantes de produtos naturais (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: Aprenda a avaliar os efeitos de produtos naturais na motilidade de planárias usando o Teste de Velocidade Locomotora. Este método fornece dados comportamentais confiáveis para pesquisa em neurociência e farmacologia.

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Os autores desejam reconhecer o escritório de Avanço Institucional, e a Morrisville College Foundation por uma bolsa de publicação para apoiar este trabalho, bem como o SUNY Morrisville Collegiate Science and Technology Entry Program (CSTEP) por sua assistência contínua e apoio à pesquisa de graduação na SUNY Morrisville. Também gostaríamos de agradecer sophia Hutchens por comentários úteis sobre a técnica descrita.

1. Criação planária
<ol><li>Use planários comprados de uma empresa de suprimentos biológicos ou capturados, se necessário. Os planários usados neste protocolo são Dugesia tigrina,conforme listado na lista de suprimentos. Esta espécie também é referida como Girardia tigrina31. Outras espécies planárias aquáticas também são aceitáveis2,3. NOTA: O protocolo descrito é voltado para animais comprados de uma empresa de suprimentos biológicos. Este sistema de ensaio não foi testado com planários selvagens. No entanto, se forem utilizados planários capturados selvagens, recomenda-se que eles sejam habituados à água utilizada nos experimentos, bem como ao ambiente de laboratório por pelo menos 1 semana antes do uso.</li>
	<li>Na chegada, transfira os planários para recipientes plásticos de armazenamento de alimentos contendo água limpa da nascente e mantenha as tampas entreabertas.</li>
	<li>Mantenha os planários em um ambiente escuro.</li>
	<li>Alimentar planários recém-entregues após 24-36 h em seu novo ambiente.</li>
	<li>Permita que os planários se aclimatar ao laboratório pelo menos uma semana antes da experimentação.</li>
	<li>Alimentar planários em um horário regular duas vezes por semana.<ol>
<li>Permita que os planários alimentem ad libitum em ovos cozidos orgânicos picados ou fígado de carne orgânica misturado por 1-2 h.</li>
		<li>Coloque os planários alimentados em um recipiente limpo após a alimentação.<ol>
<li>Remova a água suja dos planários.</li>
			<li>Use um pequeno pincel de aquarela plana (número 3-6) para transferir detritos alimentares e lodo aderindo ao recipiente de planários ao redor de planários para uma toalha de papel.</li>
			<li>Com água fresca da fonte e suave rodopiagem ou agitação, desaloja os planários e despeje-os em um recipiente limpo.</li>
			<li>Os planários que permanecerem aderidos ao recipiente podem ser transferidos usando um pincel de aquarela redondo (número 3-6) ou transferir pipeta com um furo largo.</li>
			<li>Decante a água de transferência.</li>
			<li>Cubra os planários com água limpa da fonte.</li>
			<li>Após 24h, remova os planários de qualquer resíduo de alimentos expelido, transferindo-os para um recipiente limpo conforme descrito acima (etapas 1.6.2.1-1.6.2.6).</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>Para limpar recipientes e utensílios usados para a criação planária, não use sabão ou detergente. Limpe esses itens enxaguando-os bem com água limpa (a água da torneira é aceitável) e secando-os com um pano limpo ou papel toalha.</li>
</ol>2. Preparação de planários para experimentos
<ol><li>Permita que os planários recém-entregues se aclimatar em seu ambiente pelo menos 1 semana antes da experimentação.</li>
	<li>Planários de fome por 5 a 10 dias antes da experimentação.</li>
	<li>Mude a água da cultura pelo menos 1x durante o período de fome.</li>
</ol>3. Teste de velocidade locomotor planária (pLmV): Comportamentos estimulantes
<ol><li>Antes da experimentação, garanta que os planários famintos estejam totalmente formados, com uma cabeça e cauda completas e pigmentadas.</li>
	<li>Prepare uma placa de vidro ou plástico de 10 cm de Petri e um recipiente de habitação para o teste pLmV antes de iniciar o experimento.<ol>
<li>Coloque uma placa de Petri de 10 cm de diâmetro limpa para ser usada para o teste pLmV em papel de grade pré-nomeado (com quadrados de 0,5 cm).</li>
		<li>Adicione 20 mL de água de nascente não adulterada para controles, ou água de nascente contendo a concentração adequada do produto natural que está sendo testado, à placa petri de 10 cm de diâmetro a ser usada para o teste pLmV.</li>
		<li>Posicione uma câmera (por exemplo, celular ou câmera de alta resolução) acima da placa Petri de 10 cm de diâmetro preparada para registrar motilidade planária sobre o papel da grade durante o experimento. Um suporte de anel é uma maneira conveniente de posicionar a câmera a uma distância que pode registrar toda a visão da placa de Petri de 10 cm e linhas de grade.</li>
		<li>Prepare um recipiente de habitação com 5-10 mL de água de nascente não adulterada (controles), ou água de nascente contendo a concentração adequada do produto natural que está sendo testado. Um recipiente semelhante a um frasco de cintilação ou pequena placa de Petri de 5 cm é adequado.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Use um pincel de aquarela pequeno, limpo, plano ou redondo para transferir suavemente um planário do recipiente de caldo com água de nascente para o recipiente de habitação com 5-10 mL de água de nascente não adulterada ou água de nascente contendo o produto natural que está sendo testado. NOTA: Ao manipular planários para o ensaio pLmV, use um pincel de aquarela pequeno, limpo, plano ou redondo (número 3-6). Ao mover planários, o pincel deve ser colocado sob o animal para levantá-lo suavemente. Para garantir que os planários não sejam danificados ao usar o pincel, as cerdas da escova não devem ser jogadas sob o animal. Espalhar-se das cerdas pode prejudicar o planário se ficar preso entre as fibras da escova. NOTA: Uma pipeta de transferência de furo largo também pode ser usada para transferir o planário para um recipiente de habitação limpa e seca.<ol>
<li>Se usar a pipeta, remova o excesso de água movido com o planário do recipiente de habitação usando a pipeta de transferência.</li>
		<li>Adicione cuidadosamente a solução de habitação (ou seja, água de nascente para controles ou água de nascente contendo a concentração do produto natural a ser testada) ao recipiente de habitação contendo o planário.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Os períodos de habitação dependerão da dinâmica de estimulação avaliada para o produto natural que está sendo testado. Um tempo de habitação de 2 min mostrou-se aceitável para detectar estimulação neste trabalho1.</li>
	<li>Após o período de habitação de 2 min use um pincel de aquarela para transferir suavemente o planário para o centro da placa petri preparada de 10 cm para o experimento de estimulação pLmV.</li>
	<li>Inicie a câmera para gravar o movimento do planário. Gravar 10-11 min de vídeo.</li>
	<li>Prepare o recipiente de habitação e a placa de Petri de 10 cm para o experimento pLmV com soluções frescas para cada planário.</li>
	<li>Use pipetas, pratos, recipientes e pincéis dedicados para cada concentração experimental do produto natural que está sendo testado para evitar expor inadvertidamente os planários à solução errada durante a experimentação.</li>
	<li>Como os planários exibem comportamentos aprendidos, cada planário (controle ou teste) só deve ser usado uma vez21,22.</li>
</ol>4. Teste de velocidade locomotor planária (pLmV): Comportamentos de retirada
<ol><li>Antes da experimentação, garanta que os planários famintos estejam totalmente formados, com uma cabeça e cauda completas e pigmentadas.</li>
	<li>Prepare uma placa de Petri de 10 cm (vidro ou plástico) para o experimento pLmV, uma placa de Petri de 5 cm (vidro ou plástico) para enxaguar o planário após a habituação, e um recipiente de habitação antes de iniciar o experimento.<ol>
<li>Coloque uma placa de Petri de 10 cm de diâmetro limpa para ser usada para o experimento pLmV em papel de grade pré-nomeado com quadrados de 0,5 cm).</li>
		<li>Adicione 20 mL de água de mola não adulterada à placa petri de 10 cm de diâmetro a ser usada para o experimento pLmV.</li>
		<li>Posicione uma câmera acima da placa Petri de 10 cm de diâmetro preparada como na etapa 3.2.3 para registrar motilidade planária sobre o papel de grade durante o experimento.</li>
		<li>Prepare o recipiente de lavagem planária adicionando 5 mL de água de nascente sozinho à placa de Petri de 5 cm.</li>
		<li>Prepare um recipiente de habitação com 5-10 mL de água de nascente não adulterada (controles) ou água de nascente contendo o produto natural que está sendo testado. Um recipiente semelhante a um frasco de cintilação ou pequena placa de Petri de 5 cm (vidro ou plástico) é adequado.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Use um pincel de aquarela pequeno, limpo, plano ou redondo para transferir um planário da água da nascente para o recipiente de habitação preparado com 5-10 mL de água de nascente não adulterada (controles) ou água de nascente contendo o produto natural que está sendo testado. Mova suavemente o animal do recipiente de estoque para o recipiente de habitação. Certifique-se de que o planário não está danificado pela escova. NOTA: Ao manipular planários para o ensaio pLmV, use um pincel de aquarela pequeno, limpo, plano ou redondo (número 3-6). Ao mover planários, o pincel deve ser colocado sob o animal para levantá-lo suavemente. Para garantir que os planários não sejam danificados ao usar o pincel, as cerdas da escova não devem ser jogadas sob o animal. Espalhar-se das cerdas pode prejudicar o planário se ficar preso entre as fibras da escova. NOTA: Uma pipeta de transferência de furo largo também pode ser usada para transferir o planário para um recipiente de habitação limpa e seca.<ol>
<li>Se usar a pipeta, o excesso de água movido com o planário deve ser removido do recipiente de habitação usando a pipeta de transferência.</li>
		<li>Adicione cuidadosamente a solução de habitação (ou seja, água de nascente não adulterada para controles ou água de nascente contendo o produto natural que está sendo testado) ao recipiente de habitação contendo o planário.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Os períodos de habitação para retirada dependerão da dinâmica de estimulação avaliada para o produto natural que está sendo testado; 2-5 min provaram ser suficientes.</li>
	<li>Após o período de habitação use um pincel de aquarela para transferir suavemente o planário para a placa de Petri preparada de 5 cm contendo água de nascente para enxaguar qualquer produto natural do recipiente de habitação. Certifique-se de que o planário não está danificado pela escova.</li>
	<li>Transfira imediatamente o planário para o centro da placa de Petri preparada de 10 cm contendo água de nascente para o experimento de retirada do pLmV. Certifique-se de que o planário não está danificado pela escova.</li>
	<li>Inicie a câmera para gravar o movimento do planário. Gravar 10-11 min de vídeo.</li>
	<li>Prepare o recipiente de habitação, o recipiente de enxágüe e a placa de Petri de 10 cm para o experimento pLmV com soluções frescas para cada planário.</li>
	<li>Use pipetas, pratos, recipientes e pincéis dedicados para cada concentração experimental do produto natural que está sendo testado para evitar expor inadvertidamente os planários à solução errada durante a experimentação.</li>
	<li>Como os planários exibem comportamentos aprendidos, use cada planário (controle ou teste) apenas uma vez26,27.</li>
</ol>5. Análise de dados
<ol><li>Prepare uma tabela de coleta de dados para documentar o comportamento e a motilidade dos planários à medida que o número de linhas de grade cruzou para cada minuto durante a execução do pLmV. A tabela deve permitir que o número acumulado de linhas por minuto atravessado pelo planário também seja documentado. Inclua linhas para notas e uma tabela de definições para marcar a observação de comportamentos durante o período experimental, como 'wander' e 'stop' (ver Discussão).</li>
	<li>Usando o vídeo, conte o número de linhas de grade completa atravessadas pelo planário por minuto por 10 minutos, e registe esse número na tabela de dados. O comportamento planário típico consiste em velocidade contínua, movimento horizontal direcionado para a frente, com curvas periódicas e sem paradas.<ol>
<li>Comece a cronometrar o experimento no ponto em que o planário saiu do pincel usado para transferi-lo para a placa de Petri de 10 cm. Regisso horário de início.</li>
		<li>Para determinar quando o animal cruza um quadrado de grade completa, concentre-se na cabeça e marque uma linha quando a cabeça cruzar completamente um quadrado.</li>
		<li>Para marcar uma grade completa quando o verme se move ao redor da borda do prato, visualize uma distância de 0,5 cm, referindo-se às linhas enquanto elas se estendem para fora das margens do prato. Se o planário cruzar o canto de uma caixa, consulte a segunda linha cruzada para marcar uma linha de grade. Novamente, concentre-se na cabeça para fazer essas determinações.</li>
		<li>Pare o vídeo após cada minuto para gravar os dados.</li>
		<li>Ao reiniciar o vídeo para contar no minuto seguinte, se a cabeça do worm estava entre as linhas de grade quando o vídeo foi interrompido, grave a primeira linha cruzada como uma caixa cheia.</li>
		<li>Marcar o número de linhas de grade cruzadas por 10 minutos.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Se o animal parar de se mover durante um teste de pLmV e não cruzar mais as linhas de grade durante o tempo de gravação de 10 minutos, documente o comportamento do planário no gráfico comportamental (por exemplo, 'vagar' ou 'parar'). Os animais que cessarem sua faixa dianteira durante o ensaio pLmV devem, em vez disso, tomar nota e os dados apresentados como uma frequência do número total de animais expostos a essa concentração de reagente. O coiling ou o comportamento convulsivo (conhecido como comportamento C) impedindo qualquer movimento para a frente durante o período de habitação indica que a concentração do produto natural não é apropriada para uso em um ensaio pLmV porque o ensaio pLmV é baseado em motilidade. Comportamentos do tipo C podem ser analisados usando um tipo diferente de análise (ver Discussão).</li>
	<li>Se possível, teste múltiplas concentrações experimentais do produto natural usando pelo menos 9-12 vermes em dias diferentes e diferentes horários do dia se determinando o efeito geral do reagente na fisiologia planária. No entanto, se os pesquisadores se esforçam para reduzir a variabilidade induzida pelo ritmo circadiano, os experimentos podem ser conduzidos com iluminação constante em uma hora do dia usando vermes que são cultivados com ciclos de luz/escuridão cronometrados e definem os tempos de alimentação. Tenha pelo menos dois experimentadores envolvidos no projeto para permitir a opção de ter um registro individual, enquanto o segundo individual conta as linhas de grade 'cegas' às condições utilizadas para coleta de dados. Ter diferentes indivíduos envolvidos na coleta de dados, bem como cálculos estatísticos e análises, também reduz possíveis viés.</li>
	<li>Calcule a contagem de linhas de grade para cada concentração de produto natural em cada dia em relação à contagem de controle para cada minuto para que dados de dias, tempos e experimentadores diferentes possam ser combinados. Esses dados podem ser mediados e analisados usando os testes T do Student. Os valores P para cada teste podem ser avaliados por minuto em comparação com o controle e entre as concentrações de reagentes. As avaliações ANOVA utilizando conjuntos de dados derivados de diferentes concentrações experimentais fornecem um método adicional de análise.</li>
</ol>

<ol><li>Moustakas, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guarana+provides+additional+stimulation+over+caffeine+alone+in+the+planarian+model%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Guarana provides additional stimulation over caffeine alone in the planarian model.</a> PloS One. 10 (4), 0123310(2015).</li>
<li>Raffa, R. B., Valdez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cocaine+withdrawal+in+Planaria%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Cocaine withdrawal in Planaria.</a> European Journal of Pharmacology. 430 (1), 143-145 (2001).</li>
<li>Raffa, R. B., Holland, L. J., Schulingkamp, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+dopamine+D2+antagonist+activity+using+invertebrate+%28Planaria%29+locomotion+as+a+functional+endpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of dopamine D2 antagonist activity using invertebrate (Planaria) locomotion as a functional endpoint.</a> Journal of Pharmacology and Toxicological Methods. 45 (3), 223-226 (2001).</li>
<li>Thumé, I. S., Frizzo, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sertraline+induces+toxicity+and+behavioral+alternations+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Research+International%22%5BJournal%5D)">Sertraline induces toxicity and behavioral alternations in planarians.</a> Biomedical Research International. 2017, 5792621(2017).</li>
<li>Aggarwal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+novel+allosteric+modulator+of+the+human+dopamine+transporter%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chemical+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Identification of a novel allosteric modulator of the human dopamine transporter.</a> ACS Chemical Neuroscience. 10 (8), 3718-3730 (2019).</li>
<li>Zhang, C., Tallarida, C. S., Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sucrose+produces+withdrawal+and+dompamine-sensitive+reinforcing+effects+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Sucrose produces withdrawal and dompamine-sensitive reinforcing effects in planarians.</a> Physiology & Behavior. 0, 8-13 (2013).</li>
<li>Zewde, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PLDT+%28planarian+light%2Fdark+test%29%3A+an+invertebrate+assay+to+quantify+defensive+responding+and+study+anxiety-like+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">PLDT (planarian light/dark test): an invertebrate assay to quantify defensive responding and study anxiety-like effects.</a> Journal of Neuroscience Methods. 293, 284-288 (2018).</li>
<li>Risse, B., Otto, N., Berh, D., Jiang, X., Klämbt, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FIM+Imaging+and+FIMtrack%3A+two+new+tools+allowing+high-throughput+and+cost+effective+locomotion+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">FIM Imaging and FIMtrack: two new tools allowing high-throughput and cost effective locomotion analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52207(2014).</li>
<li>Inoue, T., Hoshino, H., Yamashita, T., Shimoyama, S., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Planarian+shows+decision-making+behavior+in+response+to+multiple+stimuli+by+integrative+brain+function%5BTitle%5D)+AND+%22Zoological+Letters%22%5BJournal%5D)">Planarian shows decision-making behavior in response to multiple stimuli by integrative brain function.</a> Zoological Letters. 1, 7(2015).</li>
<li>Hastrom, D., Cochet-Escartin, O., Zhang, S., Khuu, C., Collins, E. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Freshwater+planarians+as+an+alternative+animal+model+for+neurotoxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Freshwater planarians as an alternative animal model for neurotoxicology.</a> Toxicological Sciences. 147 (1), 270-285 (2015).</li>
<li>Risse, B., Berh, D., Otto, N., Klämbt, C., Jiang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FIMtrack%3A+an+open+source+tracking+and+locomotion+analysis+software+for+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One+Computational+Biology%22%5BJournal%5D)">FIMtrack: an open source tracking and locomotion analysis software for small animals.</a> PLoS One Computational Biology. 13 (5), 100553(2017).</li>
<li>Pagán, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Planaria%3A+an+animal+model+that+integrates+development%2C+regeneration+and+pharmacology%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Planaria: an animal model that integrates development, regeneration and pharmacology.</a> International Journal of Developmental Biology. 61, 519-529 (2017).</li>
<li>Palladini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pharmacological+study+of+cocaine+activity+in+planaria%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Biochemistry+and+Physiology%22%5BJournal%5D)">A pharmacological study of cocaine activity in planaria.</a> Comparative Biochemistry and Physiology. 115 (1), 41-45 (1996).</li>
<li>Buttarelli, F. R., Pellicano, C., Pontieri, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropharmacology+and+behavior+in+planarians%3A+translation+to+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Biochemistry+and+Physiology+Part+C.+Toxicology+%26+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Neuropharmacology and behavior in planarians: translation to mammals.</a> Comparative Biochemistry and Physiology Part C. Toxicology & Pharmacology. 147 (4), 399-408 (2008).</li>
<li>Nishimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+glutamic+acid+decarboxylase+gene+and+distribution+of+GABAergeric+nervous+system+in+the+planarian+Dugesia+japonica%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Identification of glutamic acid decarboxylase gene and distribution of GABAergeric nervous system in the planarian Dugesia japonica.</a> Neuroscience. 153 (4), 1103-1114 (2008).</li>
<li>Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRaffa%2C+RB+%22A+model+for+drug+action+and+abuse%22">A model for drug action and abuse</a>. , Landes Bioscience. Austin, TX. (2008).</li>
<li>Hall, F., Morita, M., Best, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((neoplastic+transformation+in+the+planarian%3A+I+cocarcinogenesis+and+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Zoology%22%5BJournal%5D)">neoplastic transformation in the planarian: I cocarcinogenesis and histopathology.</a> The Journal of Experimental Zoology. 240 (2), 211-227 (1986).</li>
<li>Voura, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Planarians+as+models+of+cadmium-induced+neoplasia+provide+measurable+benchmarks+for+mechanistic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicology+and+Environmental+Safety%22%5BJournal%5D)">Planarians as models of cadmium-induced neoplasia provide measurable benchmarks for mechanistic studies.</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 142, 544-554 (2017).</li>
<li>Van Roten, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+carcinogenic+trigger+to+study+the+function+of+tumor+suppressor+genes+in+Schmedtea+mediterranea%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+and+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">A carcinogenic trigger to study the function of tumor suppressor genes in Schmedtea mediterranea.</a> Disease Models and Mechanisms. 11 (9), 032573(2018).</li>
<li>Mason, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemo-klino-kinesis+in+planarian+food+location%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Chemo-klino-kinesis in planarian food location.</a> Animal Behaviour. 23 (2), 460-469 (1975).</li>
<li>Van Huizen, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weak+magnetic+fields+alter+stem+cell-mediated+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Weak magnetic fields alter stem cell-mediated growth.</a> Science Advances. 5 (1), 7201(2019).</li>
<li>Brown, H. M., Ogden, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+electrical+response+of+the+planarian+ocellus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+General+Physiology%22%5BJournal%5D)">The electrical response of the planarian ocellus.</a> Journal of General Physiology. 51 (2), 255-260 (1968).</li>
<li>Inoue, T., Yamashita, T., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermosensory+signaling+by+TRPM+is+processed+by+brain+serotonergic+neurons+to+produce+planarian+thermotaxis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Thermosensory signaling by TRPM is processed by brain serotonergic neurons to produce planarian thermotaxis.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (47), 15701-15714 (2014).</li>
<li>Byrne, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+ethanol+on+negative+phototaxis+and+motility+in+brown+planarians+%28Dugesia+tigrina%29%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Effects of ethanol on negative phototaxis and motility in brown planarians (Dugesia tigrina).</a> Neuroscience Letters. 685, 102-108 (2018).</li>
<li>de Sousa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptomic+analysis+of+planarians+under+simulated+microgravity+or+8g+demonstrates+that+alteration+of+gravity+induces+genomic+and+cellular+alterations+that+could+facilitate+tumoral+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Transcriptomic analysis of planarians under simulated microgravity or 8g demonstrates that alteration of gravity induces genomic and cellular alterations that could facilitate tumoral transformation.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (3), 720(2019).</li>
<li>Best, J. B., Rubinstein, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maze+learning+and+associated+behavior+in+planaria%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+and+Physiological+Psychology%22%5BJournal%5D)">Maze learning and associated behavior in planaria.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 55, 560-566 (1962).</li>
<li>Shomrat, T., Levin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+automated+training+paradigm+reveals+long-term+memory+in+planarians+and+its+persistence+through+head+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">An automated training paradigm reveals long-term memory in planarians and its persistence through head regeneration.</a> The Journal Experimental Biology. 216, Pt 20 3799-3810 (2013).</li>
<li>Robarts-Galbraith, R. H., Newmark, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+organ+trail%3A+insights+into+organ+regeneration+in+the+planarian%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Genetics+%26+Development%22%5BJournal%5D)">On the organ trail: insights into organ regeneration in the planarian.</a> Current Opinion in Genetics & Development. 32, 37-46 (2015).</li>
<li>Ivancovic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Model+systems+for+regeneration%3A+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Model systems for regeneration: planarians.</a> Development. 146 (17), 167684(2019).</li>
<li>Herath, S., Lobo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-inhibition+of+Turing+patterns+explains+the+self-organized+regulatory+mechanism+of+planarian+fission%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Theoretical+Biology%22%5BJournal%5D)">Cross-inhibition of Turing patterns explains the self-organized regulatory mechanism of planarian fission.</a> Journal of Theoretical Biology. 485, 110042(2019).</li>
<li>Animal Diversity. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Dugesia_tigrina/">http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Dugesia_tigrina/</a> (2019).</li>
<li>Itoh, M. T., Shinozawa, T., Sumi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythms+of+melatonin-synthesizing+enzyme+activities+and+melatonin+levels+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythms of melatonin-synthesizing enzyme activities and melatonin levels in planarians.</a> Brain Research. 830 (1), 165-173 (1999).</li>
<li>Itoh, M. T., Igarashi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythm+of+serotonin+levels+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreports%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythm of serotonin levels in planarians.</a> Neuroreports. 11 (3), 473-476 (2000).</li>
<li>Hinrichsen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photosensitivity+and+motility+in+planarian+Schmedtea+mediterranea+vary+diurnally%5BTitle%5D)+AND+%22Chronobiology+International%22%5BJournal%5D)">Photosensitivity and motility in planarian Schmedtea mediterranea vary diurnally.</a> Chronobiology International. 36 (12), 1789-1793 (2019).</li>
<li>Raffa, R. B., Desai, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Description+and+quantification+of+cocaine+withdrawal+signs+in+planaria%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Description and quantification of cocaine withdrawal signs in planaria.</a> Brain Research. 1032 (1-2), 200-202 (2005).</li>
<li>Pagán, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cembranoid+from+tobacco+prevents+the+expression+of+induced+withdrawal+behavior+in+planarian+worms%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">A cembranoid from tobacco prevents the expression of induced withdrawal behavior in planarian worms.</a> European Journal of Pharmacology. 615 (1-3), 118-124 (2009).</li>
<li>Rawls, S. M., Patil, T., Yuvasheva, E., Raffa, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+evidence+that+drugs+of+abuse+produce+behavioral+sensitization+and+cross-sensitization+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">First evidence that drugs of abuse produce behavioral sensitization and cross-sensitization in planarians.</a> Behavioural Pharmacology. 21 (4), 301-313 (2010).</li>
<li>Venturini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pharmacological+study+of+dopaminergic+receptors+in+planaria%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">A pharmacological study of dopaminergic receptors in planaria.</a> Neuropharmacology. 28 (12), 1377-1382 (1989).</li>
<li>Ouyang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+effects+of+Spenda%2C+Equal+and+sucrose%3A+Clues+from+planarians+on+sweeteners%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Behavioral effects of Spenda, Equal and sucrose: Clues from planarians on sweeteners.</a> Neuroscience Letters. 636, 213-217 (2017).</li>
<li>Pagán, O. R., Montgomery, E., Deats, S., Bach, D., Baker, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+nicotine-induced%2C+curare-sensitive%2C+behavior+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochemical+Research%22%5BJournal%5D)">Evidence of nicotine-induced, curare-sensitive, behavior in planarians.</a> Neurochemical Research. 40 (10), 2087-2090 (2015).</li>
<li>Shibata, N., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+interference+in+planarians%3A+feeding+and+injection+of+synthetic+dsRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">RNA interference in planarians: feeding and injection of synthetic dsRNA.</a> Methods in Molecular Biology. 1774, 455-466 (2018).</li>
<li>Pagán, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversal+of+cocaine-induced+planarian+behavior+by+parthenolide+and+related+sesquiterpene+lactones%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Reversal of cocaine-induced planarian behavior by parthenolide and related sesquiterpene lactones.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 89 (2), 160-170 (2008).</li>
<li>Vouga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereochemistry+and+neuropharmacology+of+a+%27bath+salt%27+cathinone%3A+S-enantiomer+of+mephedrone+reduces+cocaine-induced+reward+and+withdrawal+in+invertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Stereochemistry and neuropharmacology of a 'bath salt' cathinone: S-enantiomer of mephedrone reduces cocaine-induced reward and withdrawal in invertebrates.</a> Neuropharmacology. 91, 109-116 (2015).</li>
<li>Chan, J. D., Marchant, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+and+functional+genetic+assays+to+manipulate+regeneration+of+the+planarian+Dugesia+japonica%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Pharmacological and functional genetic assays to manipulate regeneration of the planarian Dugesia japonica.</a> Journal of Visualized Experiments. (54), e3058(2011).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

Um ensaio de motilidade planária simples e acessível é descrito para determinar os efeitos estimulantes e de retirada de produtos naturais. Como modelo comportamental é necessário ter protocolos rigorosos para marcar movimento e definições claras de quaisquer comportamentos para padronizar observações entre diferentes experimentadores. As ideias apresentadas oferecem uma demonstração de como isso pode ser alcançado. Cada laboratório que utilizar este protocolo deve adaptar as informações apresentadas para se adequar aos ...

O protocolo descrito utiliza motilidade planária para fornecer um meio de avaliar os efeitos biomoduladores das substâncias naturais. Foi especificamente adaptado para determinar se essas substâncias funcionam como estimulantes, e se elas foram então associadas a um comportamento de retirada mensurável1. Este ensaio, conhecido como teste de velocidade locomotor planária (pLmV), foi usado pela primeira vez para testar os conhecidos agentes farmacológicos2,3. A aplicação deste ensaio planário baseado em motilidade tem crescido desde então em popularidade e tem sido adotada por diferentes laboratórios interessados em outras substâncias além dos produtos naturais4,,5. Para este ensaio, um planário é colocado em uma placa de Petri contendo água de nascente ou água de nascente contendo um biomodulador dissolvido. Como o prato em si é colocado em papel gráfico, o número de linhas de grade cruzadas pelo animal com o tempo à medida que se move sobre o recipiente pode ser usado para determinar a taxa de movimento em cada condição. O teste claro/escuro, também chamado de teste de preferência de local condicionado (CPP), é outra variação sobre o tema do monitoramento da motilidade planária, e avalia a rapidez com que os animais respondem e migram para um ambiente escurecido6,7. O rastreamento de vídeo dos movimentos planários também pode ser analisado usando programas de computador e rastreamento do Centro de Massa (COM)8,,9,,10,,11.
Usar o planário como modelo animal para tais estudos oferece várias vantagens sobre outros animais, pois o experimentador pode facilmente controlar o ambiente de ensaio. Especificamente, passar fome aos planários antes da experimentação pode impedir sua exposição a outros agentes nutricionais ou farmacológicos que poderiam confundir os resultados, e o biomodulador específico sob investigação pode ser introduzido aos planários simplesmente adicionando-o diretamente à água da cultura, padronizando assim a exposição. Como os planários possuem um sistema nervoso e neurotransmissores que lembram animais de "alta ordem", a fisiologia e as respostas experimentais desses animais a estímulos neuromusculares são consideradas biologicamente relevantes para outros organismos12,,13,,14,,15,16. Além disso, como os planários são relativamente baratos e diretos de manter em laboratório, eles oferecem um modelo biológico acessível para muitos pesquisadores.
Como um animal experimental, os planários são adequados para uma ampla gama de estudos. Por exemplo, nosso grupo, assim como outros pesquisadores usam planários para estudar tumorigênese17,,18,,19. Os planários também exibem uma série de comportamentos de resposta a estímulos químicos, térmicos, gravitacionais, elétricos, fotográficos e magnéticos que formaram a base de outros sistemas de ensaio. Alguns desses efeitos têm sido utilizados para estudar a aprendizagem e a memória nesses animais20,21,22,23,24,25,26,27. O uso primário do modelo planário na literatura atualmente enfoque na atividade de células-tronco pluripotentes planárias, chamadas neoblastos, e seu papel na regeneração28,,29,30. Assim, a adoção do modelo aqui descrito permite um estudo mais aprofundado usando outros ensaios baseados em planários para fornecer uma compreensão mais ampla de como produtos naturais e outros biomoduladores afetam o organismo.

<table><tbody><tr><td>Água Engarrafada - 1 Gal.</td><td>Polônia Primavera</td><td>N/A</td><td>Água de nascente para cultura de planárias e para preparar soluções</td></tr><tr><td>Planaria marrom (Dugesia tigrina)</td><td>Carolina Biological Supply Company</td><td>132954</td><td>Planária marrom viva (outras espécies são aceitáveis)</td></tr><tr><td>Pincel plano</td><td>Royal Crafter's Choice</td><td>9159</td><td>Pincéis de aquarela planos para limpeza de recipientes de cultura de planárias</td></tr><tr><td>Placa de Petri de vidro - 10 cm</td><td>Kimax</td><td>N/A</td><td>10 cm de diâmetro (vidro) Placas de Petri para ensaio de pLmV</td></tr><tr><td>Placa de Petri de vidro - 5 cm</td><td>Kimax</td><td>N/A</td><td>5 cm e placas de Petri para enxaguar planárias durante experimentos de retirada e para habituação de estimulantes</td></tr><tr><td>Papel quadriculado</td><td>Qualquer</td><td>N/A</td><td>Papel quadriculado padrão de 0,5 cm para ensaio pLmV</td></tr><tr><td>Visualizador iPEVO (software)</td><td>iPEVO</td><td>https://www.ipevo.com/software/visualizer</td><td>Software de câmera de documentos para captura e gravação de vídeo</td></tr><tr><td>Conjunto de Metalware com Suporte e Anel de Retorta</td><td>Qualquer</td><td>N/A</td><td>Suporte de anel de laboratório de química padrão para segurar uma câmera de celular se usado</td></tr><tr><td>Ovo Orgânico</td><td>Qualquer</td><td>N/A</td><td>Ovo orgânico ou fígado bovino para alimentação planarains</td></tr><tr><td>Garrafa de Policarbonato com Tampa de Rosca - 10 mL</td><td>Beckman</td><td>N/A</td><td>Frascos de plástico para armazenar volumes de 5 a 10 mL para habituação de estimulantes</td></tr><tr><td>Recipiente de armazenamento redondo - 10 cm</td><td>Ziploc</td><td>N/A</td><td>10 cm Recipientes redondos de armazenamento de alimentos para aproximadamente 90 planárias ou menos</td></tr><tr><td>Pincel de tinta de água redondo</td><td>LOEW-Cornell</td><td>N/A</td><td>Pincéis de tinta aquarela redondos pequenos (números 3 a 6) -</td></tr><tr><td>pipeta de transferência</td> suave <td>Qualquer</td><td>N/A</td><td>Pipetas de transferência de plástico de diâmetro largo (5 mL) para mover planárias</td></tr><tr><td>Câmera de documentos USB</td><td>iPEVO</td><td>CDVU-06IP</td><td>Câmera de documentos (ou outra câmera ou câmera de telefone celular)</td></tr></tbody></table>

um ensaio planário de motilidade para medir as propriedades biomodulantes de produtos naturais

A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products

Um meio simples e controlável de usar o planário não parasitário, Dugesia tigrina, um verme aquático de vida livre, para estudar as propriedades estimulantes e de retirada de produtos naturais é descrito. Ensaios experimentais que se beneficiam de aspectos únicos da fisiologia planária têm sido aplicados a estudos sobre cicatrização de feridas, regeneração e tumorigênese. Além disso, como os planários apresentam sensibilidade a uma variedade de estímulos ambientais e são capazes de aprender e desenvolver respostas condicionadas, eles podem ser usados em estudos comportamentais que examinam a aprendizagem e a memória. Os planários possuem uma simetria bilateral básica e um sistema nervoso central que usa sistemas neurotransmissores favoráveis a estudos que examinam os efeitos dos biomoduladores neuromusculares. Consequentemente, sistemas experimentais que monitoram o movimento planário e a motilidade foram desenvolvidos para examinar o vício e a retirada de substâncias. Como a motilidade planária oferece o potencial de um sistema de ensaio de motilidade sensível e facilmente padronizado para monitorar o efeito dos estímulos, o teste de velocidade locomotor (pLmV) planário foi adaptado para monitorar tanto comportamentos de estimulação quanto de retirada por planários através da determinação do número de linhas de grade cruzadas pelos animais com o tempo. Aqui, a técnica e sua aplicação são demonstradas e explicadas.

O laboratório configurado e a preparação do espaço de trabalho para execução do ensaio pLmV devem ser concluídos antes do início da experimentação. Isso inclui a preparação do recipiente de habitação, o recipiente de lavagem, se necessário (para experimentos de retirada), placa de Petri sobre papel de grade laminada e câmera devidamente colocada(Figura 1). Uma vez que todos os vídeos são feitos, é aconselhável usar uma folha de dados comum para padronizar a coleta e apresentação de dados ent...

A motilidade planária é usada para medir as propriedades estimulantes e de retirada de produtos naturais quando comparadas com o movimento dos animais apenas na água da nascente.

Um ensaio planário de motilidade para medir as propriedades biomodulantes de produtos naturais

A straightforward, controllable means of using the non-parasitic planarian, Dugesia tigrina, a free-living aquatic flatworm, to study the stimulant and ...

O Teste de Velocidade Locomotor Planarian é um meio para avaliar rapidamente os efeitos estimulantes e possíveis de retirada para uma variedade de agentes modificadores biológicos que podem afetar a motilidade. Este ensaio é facilmente controlado e fornece um método simples e acessível para gerar dados comportamentais confiáveis até mesmo nas configurações de pesquisa mais básicas. Uma vez que o sistema nervoso planário tem um cérebro rudimentar centralizado, uma simetria bilateral e sistemas neurotransmissores análogos, estudos comportamentais usando esses organismos oferecem insights pré-clínicos sobre possíveis respostas de vertebrados.Experimentos podem ser ainda mais afetados por modificadores fisiológicos, drogas ou mesmo planários geneticamente modificados para fornecer informações sobre os mecanismos biológicos associados. É importante ter o planário para que as transferências entre os contêineres não os enfatizem e padronizem as curvas da linha de grade entre os membros do laboratório. A melhor maneira de obter resultados consistentes a partir deste experimento de ensaio comportamental, é vendo como os usuários experientes os realizaram.Depois de criar uma cultura planária

a-planarian-motility-assay-to-gauge-biomodulating-properties-natural

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Um modelo atraente para estudar a diferenciação das células-tronco dentro de um animal vivo é o platelminto planária. Regeneração é estudado por experimentos amputação simples que são facilmente realizados em um laboratório básico e são passíveis de (farmacológicos e...

Farmacológica e funcional Ensaios genética para manipular Regeneração da planária Dugesia japonica</em

Este vídeo demonstra o uso de um ensaio de locomoção radial para avaliar a disfunção motora em C. elegans expressando a proteína TDP-43 humana do tipo selvagem ou mutante da ALS. Vermes com níveis variados de expressão de TDP-43 do tipo selvagem ou mutante podem rastejar, e seu movimento é medido pela distância radial percorrida a partir do ponto central na placa de ensaio. O ensaio distingue entre deficiências motoras leves, moderadas e graves com base na distância percorrida pelas diferentes...

Avaliação do comprometimento motor em modelos de C. elegans usando o ensaio de locomoção radial

Um método para avaliar quantitativamente a resposta quimiotáctica...

C. elegans Chemotaxis Assay

Um protocolo é descrito para detecção in vivo de efeitos de inibidores mitocondriais no organismo modelo Caenorhabditis elegans e para identificação de potenciais compostos potenciadores. Este protocolo pode ser usado para rastrear bibliotecas de medicamentos em busca de compostos que modulam a função mitocondrial.

A rastreï¿½el<em&gt; In Vivo</em&gt; Ensaio para mitocondrial Modulators Usando Transgenic Bioluminescent<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Este protocolo mostra como para excisar consistentemente olhos planarian (copos óptica), sem perturbar os tecidos circundantes. Utilizando uma agulha de seringa de insulina e, de um ou ambos os olhos pode ser cauterizado para facilitar investigações sobre os mecanismos que regulam a regeneração do olho, a evolução de regeneração visual, e a base neural de comportamento induzida pela luz.

Surgical Ablation Ensaio para Estudar Eye Regeneração em Planárias

Os planários de água doce exibem três marchas (deslizamento, peristalse e scrunching) que são distinguíveis pela análise comportamental quantitativa. Descrevemos um método para induzir o scrunching usando vários estímulos nocivos, quantificação e distinção da peristalse e deslizamento. Usando knockdown genético, demonstramos a especificidade do scrunching como uma leitura fenotípica quantitativa.

Planarian Scrunching como uma leitura comportamental quantitativa para sensoriamento de estímulos nocivos

Apresentamos um protocolo para a caracterização da motilidade e comportamento de uma população de cem células de tamanho mícnico a milímetro usando microscopia de campo brilhante e rastreamento celular. Este ensaio revela que Stentor coeruleus transita por quatro fases comportamentalmente distintas ao regenerar um aparelho oral perdido.

Análise dos padrões de motilidade do Stentor durante e após a regeneração do aparelho oral usando rastreamento celular

Este protocolo descreve dois ensaios sensíveis para discriminação entre prejuízos motores leves, moderados e graves em modelos C. elegans de esclerose lateral amiotrófica, com utilidade geral para cepas de C. elegans , com motilidade alterada.

Avaliação do Comprometimento Motor em C. elegans Modelos de Esclerose Lateral Amiotrófica

O presente protocolo descreve um ensaio para determinar a resposta ao levamisole, um agonista farmacológico de uma classe de receptores de acetilcolina caenorhabditis . Neste ensaio de natação de leveisole líquido, os pesquisadores observam visualmente e quantificam a paralisia dependente do tempo de animais cultivados em placas de 24 poços.

Medindo a sensibilidade de Caenorhabditis para o Receptor acetilcolina Agonista Levamisole

O artigo propõe um novo método in vitro para a avaliação rápida e sensível da toxicidade e ecotoxicidade de poluentes, baseado na motilidade dos hemócitos de Mytilus galloprovincialis . O método visa contribuir para o desenvolvimento de testes de exposição toxicológica e ecotoxicológica mais éticos e sensíveis.

Um ensaio toxicológico e ecotoxicológico baseado na motilidade dos hemócitos do mexilhão (Mytilus galloprovincialis)

As convulsões afetam negativamente várias funções e qualidade de vida. Os vermes Planaria foram expostos a concentrações variadas de quimioconvulsivantes para avaliar seus fenótipos de convulsão e motilidade disruptiva. Este estudo propõe o uso de vermes planárias como modelo para convulsões agudas em humanos e tem importância no desenvolvimento de medicamentos para epilepsia.

Planária como modelo animal para convulsão aguda experimental

Aprenda a avaliar os efeitos de produtos naturais na motilidade de planárias usando o Teste de Velocidade Locomotora. Este método fornece dados comportamentais confiáveis para pesquisa em neurociência e farmacologia.

Um ensaio planário de motilidade para medir as propriedades biomodulantes de produtos naturais

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