Uso de um vaporizador anestésico integrado de baixo fluxo, ventilador e sistema de monitoramento fisiológico para roedores

Este protocolo destaca os melhores usos para um conjunto completo de anestesia e monitoramento fisiológico que inclui um vaporizador eletrônico de baixo fluxo, um ventilador integrado, um oxímetro de pulso e uma almofada de aquecimento de infravermelho distante. Essa metodologia é útil para qualquer instalação com espaço limitado de bancada ou laboratório. Um sistema tudo-em-um também elimina a necessidade de tanques de gás comprimido e equipamentos de monitoramento fisiológico separados.

Demonstrando o procedimento estará Luke Schepers, um estudante de doutorado em Engenharia Biomédica na Purdue University. Para configurar o vaporizador de baixo fluxo, selecione uma fonte de gás de arraste e remova a tampa vermelha da porta de entrada na parte traseira do sistema para permitir que o sistema absorva o ar ambiente. Se estiver usando uma fonte de gás comprimido, use um regulador de pressão e um redutor de pressão ajustados para 15 libras por polegada quadrada.

E conecte o dispositivo à porta de gás do compressor na parte traseira do sistema. Conecte o recipiente de carvão à porta de exaustão. E conecte o conector acessório às portas inspiratória e expiratória na parte frontal do sistema.

Conecte a câmara de indução aos galhos com clipes azuis e o cone do nariz aos galhos com clipes brancos. Para configurar o ventilador integrado, conecte a tubulação do conector de intubação aos galhos com os clipes amarelos. Para calibrar o espaço morto do ventilador na tela Vent Run, toque em Configuração e calibração e testes, selecione Medir espaço morto e pressione Discar B.To configurar o oxímetro de pulso integrado, conecte o sensor da porta de estatísticas do mouse na parte traseira do sistema.

Para configurar a almofada de aquecimento de infravermelho distante, conecte a almofada de aquecimento à porta de alimentação da almofada na parte frontal do sistema. Em seguida, conecte um sensor à porta do sensor do corpo e o outro à porta do sensor da almofada e prenda o sensor da almofada à almofada de aquecimento. Para definir as configurações do sistema para administração de anestesia na tela de execução do Anest, toque em Configuração e selecione o agente anestésico.

Toque, digite anest e gire o Dial B para selecionar isoflurano ou sevoflurano. Para definir este tamanho de seringa, toque em Tamanho da seringa e gire o botão B para selecionar um tamanho. Toque em Voltar para retornar à tela Anest Run e use o adaptador da tampa do frasco para encher a seringa com anestésico.

Conecte a seringa ao sistema de anestesia e toque em Remover para mover o bloco empurrador para trás, conforme necessário. Para preparar a seringa, pressione e segure o primer para mover o bloco empurrador para frente até que o bloco toque a parte superior do êmbolo da seringa. Para configurar a ventilação mecânica, abra a guia Vent Run Screen e pressione Setup.

Pressione Peso corporal e insira o peso do animal. Em seguida, pressione Prioridade para selecionar a ventilação controlada por volume ou pressão. A frequência respiratória e os volumes correntes apropriados serão ajustados automaticamente.

Para definir os parâmetros de oximetria de pulso, abra a guia Oxy run screen e pressione Setup. pressione Minimum HR e gire o Dial B para definir a leitura mínima permitida da frequência cardíaca. Para definir os parâmetros de aquecimento na tela de execução a quente, pressione Configuração e selecione um método de aquecimento e uma configuração de temperatura alvo.

Para anestesiar o mouse a partir da tela de execução do Anest, toque em Indução para iniciar o fluxo de ar. A vazão de indução padrão é de 500 mililitros por minuto. Gire o botão A para ajustar a taxa de fluxo conforme necessário.

Coloque o mouse na câmara de indução e feche bem a tampa. Ajuste o botão de concentração do agente anestésico para 3% para isoflurano. A vazão de indução padrão é de 500 mililitros por minuto.

Gire o botão A para ajustar a taxa de fluxo conforme necessário. Pressione Entregar para iniciar a administração do anestésico. Quando o animal estiver suficientemente anestesiado, toque em Indução novamente e, em seguida, Lave a câmara para reduzir o gás anestésico residual na câmara.

Abra os clipes que levam ao cone do nariz e feche os clipes que levam à câmara. Toque no cone do nariz para iniciar o fluxo de ar e encaixe imediatamente o cone do nariz no animal. Centralize o animal na almofada de aquecimento infravermelho e insira o sensor do animal como uma sonda retal para controlar a temperatura corporal.

Para iniciar a ventilação mecânica, coloque o animal anestesiado na etapa de intubação e utilize um fio fixado na etapa de intubação vertical para suspender o animal de seus incisivos superiores. Exibe suavemente a língua do animal para o lado e usa as luzes fornecidas no kit de inovação para visualizar a traqueia. Insira cuidadosamente o tubo endotraqueal.

O posicionamento correto pode ser verificado conectando uma pequena bexiga de ar ao tubo e verificando a inflação pulmonar. Toque em Parar cone do nariz para interromper o fluxo de ar, feche os clipes no cone do nariz e abra os clipes na tubulação de ventilação. Conecte o tubo endotraqueal ao tubo de ventilação e toque em Iniciar ventilador para iniciar a ventilação.

Para iniciar o monitoramento fisiológico, prenda levemente o sensor em uma pata traseira do animal, o oxímetro de pulso começará automaticamente a ler a frequência cardíaca e a saturação de oxigênio no sangue. Toque na guia Tela de execução do Oxy para view os dados de oximetria de pulso. A frequência cardíaca e a saturação de oxigênio no sangue podem ser monitoradas durante a manutenção por meio da simetria de pulso.

Nesta análise representativa, as frequências cardíacas e a saturação de oxigênio no sangue do animal permaneceram estáveis, com poucas alterações significativas observadas em ambas as medições para todos os grupos. E com a saturação de oxigênio no sangue permanecendo entre 82 a 99%Esta técnica permite que os pesquisadores administrem anestesia com taxas de fluxo mais baixas e sem a necessidade de gás comprimido. Taxas de fluxo mais baixas levam a menos desperdício de gás e menos exposição para o pessoal de pesquisa.