Uma complexa tarefa de mergulho por comida para investigar organização social e interações em ratos

Este protocolo descreve um método de examinar a hierarquia social em um modelo de rato. Os ratos realizam uma complexa tarefa de mergulho por comida na qual formam uma hierarquia distinta de acordo com sua vontade de mergulhar debaixo d'água e nadar para obter uma pelota de comida. Este método é utilizado para compreender a tomada de decisão e as relações sociais entre animais altamente sociais em pequenos grupos.

Este protocolo descreve um método de examinar a hierarquia social em um modelo de rato. Todos os ratos realizam um mergulho complexo para a tarefa alimentar na qual formam uma hierarquia distinta de acordo com a vontade de mergulhar sob a água e nadar para obter uma pelota de alimento. Este método é usado para compreender a tomada de decisão e a relação social entre animais altamente sociais em pequenos grupos.

Selecione ratos adultos machos Sprague Dawley pesando de 300 a 350 gramas. Fornecer comida de rato e ad libitum de água. Realize todos os experimentos entre 6:00 e 12:00.

Mantenha os ratos à temperatura ambiente de 22 graus Celsius com 12 horas de luz e ciclos escuros de 12 horas. Uma linha do tempo do protocolo experimental. Selecione aleatoriamente 120 ratos em um dos três grupos experimentais.

O grupo um, N é igual a 60, será usado como um grupo de controle. O grupo dois, N igual a 30, será induzido com depressão. O grupo três, N igual a 30, também será induzido com depressão e, posteriormente, será tratado com medicamentos antidepressivos.

Alguns testes de preferência cruzada realizaram antes e após a indução de estresse imprevisível crônico e após mergulho complexo para tarefa alimentar. Os seguintes estressores são introduzidos em ordem aleatória. Alojamento em grupo colocando seis ratos por gaiola por 18 horas.

Colocação inclinada da gaiola por três horas 45 graus ao longo do eixo vertical. Privação de comida por 18 horas. Depravação da água por 18 horas seguida de exposição imediata a uma garrafa de água vazia.

Colocação de gaiola macia por oito horas consistindo de 300 mililitros de água derramados em roupas de cama. Iluminação contínua e ciclo escuro claro reverso por 48 horas por semana E ambiente quente de cinco minutos a 40 graus Celsius. Ratos são expostos a dois dos sete estressores diariamente em uma ordem aleatória.

Uma durante o dia, e a segunda à noite por cinco semanas sequenciais. Os ratos do grupo três são administrados tratamento antidepressivo com hidróxido de amicrom, antidepressivo tricíclico 20 miligramas por quilo intraperitoneal uma vez por dia durante três semanas. O grupo dois do grupo controle é administrado 0,9% de placebo salino intraperitoneal uma vez por dia durante três semanas no mesmo volume do grupo de tratamento antidepressivo.

Prepare aparelhos e aclimate ratos. Conecte duas gaiolas 50 em 50 em 50 centímetros a um aquário 130 em 35 em 50 centímetros através de túneis. Coloque tubos com pelotas de alimentos, uma pelota de alimento em cada tubo em uma extremidade do aquário.

Marque todos os seis ratos com diferentes marcadores coloridos no início do experimento para permitir a identificação individual. A qualquer momento, seis ratos participaram dos experimentos simultaneamente. Três deles serviram como grupo controle um e os outros três eram depressivos do grupo dois, ou depressivos após o tratamento, grupo três.

No primeiro dia do experimento, introduza cada grupo de ratos a aparelhos experimentais sem água durante três horas de sessão. Retorne os ratos à gaiola padrão após a sessão. Gravam ratos no aparelho continuamente durante as três horas de sessão.

Repita essas sessões para os dias dois e três. Nos dias quatro até 17, adicione água progressivamente até que o nível máximo de água seja atingido. Nos dias 17 até 21, mantenha o nível máximo de água.

Observe ratos mergulhando para acessar pelotas. Regissos parâmetros a seguir. Frequência de entradas em túnel, mergulho para alimentação, comida obtida por ataque, comida obtida pelo transporte e tempo gasto em gaiolas separadas.

Durante o ciclo escuro coloque os ratos em gaiolas individuais na mesma sala que a carcaça. Coloque uma garrafa de 100 mililitros de 1% de peso em volumes de solução de sacarose em cada gaiola por 24 horas e permita a adaptação. Retire as garrafas e prive os ratos de comida e água por 12 horas.

Coloque duas garrafas, uma contendo 100 mililitros de solução de sacarose, 1%de volume de peso e as outras 100 mililitros de água da torneira em cada caso por quatro horas. Registo o volume em mililitros tanto da solução de sacarose consumida quanto da água e calcule sua afinidade com a preferência de sacarose da seguinte forma. A preferência por sacarose em percentagem é igual ao consumo de sacarose em mililitros, dividido pelo consumo de sacarose e mililitros mais o consumo de água em mililitros.

Todas as vezes 100% Mudanças de peso corporal Um teste de uma forma que a Nova não mostrou diferenças no peso corporal entre grupos experimentais durante os 21 dias do complexo mergulho para tarefa alimentar. Dos dias para dois a 21, houve mudanças no peso corporal para os três grupos, o valor p foi inferior a 0,01. Ratos com sintomas depressivos eram mais ativos e agressivos do que ratos de controle.

Ratos induzidos pelo comportamento agressivo da luz mostraram um aumento de entradas no túnel 130% mais menos 3,7 p valor inferior a 0,01. Mergulho para alimentos 141% mais menos sete, valor p menor que 0,01. Alimentos obtidos por um emparelhamento, 168% mais menos 12, valor p inferior a 0,01.

Tempo gasto em gaiolas separadas 123% mais menos 7,9, valor p inferior a 0,01, e alimentos obtidos por ataque, 232%mais menos 26, valor p menor que 0,01. Em comparação com os ratos depressivos que receberam terapia antidepressivo, 67% mais menos 3,4, 54% mais menos cinco, 53% mais menos seis, 55% mais menos 4,7, 44% mais menos sete, respectivamente. As diferenças que os ratos induziram com sintomas depressivos e ratos deprimidos tratados com antidepressivos foram estatisticamente maiores do que as diferenças entre os ratos induzidos com sintomas depressivos e o grupo controle em todos os cinco parâmetros do mergulho complexo para testes alimentares, valor p inferior a 0,05.

Não houve diferença no consumo de sacarose no início do experimento. Até o dia 35 do experimento, o grupo de depressão p-valor inferior a 0,01. E o grupo de depressão tratado com terapia antidepressivo, p valor inferior a 0,01 tinha uma preferência de sacarose significativamente menor do que o grupo controle.

No dia 62, os ratos induzidos com sintomas depressivos apresentaram menor percentual entre as preferências em comparação com o controle e o grupo de depressão tratados com tratamento antidepressivo, p avaliados em menos de 0,05.Conclusão. O mergulho complexo para a tarefa alimentar pode nos permitir avaliar a relação entre a ampla gama de doenças mentais e organização social, bem como estudar a eficácia da terapia e disfunção social. Muito obrigado por sua atenção.