Name: Um modelo de mouse de instabilidade lombar (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-23T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 28 s
Description: Aprenda a criar um modelo de degeneração de disco intervertebral lombar em camundongos C57BL/6 por ressecção cirúrgica. Este método reprodutível permite estudar alterações estruturais e celulares em curto prazo.

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Este trabalho foi apoiado pela Fundação Nacional de Ciência Natural da China (81973607) e Essential Drug Research and Development (2019ZX09201004-003-032) do Ministério da Ciência e Tecnologia da China.

As investigações descritas estão em conformidade com as Diretrizes para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório dos Institutos Nacionais de Saúde e foram aprovadas pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Xangai. Todas as manipulações cirúrgicas foram realizadas sob anestesia profunda e os animais não sentiram dor em nenhum momento durante o procedimento.
1. Preparação para pré-operação
<ol><li>Esterilização do instrumento: Instrumentos cirúrgicos esterilizados a vapor em uma autoclave (121 °C por 15 min) antes da cirurgia. Embalar instrumentos em um recipiente de metal e mantê-los até que sejam usados na cirurgia.</li>
	<li>Configuração da plataforma de cirurgia: Atribua uma área de banco de pelo menos 60 cm x 60 cm para a operação. Limpe a superfície da área com 75% de álcool e cubra com uma toalha médica descartável. Coloque um pacote de instrumentos cirúrgicos estéreis, reagentes, itens cirúrgicos em uma toalha médica descartável dentro da parte superior de 1/3 da área. Deixe o restante 2/3 da área limpa para operação cirúrgica. Adicione um hotpad por baixo da almofada cirúrgica para suporte térmico.</li>
	<li>Preparação animal<ol>
<li>Coloque o animal (camundongos C57BL/6J, macho, de 8 semanas) na câmara de indução. Ligue o vaporizador a um nível de indução de 4% para isoflurane e 4 L/min para oxigênio. Após o animal ser totalmente anestesiado, mantenha o anestésico com o cone do nariz e o parto anestésico a um nível de 1,5% para isoflurane e 0,4 L/min para oxigênio durante a cirurgia. Monitore o animal para respirar.</li>
		<li>Aplique pomada ocular de clortracícte para evitar o ressecamento da córnea durante a cirurgia.</li>
		<li>Raspe a área cirúrgica na superfície dorsal da região torácica inferior até o topo da região sacral usando um pequeno aparador animal. Remova a pele raspada com lenços umedecidos.</li>
		<li>Aplique creme depilatório na área raspada e deixe-o lá não mais do que 3 min. Retire o creme com gaze e lave com 2 mL de soro fisiológico estéril de 0,9%.</li>
		<li>Coloque uma almofada cilíndrica cirúrgica personalizada(Figura 2A)sob o abdômen do camundongo para elevar a coluna lombar e facilitar o funcionamento cirúrgico.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Exposição do terço lombar ao quinto lombar (L3–L5) processos espinhosos
<ol><li>Use o dedo indicador para tocar os processos espinhosos subcutâneos das vértebras lombares, que são mais externas, e compare com vértebras torácicas e vértebras sacrais para identificar a região lombar.</li>
	<li>Enxágüe a pele usando 75% de álcool. Realize uma incisão de pele média de 3-4 cm sobre a região madeireira da região torácica média até o quadril usando uma lâmina de bisturi para expor a fáscia.</li>
	<li>Identifique a coluna lombar pela morfologia da fáscia posterior inserida nas pontas dos processos espinhosos. Em detalhes, a terceira lombar (L3) para o primeiro sacral (S1) fasciae são distintas de outras fáscias por suas formas "V". A última dica "V" se conecta à primeira fáscia sacral (S1) e a primeira dica "V" corresponde ao processo spinous L3 (Figura 2B).</li>
	<li>Faça as incisões musculares paraspinos posteriores ao longo dos processos espinhosos de L3 a L5 em ambos os lados lateralmente com uma lâmina de bisturi(Figura 2C). Controle a profundidade da incisão em direção às facetas para reduzir a hemorragia.</li>
	<li>Separe as camadas musculares usando duas fórceps oftálmicas para expor processos espinhosos L3 a L5 e ligamentos supraspinos.</li>
</ol>3. Ressecção de processos espinhosos L3–L5 junto com os ligamentos
<ol><li>Separar processos espinhosos individuais cortando ligamentos interspinos usando tesouras de Vênus(Figura 2D).</li>
	<li>Ressecante os processos spinous L3–L5 juntamente com os ligamentos interspinos com cisalhamento de Vênus(Figura 2E).</li>
	<li>Suturar a incisão da pele com tranças de seda estéril (tamanho sutura 5.0) sem recolocar os músculos paravertebral.</li>
	<li>Aplique a Pomada Ocular do Cloridrato de Clortracíctada no local cirúrgico.</li>
	<li>Administre buprenorfina-SR (25 L por grama de peso do rato) imediatamente após a cirurgia de LSI para analgesia.</li>
	<li>Coloque os animais em uma câmara quente e monitore durante a recuperação da anestesia. Monitore a ingestão de alimentos e água antes de devolver os animais à gaiola.</li>
	<li>Monitore o animal uma vez por dia durante os primeiros 3 dias após a operação. O animal deve ser capaz de ter um apetite normal e deve curar sem sinal de pus, hemorragia ou inchaço. Eles podem ter um pequeno prejuízo na locomoção.</li>
	<li>Realizar operações falsas apenas pelo desprendimento dos músculos paravertebral posteriores das vértebras L3-L5.</li>
</ol>

<ol><li>Makino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+disc+degeneration+progression+in+young+women+in+their+20%27s%3A+a+prospective+ten-year+follow+up%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Science%3A+Official+Journal+of+the+Japanese+Orthopaedic+Association%22%5BJournal%5D)">Lumbar disc degeneration progression in young women in their 20's: a prospective ten-year follow up.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 22 (4), 635-640 (2017).</li>
<li>Lee, Y. C., Zotti, M. G. T., Osti, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operative+management+of+lumbar+degenerative+disc+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">Operative management of lumbar degenerative disc disease.</a> Asian Spine Journal. 10 (4), 801-819 (2016).</li>
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<li>Lim, K. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovine+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+model+utilizing+a+lateral+retroperitoneal+drill+bit+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Ovine lumbar intervertebral disc degeneration model utilizing a lateral retroperitoneal drill bit injury.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (123), e55753(2017).</li>
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<li>Nemoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+changes+in+intervertebral+discs+after+smoking+and+cessation%3A+experimental+study+using+a+rat+passive+smoking+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Science%3A+Official+Journal+of+the+Japanese+Orthopaedic+Association%22%5BJournal%5D)">Histological changes in intervertebral discs after smoking and cessation: experimental study using a rat passive smoking model.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 11 (2), 191-197 (2006).</li>
<li>Mulholland, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+myth+of+lumbar+instability%3A+the+importance+of+abnormal+loading+as+a+cause+of+low+back+pain%5BTitle%5D)+AND+%22European+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">The myth of lumbar instability: the importance of abnormal loading as a cause of low back pain.</a> European Spine Journal. 17 (5), 619-625 (2008).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanosignaling+activation+of+TGF%CE%B2+maintains+intervertebral+disc+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Research%22%5BJournal%5D)">Mechanosignaling activation of TGFβ maintains intervertebral disc homeostasis.</a> Bone Research. 5, 17008(2017).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excessive+activation+of+tgf%CE%B2+by+spinal+instability+causes+vertebral+endplate+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Excessive activation of tgfβ by spinal instability causes vertebral endplate sclerosis.</a> Scientific Reports. 6, 27093(2016).</li>
<li>Ni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+innervation+in+porous+endplates+by+Netrin-1+from+osteoclasts+mediates+PGE2-induced+spinal+hypersensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Sensory innervation in porous endplates by Netrin-1 from osteoclasts mediates PGE2-induced spinal hypersensitivity in mice.</a> Nature Communications. 10 (1), 5643(2019).</li>
<li>Liu, S., Cheng, Y., Tan, Y., Dong, J., Bian, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligustrazine+prevents+intervertebral+disc+degeneration+via+suppression+of+aberrant+tgf%CE%B2+activation+in+nucleus+pulposus+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Ligustrazine prevents intervertebral disc degeneration via suppression of aberrant tgfβ activation in nucleus pulposus cells.</a> BioMed Research International. 2019, 5601734(2019).</li>
<li>Boos, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+age-related+changes+in+lumbar+intervertebral+discs%3A+2002+Volvo+Award+in+basic+science%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Classification of age-related changes in lumbar intervertebral discs: 2002 Volvo Award in basic science.</a> Spine. 27 (23), 2631-2644 (2002).</li>
<li>Miyamoto, S., Yonenobu, K., Ono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+cervical+spondylosis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Experimental cervical spondylosis in the mouse.</a> Spine. 16, 10 Suppl 495-500 (1991).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

Desenvolvemos o modelo de camundongo de instabilidade lombar baseado no modelo de camundongos espondilose cervical no qual os músculos paravertebral posteriores das vértebras foram separados e os processos espinhosos, juntamente com os ligamentos supraspinos e interspinos foram ressecados25. Realizamos uma operação semelhante na coluna lombar, que tem processos espinhosos mais proeminentes. O modelo de mouse LSI desenvolveu IDD semelhante na coluna lombar.
As vantagens ...

A degeneração do disco intervertebral (IDD) é comumente vista no envelhecimento e até mesmo em jovens causada por muitos fatores1. A cirurgia para pacientes que sofrem de IDD, causando dor lombar e movimento prejudicado, geralmente é realizada em estágio posterior ou em casos graves e tem riscos potenciais como não-união ou infecção2. O tratamento não-operacional ideal requer uma compreensão abrangente do mecanismo de IDD. O modelo animal IDD serve como ferramenta crucial para estudos do mecanismo de IDD e avaliação do tratamento do IDD.
Animais maiores foram escolhidos para modelos de IDD, como primatas, ovinos, cabras, cães e coelhos devido à sua semelhança com a estrutura anatômica humana em grande medida e à forte operabilidade em termos de tamanho de discos interverteberais (IVDs)3,4,5,6,7,8. No entanto, esses modelos animais são demorados e intensivos emcustos 9. O IVD do Rato é uma representação ruim do IVD humano com base em medições geométricas da proporção, razão de pulposo de núcleo para área discal, e altura normalizada10. Apesar da diferença de tamanho, o segmento ivD lombar do rato exibe propriedades mecânicas semelhantes ao IVD humano, como compressão e rigidez de torção11. Além disso, o modelo de IDD do mouse tem a vantagem do baixo custo, desenvolvimento de IDD relativamente curto e mais opções para animais e anticorpos geneticamente modificados utilizados em estudos mais mecanicistas12,13,14,15.
Os modelos de IDD induzidos por experimentais variam de indutores e aplicações. Por exemplo, a degeneração da matriz extracelular induzida pela colagem (ECM) é apropriada para a pesquisa de regeneração de ECM16. Fenótipo geneticamente modificado são adequados para estudar a função genética no processo de IDD e em terapias genéticas17. Modelos de incisão fibrosa e fumaça de Annulus imitam trauma e não inflamação induzida iDD12,18.
A instabilidade espinhal (SI) leva a uma coluna instável que não está em um estado de equilíbrio ideal. Pode ser causada pelo movimento anormal de um segmento de movimento lombar devido à fraqueza do tecido de apoio circundante, como ligamentos e músculos. Também é comumente visto após a operação de fusãoespinhal 19. O SI é considerado como a principal causa do IDD. Por isso, buscamos desenvolver um modelo de camundongos SI (focado na coluna lombar) que imita o processo de IDD humano20,21.
No protocolo, introduziu-se o procedimento de estabelecimento do modelo de camundongos de instabilidade lombar (LSI) pela ressecção do terço lombar (L3) para o quinto lombar (L5) processos espinhosos, juntamente com os ligamentos supraespinhals e interspinos(Figura 1A,B). O modelo animal desenvolve IDD já em uma semana pós-cirurgia, como mostrado pela hipertrofia e porosidade em placas finais (EPs). O volume de IVD começa a diminuir 2 semanas após a cirurgia até 16 semanas, juntamente com o aumento do escore de IVD, o que indica o grau de IDD. Acreditamos que o procedimento detalhado e visualizado é útil para os pesquisadores estabelecerem o modelo de camundongos LSI em seu laboratório e aplicarem-se à pesquisa de IDD conforme necessário.

<table><tbody><tr><td>Pomada para os olhos de cloridrato de clortetraciclina</td><td>Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>H31021931</td><td>Prevenir o olho seco, Prevenir a infecção da ferida</td></tr><tr><td>C57BL / 6J camundongos machos</td><td>Tian-jiang Pharmaceuticals Company (Jiangsu, CN)</td> <td>SCXK2018-0004</td><td>Modelo animal</td></tr><tr><td>Toalha médica descartável</td><td>Henan Huayu Medical Devices Co., Ltd.</td><td>20160090</td><td>Plataforma para operação cirúrgica</td></tr><tr><td>Equipamento de anestesia inalante</td><td>MIDMARK</td><td>Matrx 3000</td><td>Anestesia</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd.</td><td>1903715</td><td>Anestesia</td></tr><tr><td>Cloridrato de lidocaína</td><td>Shandong Hualu Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>H37022839</td><td>Alívio da dor</td></tr><tr><td>Agulha de sutura médica</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td><td>20S0401J</td><td>Sutura pele</td></tr><tr><td>Fórceps oftálmico</td><td>Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Fábrica de instrumentos cirúrgicos</td><td>JD1050</td><td>Clipe a pele</td></tr><tr><td>Tesoura oftálmica (10cm)</td><td>Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Fábrica de instrumentos cirúrgicos</td><td>Y00030</td><td>Incisão da pele</td></tr><tr><td>trançada de seda</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td><td>11V0820</td><td></td></tr><tr><td>Aparador de animais de pequeno porte de pele de sutura</td><td>Shanghai Feike Electric Co., Ltd.</td><td>FC5910</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas cirúrgicas estéreis para depilação (12 #)</td> <td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td><td>35T0707</td><td>Incisão muscular</td></tr><tr><td>Veet creme de depilação</td><td>RECKITT BENCKISER (Índia) Ltd</td><td>NA</td><td>Depilação</td></tr><tr><td>Venus tesouras</td><td>Mingren equipamento médico</td><td>Comprimento: 12,5 cm</td><td>Clipe o músculo e processo espinhoso</td></tr></tbody></table>

um modelo de mouse de instabilidade lombar

A Mouse Model of Lumbar Spine Instability

A degeneração do disco intervertebral (IDD) é uma mudança patológica comum que leva à dor lombar. São desejados modelos animais adequados para entender os processos patológicos e avaliar novas drogas. Aqui, introduzimos um modelo de mouse de instabilidade lombar (LSI) induzido cirurgicamente que desenvolve IDD a partir de 1 semana após a operação. Em detalhes, o camundongo submetido à anestesia foi operado por incisão lombar, exposição de processos espinhosos L3-L5, descolamento de músculos paraspinos, ressecção de processos e ligamentos e fechamento da pele. Foram escolhidos para observação os IVDs L4-L5. O modelo LSI desenvolve IDD lombar por porosidade e hipertrofia em placas finais em estágio inicial, diminuição no volume de disco intervertebral, encolhimento na pulposo do núcleo em um estágio intermediário e perda óssea em vértebras lombares (L5) em um estágio posterior. O modelo de mouse LSI tem as vantagens da forte operabilidade, sem exigência de equipamentos especiais, reprodutibilidade, inexpensivo e período relativamente curto de desenvolvimento de IDD. No entanto, a operação LSI ainda é um trauma que causa inflamação na primeira semana após a operação. Assim, este modelo animal é adequado para estudo de IDD lombar.

O modelo de mouse LSI é aplicado nos estudos do mecanismo IDD, tratamento de IDD, degeneração da placa endplata (EP), como esclerose, e inervação sensorial em EP20,21,22,23. O mouse LSI desenvolve alterações degenerativas de IDD e EP, conforme identificado, pela diminuição do volume e altura do IVD, aumento do volume de EP e aumento das pontuações de IVD e EP.
A colu...

Desenvolvemos um modelo de rato de degeneração de disco intervertebral lombar por ressecção de processos spinous L3–L5, juntamente com ligamentos supra e inter-espinhosos e desprendimento de músculos paraspinos.

Um modelo de mouse de instabilidade lombar

Intervertebral disc degeneration (IDD) is a common pathological change leading to low back pain. Appropriate animal models are desired for understanding ...

Trata-se de uma cirurgia para induzir o modelo de camundongos que oferece uma alternativa para estudos relacionados à degeneração do disco intervertebral lombar. Este modo LSI robusto não requer nenhum equipamento especial. É reprodutível e pode ser usado para induzir a degeneração do disco intervertebral em um período relativamente curto de tempo.Controlar as profundidades de incisão e a hemorragia e realizar a ressecção de cada processo interspino são duas despesas fundamentais para a implantação do nosso sucesso para o experimento. Depois de confirmar a falta de resposta ao reflexo do pedal, coloque um anestinado de oito semanas de idade, macho, C57 preto seis mouse em uma almofada cirúrgica na posição supina e aplique pomada aos olhos do animal. Use um pequeno aparador animal para raspar a área cirúrgica da região torácica inferior até o topo da região sacral e remover a pele raspada com lenços umedecidos.Aplique creme depilatório na área raspada usando gaze para remover o creme após não mais do que três minutos e lave a pele exposta com dois mililitros de soro fisiológico estéril de 0,9. Em seguida, coloque uma almofada cilíndrica cirúrgica feita sob o abdômen para elevar a coluna lombar. Para expor as vértebras L3 e L5 use o dedo indicador para tocar os processos espinhosos subcutâneos das vértebras lombares e palpato para comparar os processos com os das vértebras torácicas e vértebras sacrais para identificar a região lombar.Enxágüe a pele com 75% de álcool, e usando um microscópio dissecando use um bisturi para fazer uma incisão de pele média de três a quatro centímetros sobre a região lombar da região torácica média até o quadril. Identifique a coluna lombar pela forma V da fáscia posterior inserida, na ponta para que os processos espinhosos e use o bisturi para fazer incisões musculares paraspinos posteriores rasas ao longo dos processos espinhosos de L3 a L5 lateralmente em ambos os lados da coluna. Em seguida, use dois pares de fórceps oftálmicos para separar as camadas musculares para expor os processos espinhosos L3 a L5 e ligamentos supraspinos.Para separar processos espinhosos individuais, utilize vernosas para cortar ligamentos interspinos e para ressecção dos processos espinhosos L3 a L5 e ligamentos interspinosos. Em seguida, use suturas trançadas de seda estéreis cinco para fechar a incisão da pele sem recolocar os músculos paravertebral e aplicar a pomada de clorridrato de clortetracillina ao local cirúrgico. A análise histomorfométrica 3D permite a medição do disco intervertebral, enquanto a análise estrutural 3D permite quantificação do volume total do tecido.O volume do disco intervertebral aumenta significativamente uma semana após a cirurgia antes de diminuir de duas a 16 semanas após o procedimento consistente com uma diminuição da altura do disco intervertebral medida durante o mesmo período de tempo. O aumento das cavidades dentro das placas finais cranianas também é observado em camundongos LSI, quantificados por uma porcentagem aumentada de valores de separação trabecular maior ou igual a 0,089 e um aumento significativo nos volumes finais pós-cirurgia. As placas finais do modelo exibem um fenótipo semelhante, indicando que o LSI leva à hipertrofia da placa final e ao aumento do número de cavidades.Os volumes de vértebras L5 aumentam ligeiramente após a cirurgia com diferenças estatísticas observadas em 16 semanas. Uma diminuição significativa da relação de volume de tecido ósseo para total também está presente 16 semanas após a cirurgia, indicando que o LSI causa perda óssea vertebral em um estágio posterior. Uma redução nos vacuoles intracelulares das células de pulposo do núcleo também é acelerada em animais LSI com maior número de osteoclatos observados em placas finais de LSI.Este modelo pode ser modificado anexando diferentes vértebras, como apenas a quinta lombar, ou da primeira lombar à quinta lombar.

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Um exame longitudinal de perda óssea nos fêmures e tíbias de ratos adultos foi realizada após uma lesão da medula espinhal usando seqüencial de baixa dose de raios-X scans. Tibia perda óssea foi detectada ao longo do estudo, enquanto a perda óssea no fêmur não foi detectado até 40 dias após a lesão.

Avaliação longitudinal do rato Perda Hind Limb óssea após lesão medular usando Novel, In vivo Metodologia,

Neste vídeo, descrevemos o procedimento cirúrgico para induzir instabilidade da coluna lombar em um modelo de camundongo, ressecando o processo espinhoso lombar L3 a L5 junto com os ligamentos supraespinhosos e interespinhosos.

Indução Cirúrgica da Instabilidade da Coluna Lombar em Modelo de Camundongo: Um Procedimento Cirúrgico para a Ressecção dos Processos Espinhosos Lombares e Ligamentos Conectados em Modelo Murino

Fonte: Kumar, S., et. al. Modelo de camundongo de úlceras por pressão após lesão medular. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra uma indução detalhada de lesão medular em camundongos. O camundongo anestesiado é dissecado para expor as vértebras T9-T10 e seus processos espinhosos são removidos. A medula espinhal exposta é então seccionada para infligir a lesão. A área cirúrgica é então fechada e o camundongo pode se recuperar.

Gerando um modelo de camundongo com uma lesão na medula espinhal

Controlada por laceração do colo do útero em camundongos

Este artigo descreve um método para gerar uma lesão por compressão da medula espinhal (LM) reprodutível no camundongo neonatal. O modelo fornece uma plataforma vantajosa para estudar os mecanismos de plasticidade adaptativa subjacentes à recuperação funcional espontânea.

A Neonatal do rato Spinal Cord Injury Compression Modelo

Apresentamos um modelo de lesão medular contundente baseado em deslocamento de tecido que pode produzir uma lesão contundente consistente da medula espinhal em camundongos adultos.

Um Modelo de Lesão Medular Contusiva Baseado em Cilindrada de Tecidos em Ratos

O protocolo descreve um novo modelo in vivo de infecção de implante espinhal em camundongos, onde um implante de fio k de aço inoxidável é infectado com Staphylococcus aureus Xen36 bioluminescente. A carga bacteriana é monitorada longitudinalmente com imagens bioluminescentes e confirmada com contagens de unidades formadoras de colônias após a eutanásia.

Modelo in vivo de infecção de implante espinhal em camundongos

A articulação do complexo tornozelo-subtalar (JSCA) é o núcleo do pé e desempenha um papel fundamental no controle do equilíbrio nas atividades diárias. Lesões esportivas muitas vezes levam à instabilidade nessa articulação. Aqui, descrevemos um modelo murino de instabilidade induzida por transecção ligamentar da JSCA.

Um Modelo de Instabilidade Articular do Complexo Tornozelo-Subtalar em Camundongos

Técnicas minimamente invasivas e um simples dispositivo laboratorial melhoram a reprodutibilidade do modelo de lesão medular, reduzindo os danos operatórios aos animais experimentais e permitindo a manutenção da morfologia anatômica. O método vale a pena porque os resultados confiáveis e o procedimento reprodutível facilitam as investigações dos mecanismos de reparação da doença.

Estabelecendo um Modelo de Lesão da Medula Espinhal por Contusão de Camundongo Baseado em uma Técnica Minimamente Invasiva

Neste protocolo, duas abordagens são descritas para tornar o teste de compressão uniaxial de vértebras lombares de camundongos mais atingível. Primeiro, descreve-se a conversão de uma máquina de dobra de três pontos em uma máquina de ensaio de compressão. Em segundo lugar, um método de incorporação para preparar a superfície de carregamento que usa cimento ósseo é adaptado para vértebras lombares de camundongos.

Teste de Compressão Uniaxial de Vértebras Lombares de Camundongos com Incorporação da Superfície de Carregamento

Apresentamos aqui um novo dispositivo de contusão de lesão medular automatizada para camundongos, que pode produzir com precisão modelos de contusão de lesão medular com diferentes graus.

Impactor Automatizado para Modelo de Lesão Medular Contusão em Camundongos

Aprenda a criar um modelo de degeneração de disco intervertebral lombar em camundongos C57BL/6 por ressecção cirúrgica. Este método reprodutível permite estudar alterações estruturais e celulares em curto prazo.

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