Name: Acupuntura em um modelo de rato de asma (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-08-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Aprenda a aplicar acupuntura em modelo de rato com asma usando plataforma elevada para acesso aos acupontos dorsais. Este método permite medir função respiratória de forma não invasiva em tempo real.

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Este trabalho foi apoiado pela National Natural Science Foundation of China (nº 81922076, 81973951, 81873373), projeto de construção de inovação colaborativa de Xangai (Nº. ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005).

Todos os experimentos em animais foram revisados e aprovados pelo Comitê de Ética em Experimentos Animais da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Xangai (Número de liberação ética PZSHUTCM190308020).
1. Fabricação da alta plataforma
<ol><li>Defina o comprimento e a largura do dispositivo de suporte para 86 cm x 17 cm(Figura 1).</li>
	<li>Corrija o dispositivo de conexão verticalmente ao dispositivo de suporte. O dispositivo de conexão deve ter aproximadamente 30 cm de comprimento para evitar que o rato escorra até a superfície superior da plataforma alta e tenha uma largura de 14 cm.</li>
	<li>Fixar o pedal horizontal (5 cm x 5 cm) no dispositivo de conexão. A altura suspensa na parte inferior do pedal horizontal deve ser maior ou igual a 50 cm. NOTA: Dependendo do número de ratos experimentais, podem ser usados vários pedais horizontais, com um rato colocado em cada pedal.</li>
</ol>2. Estabelecimento de um modelo de rato de asma
<ol><li>Sensibilizando os ratos com OVA<ol>
<li>Prepare a solução de sensibilização no dia 0. Prepare cada 1 mL da solução de sensibilização com 1 mg de OVA e 10 mg de hidróxido de alumínio, com soro fisiológico normal como solvente.</li>
		<li>Injete intraperitoneally cada rato com 1 mL da solução de sensibilização no dia 0. Desenhe a solução sensibilizadora com uma seringa adequada para uso posterior.</li>
		<li>Pegue a cauda e levante o rato, coloque-o em uma superfície áspera, e puxe suavemente a cauda para trás. Segure a pele das orelhas e pescoço com o polegar esquerdo e o dedo indicador, mantendo firmemente a pele traseira com os três dedos e palmas restantes (tenha cuidado para evitar aplicar força excessiva que sufocará o rato).</li>
		<li>Com a mão direita, realize uma injeção intraperitoneal no rato com a seringa preparada com 1 mL da solução de sensibilização.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ratos desafiadores com OVA<ol>
<li>Selecione uma caixa com uma tampa (o comprimento, largura e altura são 39 cm x 28 cm x 23 cm) e faça um pequeno orifício na lateral. Conecte a caixa selada, o copo de nebulização e o nebulizador de compressão com um tubo de borracha(Figura Suplementar 1). NOTA: O tamanho da partícula nebulizada do nebulizador comprimido é de 1 a 5 μm, a taxa de nebulização é superior a 0,2 mL/min, e a pressão final é de 205 kPa.</li>
		<li>No 14º dia após a sensibilização, abra a tampa da caixa lacrada caseira e coloque o rato na caixa (a caixa pode acomodar 5 ratos), e depois coloque a caixa selada em um armário de biossegurança.</li>
		<li>Prepare a solução do desafio. Misture completamente 300 mg de OVA com 30 mL de soro fisiológico normal.</li>
		<li>Ligue o nebulizador ultrassônico e adicione 30 mL da solução de desafio na xícara de nebulização. Ajuste a dosagem da solução de desafio e o número de ratos de acordo com o volume da caixa lacrada caseira.</li>
		<li>Repita a nebulização várias vezes (uma vez por dia) ou ajuste o procedimento de acordo com a gravidade dos sintomas da asma.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Tratamento de acupuntura
<ol><li>Selecione pontos de acupoint, incluindo GV14, bilateral BL12 e bilateral BL13, de acordo com a teoria da medicina tradicional chinesa para o tratamento da asma (Figura Suplementar 2). Administre acupuntura manual no dia 2 e realize uma vez a cada dois dias para um total de 7 sessões (Figura 2).
	<ol>
<li>Acupuntura o GV14 localizado entre a sétima vértebra cervical e a primeira vértebra torácica (a oca da escápula), na linha média da parte de trás(Figura 3).</li>
		<li>Acupuntura o BL13 localizado abaixo da terceira vértebra torácica, em ambos os lados dos espaços intercostais (borda inferior da escápula).</li>
		<li>Acupuntura do BL12 localizado abaixo da segunda vértebra torácica, em ambos os lados dos espaços intercostais (abaixo da escápula, posição identificada segundo BL13).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Segure os ratos e coloque-os na plataforma alta.</li>
	<li>Segure a agulha de aço inoxidável descartável (0,3 mm x 13,0 mm, Figura Suplementar 3) com o polegar e o dedo indicador da mão direita, e pressione a parte de trás do rato com a palma da mão direita. NOTA: As agulhas descartáveis devem ser de uso único. Porque o uso repetido vai diminuir a agulha, o que leva ao aumento da dor em ratos.</li>
	<li>Toque a depressão no meio da borda superior (GV14) ou na borda inferior da escápula (BL12 e BL13), e depois pique suavemente a pele do rato com a ponta da agulha para localizar os acupoints.</li>
	<li>Insira rapidamente a agulha depois de determinar a localização específica do acupoint e remova rapidamente a mão direita.</li>
	<li>Torcido uniformemente as agulhas aproximadamente 360° a uma taxa de 60 vezes/min para 10 - 20 s, manipulá-las a cada 5 minutos, e depois retirá-las após 20 - 30 min (Figura Suplementar 4).</li>
</ol>4. A medição de Penh
<ol><li>Prepare a methacholina: Coloque 100 mg de metanfetamina em um tubo de centrífuga de 5 mL e adicione PBS a um volume de 2 mL (50 mg/mL de metanfetamina). Em seguida, diluir a solução de methacholina de 50 mg/mL para 25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 6,25 mg/mL e 3.125 mg/mL.</li>
	<li>Inspeção de instrumentos<ol>
<li>Ligue o amplificador de sinal (o sistema de distribuição de aerossol e o sistema de alimentação de fluxo de viés de roedores estão todos desligados, e o conector de nebulização está fechado).</li>
		<li>Verifique os canais: Clique em Calibrar,devolva a linha de base de ajuste grosseiro para 0 e mude para a posição de corrente direta (DC). Ajuste a linha de base para 0 e injete 5 mL de gás com uma seringa. Em seguida, mude para a posição de corrente alternada (AC).</li>
		<li>Após a verificação dos canais, certifique-se de que o valor do erro seja inferior a 0,5%.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Definindo parâmetros<ol>
<li>Ligue o sistema de distribuição de aerossol e o sistema de alimentação de fluxo de viés de roedores. Ajuste a vazão para 4,5 mL de acordo com o nível líquido na bola de mercúrio.</li>
		<li>Clique em Criar opções de estudo e selecione Estudo de Resposta a Doses,selecione Rato de espécies e clique em Next.</li>
		<li>Selecione Lista de Doses Simples,defina o número de doses para 6 e clique em Next.</li>
		<li>Selecione os parâmetros penh e área: Definir o tempo de adaptação animal para 5 min, o tempo de nebulização para 2 min, o tempo de resposta para 3 min, e o tempo de recuperação para 2 min.</li>
		<li>Adicione sequencialmente as seguintes soluções ao nebulizador (200 μL por rato): metanfetamina (0 mg/mL, 3.125 mg/mL, 6,25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 25 mg/mL e 50 mg/mL). Podem ser observadas alterações em tempo real em Penh(Figura 4).</li>
		<li>Depois de todas as 6 soluções com diferentes concentrações terem sido reagidas, clique em Arquivo e Sessão Final para concluir o experimento.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Asthma.</a> Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018).</li>
<li>Global Initiative for Asthma, 2019. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://ginasthma.org/gina-reports/">https://ginasthma.org/gina-reports/</a> (2019).</li>
<li>Enilari, O., Sinha, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Global+Impact+of+Asthma+in+Adult+Populations%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Global+Health%22%5BJournal%5D)">The Global Impact of Asthma in Adult Populations.</a> Annals of Global Health. 85 (1), (2019).</li>
<li>Global Initiative for Asthma, 2020. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: 
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<li>Yang, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+for+use+of+acupuncture+as+supplemental+therapy+for+patients+with+allergic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Reviews+in+Allergy+%26+Immunology%22%5BJournal%5D)">Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma.</a> Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).</li>
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<li>Nurwati, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+in+inflammation+and+airway+remodelling+after+acupuncture+at+BL13+and+ST36+in+a+mouse+model+of+chronic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Acupuncture+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma.</a> Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).</li>
<li>Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+model+of+allergen+induced+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine model of allergen induced asthma.</a> Journal of Visualized Experiments. (63), e3771(2012).</li>
<li>Zhou, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metallothionein-2+is+associated+with+the+amelioration+of+asthmatic+pulmonary+function+by+acupuncture+through+protein+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicine+%26+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation.</a> Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785(2020).</li>
<li>Yin, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgelin-2+as+a+therapeutic+target+for+asthmatic+pulmonary+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance.</a> Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).</li>
<li>Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+asthma+using+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy+Asthma+%26+Immunology+Research%22%5BJournal%5D)">Understanding asthma using animal models.</a> Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).</li>
<li>Cui, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electro-acupuncture+relieves+chronic+visceral+hyperalgesia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats.</a> Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).</li>
<li>Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+anesthetic+inhibition+of+brain+nitric+oxide+synthase%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase.</a> Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).</li>
<li>Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+of+rat+immobilization+during+experimental+acupuncture%5BTitle%5D)+AND+%22Scripta+Scientifica+Medica%22%5BJournal%5D)">Method of rat immobilization during experimental acupuncture.</a> Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).</li>
<li>Aguilar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((emotional+reactivity+and+fear+of+heights%3A+a+factor+analytic+map+from+a+large+F%282%29+intercross+of+Roman+rat+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains.</a> Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).</li>
<li>Lai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+response+to+acupuncture+treatment+in+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats.</a> PloS One. 7 (9), 44216(2012).</li>
<li>Niu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+uni-acupoint+electroacupuncture+stimulation+method+for+pain+relief%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879(2011).</li>
<li>McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+action+of+suggestion+in+the+induction+of+acute+asthma+attacks%5BTitle%5D)+AND+%22Psychosomatic+Medicine%22%5BJournal%5D)">The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks.</a> Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).</li>
<li>Savov, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ozone-induced+acute+pulmonary+injury+in+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

Os acupontos GV14, bilateral BL12 e bilateral BL13 utilizados neste estudo estão localizados na parte de trás, e, portanto, a plataforma alta é adequada para fixação de ratos. Em outros estudos, deve ser selecionado um método de fixação adequado de acordo com a posição dos acupoints15. Para acupoints no abdômen, o rato pode ser colocado para baixo em um cone preto (semelhante a um saco de massa usado pelos padeiros)17. Uma corrente é presa ao cone de contenção para fixação,...

A asma é uma doença crônica caracterizada pela broncoconstrição e hiper-responsividade das vias aéreas1. Aproximadamente 339,4 milhões de pessoas em todo o mundo são diagnosticadas com asma2. A prevalência de asma está aumentando globalmente, com 100 milhões de novos casos esperados para a próxima década3. Corticosteroides inalados e β2-agonistas de longa duração não controlam efetivamente os sintomas de todos os pacientes4. Portanto, o uso de terapias alternativas como a acupuntura para tratar a asma vem recebendo maior atenção5. Um método eficaz para o tratamento da asma é agulha GV14 (Dazhui), BL12 bilateral (Fengmen) e bilateral BL13 (Feishu)6. A acupuntura reduz significativamente os níveis de imunoglobulina secreta A (SIgA) na saliva e secreções nasais de pacientes com asma alérgica e reduz a contagem de eosinófilos sanguíneos periféricos com uma taxa efetiva total de 85%6. A acupuntura em BL13 e ST36 (Zusanli) em camundongos com asma crônica diminui o nível de IL-17 em 40% e diminui a espessura muscular lisa em 33% em comparação com a do grupo ovalbumina (OVA) e, assim, alivia os sintomas de inflamação7,8. No entanto, o mecanismo do tratamento da acupuntura para asma não é completamente claro.
Os modelos animais são uma importante ferramenta para a pesquisa da asma9 porque o modelo animal pode ser utilizado para a medição contínua da função respiratória para avaliar a eficácia do tratamento da asma10. Enquanto isso, estudos da fisiopatologia da asma requerem amostras de teste, incluindo amostras da traqueia, pulmão e lavagem broncoalveolar para verificar alterações nos níveis dos fatores-chave11. Modelos de asma de ratos são comumente usados para avaliar a fisiopatologia da asma porque produzem respostas de longo prazo das vias aéreas e mostram respostas imediatas e tardias das vias aéreas12. No entanto, devido à estimulação experimental repetida, os ratos muitas vezes se tornam irritáveis. Portanto, é necessário um método adequado para fixar ratos. Os métodos comumente utilizados para fixação de ratos incluem anestesia e vinculação13. Embora o método de anestesia proporcione melhor exposição dos acupoints, pode afetar a condução nervosa e, em última instância, afetar os resultados experimentais14. O método de ligação não induz os mesmos efeitos fisiológicos que a anestesia, mas ratos contidos experimentarão tensão muscular esquelética. Além disso, a agulha não pode alcançar facilmente a posição designada15. Aqui, introduzimos uma plataforma alta que pode ser usada para corrigir ratos sem restringi-los e expor totalmente os acupoints na parte de trás. Os ratos podem ser colocados na plataforma alta durante a administração da acupuntura. A plataforma alta é capaz de acomodar o rato apenas enquanto ele está de pé, e como ele é colocado a uma certa distância do chão, os ratos não se moverão por causa do medo das alturas16.
Este artigo descreve detalhadamente a fabricação da alta plataforma, o estabelecimento de um modelo de rato de asma, o funcionamento da necessidade de um rato na plataforma alta e a medição da função respiratória utilizando um sistema de plethysmografia do corpo inteiro (WBP).

<table><tbody><tr><td>Agulha de acupuntura de 0,3 mm x 13,0 mm</td><td>China Suzhou Medical Device Factory</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Al(OH)3</td><td>American Thermo</td><td>77161</td><td></td></tr><tr><td>Nebulizador de compressão</td><td>Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd.</td><td>NB-212C</td><td></td></tr><tr><td>Fine Pointe V2.0</td><td>American Buxco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Unidade de secagem de gás de laboratório</td><td>American Drierite</td><td>26800</td><td></td></tr><tr><td>Metacolina</td><td>American Sigma</td><td>MKCF6054</td><td></td></tr><tr><td>Ovalbumina</td><td>American Sigma</td><td>A5503-25G</td><td></td></tr><tr><td>Solução de tampão de fosfato (1x)</td><td>Gelifesciences</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Caixa de vedação</td><td>IRIS Corporation of Japan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de medição da função respiratória pletismografia de corpo inteiro American</td><td>Buxco</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

acupuntura em um modelo de rato de asma

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

Uma plataforma alta pode corrigir ratos sem restrições e expor completamente os pontos de acupoint na parte de trás durante a manipulação da acupuntura. Este artigo descreve métodos para a fabricação da alta plataforma, estabelece um modelo de asma de ratos e mede mudanças na função respiratória usando um sistema de plethysmografia não invasiva e em tempo real do corpo inteiro (WBP).

Com acupuntura no GV14, bl12 bilateral e pontos bl13 bilaterais, o rato mantém uma posição propensa. O rato pode torcer a cabeça apenas para o lado de fora e não para dentro porque uma direção está bloqueada com uma tábua de madeira(Figura 5).
À medida que a concentração de metanfetamina aumenta, Penh mostra uma tendência crescente e a taxa de crescimento aumenta gradualmente. Nas concentrações de 3.125 mg/mL, 6,25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 25 mg/mL e 50 mg/mL, Penh aume...

Acupuntura em um modelo de rato de asma

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

A acupuntura é um método eficaz para o tratamento da asma. Embora os mecanismos subjacentes não sejam claros. Este protocolo imita a acupuntura na clínica para estudar essas mecânicas em um modelo animal.A principal vantagem desta técnica é que a plataforma alta pode ser usada para fixar os ratos sem a restrição, permitindo a exposição total dos pontos de acupuntura dorsais. Os iniciantes devem ter habilidades básicas de manuseio de ratos e devem praticar a inserção das agulhas de acupuntura em um pedaço de papelão antes de tentar tratar os animais. A visualização da técnica ajudará os iniciantes a se familiarizarem com as habilidades necessárias para realizar o experimento com sucesso.O comprimento e a largura do dispositivo de suporte devem ser de 86 por 17 centímetros. Fixe verticalmente um dispositivo de conexão de 30 centímetros de comprimento por 14 centímetros de largura ao dispositivo de suporte e fixe um pedal horizontal de cinco por cinco centímetros ao dispositivo de conexão. A altura suspensa na parte inferior do pedal horizontal deve ser maior ou igual a 50 centímetros.Para sensibilização OVA, agarre e levante a cauda de um rato adulto e coloque o animal em uma superfície áspera enquanto puxa suavemente a cauda para trás. Segure com firmeza, mas suavemente, a pele das orelhas e do pescoço com o polegar esquerdo e o dedo indicador, enquanto segura firmemente a pele das costas com os três dedos e a palma restantes e use a mão direita para injetar intraperitonealmente um mililitro de solução de sensibilização recém-preparada no abdômen do rato. No 14º dia após a sensibilização, faça um pequeno furo na lateral de uma caixa de 39 por 28 por 23 centímetros e use um tubo de borracha para conectar a caixa a um copo nebulizador e nebulizador de compressão.Coloque o rato na caixa e coloque a caixa em um armário de biossegurança. Ligue o nebulizador ultrassônico e carregue 30 mililitros de OVA de 300 miligramas recém-preparado em solução salina no copo de nebulização. A nebulização pode ser repetida várias vezes ao dia ou de acordo com a gravidade dos sintomas de asma a serem induzidos.Para o tratamento com acupuntura do animal asmático, selecione pontos de acupuntura, incluindo GV 14, BL 12 bilateral e BL 13 bilateral, de acordo com a teoria da medicina tradicional chinesa para o tratamento da asma, e administre acupuntura manual no segundo dia e em dias alternados por um total de sete sessões após o estabelecimento da asma. Para a colocação da agulha, transfira o rato para a plataforma alta e, segurando o cabo de uma agulha descartável de aço inoxidável com o polegar e o indicador da mão dominante, pressione firmemente as costas do rato com a palma da mão. Para a colocação da agulha GV 14, toque a depressão no meio da borda superior da escápula entre a sétima vértebra cervical e a primeira vértebra torácica na linha média das costas e pique suavemente a pele com a ponta da agulha para localizar o ponto de acupuntura.Em seguida, insira rapidamente a agulha e remova rapidamente o lugar direito. Coloque as agulhas BL 13 abaixo da terceira vértebra torácica em ambos os lados dos espaços intercostais e coloque as agulhas BL 12 abaixo da segunda vértebra torácica em ambos os lados dos espaços intercostais, conforme demonstrado. Quando todas as agulhas tiverem sido colocadas, gire cada agulha 360 graus, 60 vezes durante um período de 10 a 20 segundos, a cada cinco minutos por 20 a 30 minutos antes de remover as agulhas.Para medir Penh nos animais tratados com acupuntura. Primeiro ligue o amplificador de sinal e clique em calibrar para retornar a linha de base de ajuste de curso a zero. Mude para a posição de corrente contínua e ajuste a linha de base para zero.Use uma seringa para injetar cinco mililitros de ar antes de mudar para a posição de corrente alternada. Depois de verificar os canais, certifique-se de que o valor do erro seja inferior a 0,5%Em seguida, ligue os sistemas de distribuição de aerossóis e fornecimento de fluxo de polarização de roedores e ajuste a vazão de 4,5 mililitros de acordo com o nível do líquido na bola de mercúrio. Em Criar opções de estudo, insira o teste para o estudo e selecione o rato para a espécie.Confirme se a lista de doses simples está selecionada e defina o número de doses para seis. Para selecionar os parâmetros de Penh e área, clique em avançar e defina o tempo de adaptação do animal para cinco minutos. O tempo de nebulização para dois minutos, o tempo de resposta para três minutos e o tempo de recuperação para dois minutos.Em seguida, adicione 200 microlitros de cada concentração recém-preparada de metacolina em PBS ao nebulizador em sequência, conforme indicado. Mudanças em tempo real em Penh devem ser observadas. Quando todas as seis soluções com diferentes concentrações tiverem sido entregues e avaliadas, clique em arquivo e encerre a sessão.Com acupuntura nos pontos GV 14, BL 12 bilateral e BL 13 bilateral, o rato mantém uma posição de bruços e pode torcer a cabeça apenas para fora, pois uma direção é bloqueada com uma tábua de madeira. Conforme ilustrado no gráfico, após a indução da asma, à medida que a concentração de metacolina aumenta, a concentração de Penh aumenta, promovendo um aumento gradual na taxa de crescimento. Western blot e PCR em tempo real também podem ser usados para iniciar uma proteína específica e uma mudança após o tratamento com acupuntura.Essa técnica pode ajudar os pesquisadores a explorar mudanças específicas em fatores-chave e uma via de sinal usando a asma após a acupuntura.

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Modelos de ratos experimentais de asma alérgica oferecer novas possibilidades para o estudo da patogênese da doença eo desenvolvimento de novas terapêuticas. Estes modelos são bem adequados para factores de medição que regulam a resposta imune alérgica, inflamação das vias aéreas, e fisiopatologia pulmonar.

Modelo murino de asma induzida alergénio

Este protocolo apresenta um procedimento curativo de moxabustão no tratamento de pacientes com asma brônquica.

Uma Terapia Característica da Medicina Tradicional Chinesa para Asma Brônquica: Moxabustão

Aqui, apresentamos um protocolo para eletroacupuntura (EA) eficiente e rápida em camundongos ou ratos jovens usando um suporte impresso tridimensional (3D). Esta técnica permite a operação simultânea em vários animais, economizando tempo e aumentando a eficiência experimental.

Operação de eletroacupuntura em massa para camundongos ou ratos jovens

Aqui, apresentamos um método aprimorado de fixação da suspensão usando uma jaqueta de rato para imobilizar efetivamente ratos durante experimentos de acupuntura. Além disso, a estrutura e aplicação desse aparelho de fixação, bem como as instruções e avaliação para sua utilização na eletroacupuntura, são elucidados.

Melhor fixação da suspensão usando jaqueta de rato em experimentos de acupuntura em ratos

Descrevemos um protocolo para implementação de anestesia leve e acupuntura em um modelo de camundongo com hipóxia crônica e realização de testes comportamentais para avaliar as alterações cognitivas pós-tratamento.

Tratamento com acupuntura em modelo murino de disfunção cognitiva induzida por hipóxia crônica

Este protocolo detalha o procedimento para escavação de pontos de acupuntura e demonstra sua eficácia no tratamento da rinite alérgica.

Terapia de incorporação de categute de ponto de acupuntura na medicina tradicional chinesa para o tratamento da rinite alérgica

Termoplastia brônquica é um procedimento não-droga para a asma persistente grave que fornece energia térmica para a parede das vias aéreas de uma maneira controlada com precisão para reduzir muscular das vias aéreas excessiva suave. Reduzindo músculo liso das vias respiratórias diminui a capacidade das vias aéreas se contraiam, reduzindo a freqüência de crises de asma.

Termoplastia brônquica: uma nova abordagem terapêutica para Asma Grave

O pulmão é perfundida, tanto arterial sistémica brônquica e artérias pulmonares. Na maioria das patologias do pulmão, é a mais pequena da vasculatura sistémica que mostra a neovascularização robusto. Cessação do fluxo sangüíneo pulmonar promove a angiogênese brônquica vivo. Nós fornecemos detalhes cirúrgicos de induzir isquemia da artéria pulmonar esquerda que promove neovascularização brônquica.

Angiogênese no pulmão de rato Isquêmica

Um protocolo para as infusões crónicas de glicose e Intralipid no rato é descrito. Este modelo pode ser utilizado para estudar o impacto do excesso de nutrientes sobre a função do órgão de parâmetros fisiológicos.

Um Modelo de Infusão Crónica de nutrientes no Rato

Este manuscrito descreve um modelo cirúrgico de pielonefrite em ratos usando infecção intra-renal direta por Escherichia coli na pelve renal. O procedimento experimental pode ser utilizado para estudar a patogênese da pielonefrite, bem como a inflamação e fibrose associadas.

Injecção Intrarenal de Escherichia coli Em um modelo de rato de peleonefrite

Aprenda a aplicar acupuntura em modelo de rato com asma usando plataforma elevada para acesso aos acupontos dorsais. Este método permite medir função respiratória de forma não invasiva em tempo real.

Acupuntura em um modelo de rato de asma

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