Name: Um método minimamente invasivo para a instilação intratraqueal de drogas em roedores neonatais para tratar doenças pulmonares (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 21 s
Description: Aprenda um método minimamente invasivo para instilação intratraqueal de drogas em roedores neonatais usando visualização direta com autoscópio. Esta técnica reduz dor e sangramento, melhorando a sobrevivência dos animais em estudos de doenças pulmonares.

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Este trabalho foi apoiado em parte pelo R01HD090887-01A1 de NICHD para AH. Os autores também reconhecem as instalações fornecidas pelo laboratório do Dr. Peter Mc Farlane, como o sistema de anestesia/aquecimento da inalação. A valiosa ajuda da Srta. Catherine Mayer na criação do sistema é apreciada. Nenhum papel foi desempenhado pelo órgão financiador na concepção do estudo, coleta, análise e interpretação dos dados ou na redação do manuscrito.

Todos os experimentos foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais (protocolo nº 2020-0035) na Case Western Reserve University. Todos os animais foram tratados de acordo com as diretrizes do NIH para o cuidado e uso de animais de laboratório.
1. Animais
<ol><li>Comercialmente obter ratos sprague dawley grávidas.</li>
	<li>Mantenha os animais em uma instalação veterinária aprovada com ciclo claro-escuro de 14h/10 h e umidade relativa de 45-60%.</li>
</ol>2. Preparação do composto de teste
<ol><li>Use corante azul Evans como composto de teste para avaliar a eficácia do procedimento de instilação intratraqueal.</li>
	<li>Prepare uma solução de 0,25% (w/v) do corante em soro fisiológico tamponado com fosfato (pH 7.2) e esterilize o filtro usando um filtro de seringa de 0,45 μm.</li>
</ol>3. Administração de anestesia
<ol><li>Anestesize filhotes de ratos usando anestesia gasosa (3% isoflurane em 100% oxigênio), usando um sistema de entrega modificado adaptado para pequenos recém-nascidos de ratos.</li>
	<li>Verifique se há perda de reflexos da cauda e do pedal e respiração rasa para garantir a profundidade adequada da anestesia para a realização do procedimento.</li>
</ol>4. Instilação intratraqueal (ITI)
<ol><li>Use filhotes de rato no pós-natal dia 5 (PN 5) para o ITI. O peso médio de um filhote de rato PN 5 é de 12 gramas.</li>
	<li>Contenha o filhote de rato anestesiado em uma plataforma plana inclinada usando fita de rotulagem de laboratório. O filhote é contido em um ângulo de cerca de 45° na posição supina.</li>
	<li>Abra a boca do recém-nascido e puxe suavemente a língua para um lado usando um fórceps sem cortes.</li>
	<li>Use um pequeno espectlo otoscópio de 2 mm de diâmetro conectado ao otoscópio para segurar a língua suavemente e para uma visualização adequada da laringe.</li>
	<li>Use o sistema iluminador da garganta, ou seja, o otoscópio operacional e a lente de ampliação para visualização adequada das cordas vocais (Figura 1).</li>
	<li>Posicione os animais em um ângulo de 45° em um plano inclinado. São utilizadas as tampas das barras com fio das gaiolas do mouse (Figura 2). NOTA: Posicionar o animal em um ângulo de 45° proporciona melhor visualização da abertura traqueal sem a interferência das epiglotes.</li>
	<li>Tome uma ponta de pipeta de ângulo longo que é usada para carregar géis de mancha ocidental. Corte a base da ponta da pipeta usando uma lâmina cirúrgica para que ela se encaixe bem na ponta da seringa de 1 cc.</li>
	<li>Use a seringa estéril de 1 mL encaixada em uma ponta de pipeta de ângulo longo para fornecer 30-50 μL da substância no pulmão. Inverta a seringa e aspire quase 0,9 cc de ar na seringa de 1 mL conectada à ponta da pipeta seguida do corante ou da substância a ser entregue. Isso permite que o ar atrás do corante seja empurrado para dentro da traqueia depois que o corante é administrado como mostrado na Figura 3. A administração intratraqueal é alcançada visualizando o lúmen laríngeo (cordas vocais) e inserindo a ponta pipeta instalada em uma seringa no lúmen traqueal.</li>
	<li>Use o espéculo do otoscópio para segurar a língua e expor as cordas vocais. Espélum serve o papel da lâmina de um laringoscópio. Dobre a ponta da pipeta em um ângulo de 30° para facilitar a fácil introdução do agente através do espéculo em forma de cone na abertura traqueal.</li>
	<li>Introduza a ponta da pipeta na abertura traqueal ao ponto de cerca de 2 mm além das cordas vocais. Empurre o pistão da seringa para administrar o corante ou a droga através do espéculo do otoscópio operacional, como mostrado na Figura 3. A introdução do ar no pulmão logo após a administração do agente impede que a substância volte para a cavidade laríngea.</li>
	<li>Depois de administrar o filhote com o corante ou soro fisiológico normal, coloque os filhotes em uma almofada de aquecimento de fluido circulante integrado (38°C) até que seus movimentos respiratórios estejam regulares. Após a completa recuperação da anestesia, reúna os filhotes com a represa.</li>
</ol>5. Caracterização da entrega de ITI
<ol><li>Após o ITI, eutanize os filhotes de rato dando anestesia excessiva (Cetamina 100 mg/kg e Xylazine 10 mg/kg) / tiopentona seguida de exsanguinação em um momento apropriado pós-administração. A eutanásia foi realizada como parte do experimento para coletar tecido pulmonar para demonstrar a eficácia.</li>
	<li>Fixar o filhote de rato eutanizado em uma placa de dissecção e limpar o peito e abdômen com 70% de álcool etílico.</li>
	<li>Para avaliar a distribuição do corante em todo o pulmão, remova os pulmões do animal usando técnica estéril e exiba os pulmões conforme apropriado para a imagem (Figura 4A,B).</li>
</ol>

<ol><li>Prakash, Y. S. Pulmonary Cell Biology Lab: Neonatal Lung Disease. Mayo Clinic. , Available from: 
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<li>Martínez-Burnes, J., López, A., Lemke, K., Dobbin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transoral+intratracheal+inoculation+method+for+use+with+neonatal+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Transoral intratracheal inoculation method for use with neonatal rats.</a> Comparative Medicine. 51 (2), 134-137 (2001).</li>
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<li>Nardiello, C., Mižíková, I., Morty, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Looking+ahead%3A+where+to+next+for+animal+models+of+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">Looking ahead: where to next for animal models of bronchopulmonary dysplasia.</a> Cell and Tissue Research. 367 (3), 457-468 (2017).</li>
<li>Sugimoto, M., Ando, M., Senba, H., Tokuomi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+defenses+in+neonates%3A+Effects+of+bronchial+lavage+fluids+from+adult+and+neonatal+rabbits+on+superoxide+production+by+their+alveolar+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Reticuloendothelial+Society%22%5BJournal%5D)">Lung defenses in neonates: Effects of bronchial lavage fluids from adult and neonatal rabbits on superoxide production by their alveolar macrophages.</a> Journal of the Reticuloendothelial Society. 27 (6), 595-606 (1980).</li>
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<li>Moreira, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+delivery+of+human+umbilical+cord+Wharton%27s+jelly+mesenchymal+stromal+cells+restores+lung+alveolarization+and+vascularization+in+experimental+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Intranasal delivery of human umbilical cord Wharton's jelly mesenchymal stromal cells restores lung alveolarization and vascularization in experimental bronchopulmonary dysplasia.</a> Stem Cells Translational Medicine. 9 (2), 221-234 (2020).</li>
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<li>Linderholm, A. L., Franzi, L. M., Bein, K. J., Pinkerton, K. E., Last, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+comparison+of+intranasal+and+intratracheal+administration+of+coarse+PM+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Integrative+Pharmacology%2C+Toxicology+and+Genotoxicology%22%5BJournal%5D)">A quantitative comparison of intranasal and intratracheal administration of coarse PM in the mouse.</a> Integrative Pharmacology, Toxicology and Genotoxicology. 1 (1), 5-10 (2015).</li>
<li>Guerra, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-tracheal+administration+of+a+naked+plasmid+expressing+stromal+derived+factor-1+improves+lung+structure+in+rodents+with+experimental+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Respiratory+Research%22%5BJournal%5D)">Intra-tracheal administration of a naked plasmid expressing stromal derived factor-1 improves lung structure in rodents with experimental bronchopulmonary dysplasia.</a> Respiratory Research. 20 (1), 255(2019).</li>
<li>Thomas, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+particle+size+on+the+pathology+and+efficacy+of+vaccination+in+a+murine+model+of+inhalational+anthrax%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Influence of particle size on the pathology and efficacy of vaccination in a murine model of inhalational anthrax.</a> Journal of Medical Microbiology. 59, Pt 12 1415-1427 (2010).</li>
<li>Sakurai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+combination+of+the+aerosolized+PPAR-%CE%B3+agonist+pioglitazone+and+a+synthetic+surfactant+protein+B+peptide+mimic+prevents+hyperoxia-induced+neonatal+lung+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neonatology%22%5BJournal%5D)">A combination of the aerosolized PPAR-γ agonist pioglitazone and a synthetic surfactant protein B peptide mimic prevents hyperoxia-induced neonatal lung injury in rats.</a> Neonatology. 113 (4), 296-304 (2018).</li>
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<li>Sun, B., Curstedt, T., Song, G. W., Robertson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surfactant+improves+lung+function+and+morphology+in+newborn+rabbits+with+meconium+aspiration%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+of+the+Neonate%22%5BJournal%5D)">Surfactant improves lung function and morphology in newborn rabbits with meconium aspiration.</a> Biology of the Neonate. 63 (2), 96-104 (1993).</li>
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<li>Carlon, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+gene+transfer+into+the+mouse+lung+by+fetal+intratracheal+injection+of+rAAV2%2F6.2%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%3A+The+Journal+of+the+American+Society+of+Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Efficient gene transfer into the mouse lung by fetal intratracheal injection of rAAV2/6.2.</a> Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 18 (12), 2130-2138 (2010).</li>
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<li>Mowat, V., Alexander, D. J., Pilling, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+rodent+and+nonrodent+laryngeal+and+tracheal+bifurcation+sensitivities+in+inhalation+toxicity+studies+and+their+relevance+for+human+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">A comparison of rodent and nonrodent laryngeal and tracheal bifurcation sensitivities in inhalation toxicity studies and their relevance for human exposure.</a> Toxicologic Pathology. 45 (1), 216-222 (2017).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

A instilação intratracheal é um excelente método que oferece diversas vantagens sobre os métodos existentes para intervenções de doenças respiratórias, bem como o desenvolvimento de modelos de doenças. É um método rápido e com experiência, pode ser realizado com uma velocidade média de 2-3 minutos por animal. As principais considerações para uma intubação bem sucedida são a sedação adequada do animal, é o posicionamento correto, especialmente a cabeça, bem como a profundidade precisa de colocação/tamanho da espécula na o...

Os recém-nascidos prematuramente têm pulmões mal desenvolvidos que requerem muitas terapias intervencionistas, como ventilação a longo prazo. Essas intervenções colocam os recém-nascidos sobreviventes em alto risco de sequelassubsequentes 1. Modelos animais experimentais servem como importante ferramenta na simulação de diversas condições da doença, no estudo da patobiologia das doenças e na avaliação de intervenções terapêuticas. Embora uma ampla gama de modelos animais, desde ratos, ratos e coelhos até cordeiros e porcos pré-termo, são os mais usados. 
A principal vantagem do uso de camundongos e ratos é o período de gestação relativamente curto e o custo reduzido. Eles também são prontamente disponíveis, fáceis de manter em ambientes livres de doenças, geneticamente homogêneos e têm relativamente menos preocupação ética 2,3. Outra grande vantagem do modelo de roedor é que ao nascer o filhote neonatal está em estágio canalicular/inicial do desenvolvimento pulmonar que é morfologicamente equivalente ao pulmão de um bebê humano neonatal pré-período de 24 semanas que passa a desenvolver displasia broncopulmonar4. Além disso, à medida que seu desenvolvimento pulmonar avança rapidamente para a conclusão nas primeiras 4 semanas de vida, é viável estudar a maturação pulmonar pós-natal em um período razoávelde tempo 4. Apesar dessas vantagens, o pequeno tamanho dos camundongos e filhotes de ratos é uma fonte de preocupação para várias intervenções, o que obriga a maioria dos pesquisadores a usar animais adultos em vez de filhotes5. Os pulmões neonatais estão em estágio de desenvolvimento e a resposta de um recém-nascido a um agente incitante difere da de um adulto. Isso torna apropriado o uso de modelos neonatais de animais para estudar as condições da doença neonatal humana.
Existem diferentes métodos para administrar drogas/ agentes biológicos para o pulmão. Isso inclui intranasal 6,7 ou intratraqueal 8,9,10 de instilação, bem como inalação de aerossol11,12. Cada abordagem tem seus próprios desafios técnicos, vantagens, bem como limitações13. A via intratraqueal de administração de agentes terapêuticos é preferível estudar o impacto terapêutico direto no órgão contornando os efeitos sistêmicos. Essa rota também pode ser usada para estudar a patologia pulmonar causada por agentes incitantes. Existem técnicas invasivas e minimamente invasivas para fazer isso e é fácil de executar em adultos. No entanto, nos filhotes, devido ao pequeno tamanho do animal, há desafios técnicos associados ao processo de intubação. O presente estudo apresenta um método simples, consistente, não cirúrgico de instilação intratraqueal (ITI) em filhotes de ratos que poderiam ser utilizados para estudar a eficácia de várias intervenções terapêuticas neonatais, bem como para gerar modelos animais simulando doenças respiratórias neonatais.

<table><tbody><tr><td>Corante azul Evans</td><td>Sigma-Aldrich, St Louis, MO, EUA</td><td>314-13-6</td><td>Confirmação da administração de medicamentos nos pulmões</td></tr><tr><td>Cloridrato de cetamina</td><td>Hospira. Inc, Lake Forest, IL, EUA</td><td>Dispensado de instalações de cuidados com animais</td><td>Para sedação</td></tr><tr><td>Otoscópio operacional</td><td>Welch Allyn, Hillrom, Chicago, IL, EUA</td><td>21770- 3.5V</td><td>Para visualização das cordas vocais</td></tr><tr><td>Otoscópio Alça recarregável</td><td>Welch Allyn, Hillrom, Chicago, IL, EUA</td><td>71050-C</td><td></td></tr><tr><td>Ponta de pipeta (carregamento de gel)</td><td>Fisherbrand</td><td>02-707-139</td><td>Administrando o medicamento</td></tr><tr><td>Plataforma para contenção (plano inclinado)</td><td>Instalação de cuidados com animais</td><td>Dispensado de instalações de cuidados</td> com <td>animais Telhado com fio da gaiola de ratos pode ser usado</td></tr><tr><td>3M Micropore Surgical White Paper (fita adesiva)</td><td>3M, St. Paul, MN, EUA</td><td>1530-2</td><td></td></tr><tr><td>Luer Lock Seringas (1 ml)</td><td>BD Franklin Lakes, NJ , EUA</td><td>NBD2515</td><td>Administração do medicamento</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Hospira. Inc, Lake Forest, IL, EUA</td><td></td><td>Para sedação</td></tr></tbody></table>

um método minimamente invasivo para a instilação intratraqueal de drogas em roedores neonatais para tratar doenças pulmonares

A Minimally Invasive Method for Intratracheal Instillation of Drugs in Neonatal Rodents to Treat Lung Disease

O tratamento de roedores neonatais com drogas incutidas diretamente na traqueia poderia servir como uma ferramenta valiosa para estudar o impacto de uma droga administrada localmente. Isso tem impacto translacional direto porque surfactante e drogas são administradas localmente nos pulmões. Embora a literatura tenha muitas publicações descrevendo a intubação transoral minimamente invasiva de camundongos e ratos adultos em experimentos terapêuticos, essa abordagem em filhotes de ratos neonatais é escassa. O pequeno tamanho da região orotraqueal/faringe nos filhotes dificulta a visualização de lúmen laríngeo (cordas vocais), contribuindo para a taxa de sucesso variável da entrega de medicamentos intratracheais. Demonstramos uma intubação oral eficaz do filhote de rato neonatal - uma técnica não traumática e minimamente invasiva, para que possa ser usada para administração serial de drogas. Usamos um otoscópio operacional com um sistema de iluminação e uma lente de ampliação para visualizar a abertura traqueal dos recém-nascidos de ratos. A droga é então incutido usando uma seringa de 1 mL conectada a uma ponta de pipeta. A precisão do método de entrega foi demonstrada usando a administração de corante azul Evans. Este método é fácil de ser treinado e pode servir como uma maneira eficaz de incutir drogas na traqueia. Este método também poderia ser usado para a administração de inóculos ou agentes para simular condições da doença em animais e, também, para estratégias de tratamento de base celular para várias doenças pulmonares.

A instilação do azul Evans revelou distribuição multifocal do corante envolvendo todos os lóbulos pulmonares (Figura 4A,B). Nosso resultado, como mostrado na Figura 4, demonstra eficácia de distribuição para todos os lóbulos. A foto é tirada imediatamente após iti do corante na traqueia. 100% de eficácia foi alcançado na instilação do corante na traqueia seguido por sua disseminação em todos os lóbulos de ambos os lados. Espera-se que o corante ...

Essa técnica de incutir drogas diretamente na traqueia de roedores neonatais é importante no estudo do impacto de medicamentos ou biológicos administrados localmente em doenças pulmonares neonatais. Além disso, este método também pode ser usado para induzir lesões pulmonares em modelos animais.

Um método minimamente invasivo para a instilação intratraqueal de drogas em roedores neonatais para tratar doenças pulmonares

Treatment of neonatal rodent with drugs instilled directly into the trachea could serve as a valuable tool to study the impact of a locally administered ...

Este protocolo demonstra que é possível incutir material de pesquisa sobre a traqueia de filhotes de ratos neonatais, de cinco dias de idade, por visualização direta. Este método melhora a confiabilidade da administração de material de pesquisa ou droga na traqueia por visualização direta. Ao evitar a injeção na traqueia, este método reduz a dor e, mais importante, o sangramento na traqueia, permitindo uma melhor sobrevida.O desenvolvimento de habilidades finas é necessário para realizar este protocolo, incluindo posicionamento adequado do animal, uso correto do autoscópio operacional para visualizar as cordas vocais e eficácia da administração nos pulmões. Demonstrando o procedimento estarão Tara Sudhadevi, pós-doutoranda do meu laboratório, e Alison Ha, uma estudante de pós-graduação. Antes de iniciar o experimento, confirme a perda do reflexo da cauda e do pedal em um filhote de rato de cinco dias de idade anestesiado e use fita de rotulagem de laboratório para conter o filhote na posição supina em uma plataforma plana inclinada a 45 graus.Use fórceps contundentes para puxar suavemente a língua para um lado, e com a ajuda de um especulo otoscópio de dois milímetros de diâmetro, segure suavemente a língua no lugar para que a laringe seja visível. Usando o otoscópio operacional com o espéculo de tamanho correto, localize as cordas vocais através da lente de ampliação do otoscópio. Para instillação intratracheal, carregue uma seringa de um mililitro equipada com uma ponta de pipeta de longo ângulo e carregamento de gel com 0,9 centímetros cúbicos de ar, seguida por 30 a 50 microlitros da substância de interesse.Dobre a ponta da pipeta para um ângulo de 30 graus e insira a ponta de pipeta carregada através do espéculo para cerca de dois milímetros além das cordas vocais. Empurre o pistão da seringa para administrar a substância de interesse e o ar através do espéculo nas cordas vocais. Quando toda a substância tiver sido entregue, coloque o filhote em uma almofada de aquecimento de fluido circulante integrado de 38 graus Celsius com monitoramento até a respiração regular, antes de reunir o filhote com a represa.Para avaliar a distribuição da substância dentro de uma amostra de tecido pulmonar, limpe o tórax e o abdômen dos filhotes de rato eutanizados com álcool etílico de 70% e use técnica estéril para remover os pulmões de acordo com protocolos padrão para sua avaliação visual. Neste estudo, a eficácia da técnica de instilação intra-traqueal foi avaliada pelo exame visual do tecido pulmonar coletado de um filhote de rato de cinco dias de idade instilado com corante azul Evans. A instilação foi quase 100% eficiente, pois o corante se espalhou para o pulmão imediatamente após a administração e distribuído por todos os lóbulos do tecido pulmonar.O corante não foi observado dentro de nenhum tecido fora dos pulmões, confirmando a capacidade da técnica de ser utilizada para a entrega seletiva de um terapêutico de interesse para os pulmões. Colocar o animal inicialmente no ângulo correto sobre uma superfície firme é essencial para o sucesso do próximo passo de visualização das cordas vocais usando o autosscópio operacional.

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Injeções intratraqueais solutos entregar diretamente para os pulmões. Este procedimento visa a entrega do instillate nas regiões distais do pulmão, e é, portanto, muitas vezes incorporadas em estudos que visam estudar alvéolos. Nós fornecemos um protocolo de sobrevivência detalhadas para a realização de injeções intratraqueais em camundongos.

Instilação traqueal direta de Solutos em pulmão de rato

Nós desenvolvemos uma nova abordagem cirúrgica para administração intratraqueal de agentes bioactivos para o feto de rato. A via de entrega é mais eficiente na segmentação dos pulmões do rato fetal do que o normalmente usado injecção intra-amniótica. Este procedimento tem a data ainda não foi descrita em um modelo de rato.

Uma nova abordagem cirúrgica para administração intratraqueal de agentes bioativos em um modelo de camundongo Fetal

Este vídeo demonstra o estabelecimento de infecção pulmonar em um modelo de roedor imunocompetente por meio de intubação e instalação de suspensões bacterianas nos lobos pulmonares. Este modelo permite estudos de eficácia antibacteriana em animais imunocompetentes.

Instilação Intrabrônquica de Streptococcus pneumoniae em Modelos de Roedores Imunocompetentes

A utilização de um modelo que simula a condição de doenças pulmonares em humanos é fundamental para o estudo da fisiopatologia e / ou etiologia de uma doença em particular e para o desenvolvimento da intervenção terapêutica. Aqui um método de intubação orotraqueal não invasivo que pode entregar diretamente materiais exógenos aos pulmões do rato é apresentado.

Não invasiva Intratraqueal intubação para estudar a Patologia e Fisiologia do Rato Lung

A instilação intratraqueal mediada por intubação (IMIT) de reagentes é um método excelente e não invasivo para estudar doenças respiratórias, bem como um método para instilar reagentes terapêuticos diretamente no pulmão. É um método rápido e altamente reprodutível, adequado para testes pré-clínicos.

Intratraqueal (IMIT) instilação mediada por intubação: A não-invasiva, sistema de entrega Lung-specific

Este artigo apresenta um método rápido e simples para a administração de bleomicina diretamente na traquéia do mouse através de intubação. As principais vantagens deste método é que ele é altamente reprodutível, fácil de dominar, e não requer equipamento especializado ou tempos de recuperação longos.

Um método melhorado para rápida de intubação da traqueia em Ratos

O objetivo deste artigo é descrever um método refinado de intubação do rato de laboratório. O método é não invasivo e, portanto, ideal para estudos que requerem monitoramento serial da função respiratória e/ou instilação de tratamentos no pulmão.

Intubação Orotraqueal Repetida em Camundongos

Descrito é um protocolo para a realização de transplante intratraqueal de células estromais mesenquimais (MSCs) através de injeção intratraqueal a termo ratos neonatais. Esta técnica é uma opção clinicamente viável para a entrega de células-tronco e drogas em pulmões de ratos neonatais para avaliar sua eficácia.

Instilação intratraqueal de células-tronco em ratos neonatais de termo

Este protocolo apresenta como o posicionamento ideal de um mouse e a inserção de um otoscópio baseado em câmera por via transoral permitem a visualização da glote, intubação rápida com trauma tecidual mínimo e entrega consistente de líquido aos pulmões.

Metodologia aprimorada para administração de líquido ao pulmão de camundongo: intubação usando um otoscópio de consumidor

Neste estudo, uma técnica não invasiva de instilação endotraqueal demonstrou desenvolver ALI em ratos usando um laringoscópio básico para garantir a entrega precisa de LPS aos pulmões. O LPS é injetado por meio de um tubo endotraqueal usando um laringoscópio. A magnitude da lesão pulmonar é avaliada em vários momentos.

Administração endotraqueal não invasiva de lipopolissacarídeo para induzir lesão pulmonar aguda em roedores

Aprenda um método minimamente invasivo para instilação intratraqueal de drogas em roedores neonatais usando visualização direta com autoscópio. Esta técnica reduz dor e sangramento, melhorando a sobrevivência dos animais em estudos de doenças pulmonares.

Um método minimamente invasivo para a instilação intratraqueal de drogas em roedores neonatais para tratar doenças pulmonares

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