Usando Y-Mazes fechados para avaliar o comportamento chemosensorial em répteis

Este método permite a avaliação do comportamento exploratório em vertebrados terrestres quando apresentados apenas com pistas químicas. É adaptável a muitas espécies. Os labirintos Y fornecem insights sobre questões comportamentais e ecológicas em vertebrados que permitem aos pesquisadores determinar a relevância de estímulos específicos que conduzem o comportamento animal.

Labirintos Y são altamente adaptáveis e amplamente úteis para avaliar o comportamento animal, especialmente preferência e comportamento modular. Demonstrando o procedimento será Gretchen Anderson da USGS. Comece colocando papel de perfumamento novo e limpo no labirinto Y que é tempo suficiente para se sobrepor na junção do Y e cobrir toda a superfície inferior.

Proteja as extremidades dos papéis perto das caixas e da junção Y com fita adesiva. Instale as partições para bloquear metade do braço base. Para animais de grande cheiro, afixe um objeto pesado que pode ser facilmente removido e limpo atrás da barreira como uma cinta para evitar a falha da barreira.

Em seguida, instale a barreira na entrada do braço oposto. Ao instalar as barreiras, não rasgue o papel perfumado. Deslize a parte superior acrílica para colocar uma seção de cada vez e certifique-se de que os ângulos se encontrem completamente.

Use fita plástica transparente para cobrir quaisquer lacunas. Coloque ambas as caixas de braço no labirinto conectando as placas faciais com porcas de asa ou cadeados e certifique-se de que as portas estão abertas. Em uma hora do dia biologicamente relevante para o pico de atividade de sua espécie de estudo, anexar a caixa base contendo o animal perfumado, mantendo todos os movimentos lentos e constantes para minimizar o estresse ao animal e abrir a porta para a caixa base travando a porta no lugar com ambas as travas do parafuso do barril.

Fique fora da vista do animal e saia da área. Após três horas, observe a localização do animal dentro do labirinto, bem como as condições ambientais. Se o animal estiver em trânsito, espere até que ele entre na caixa.

Se o animal estiver em alguma caixa, feche e proteja a porta da caixa, retire a caixa e, em seguida, remova o animal, tomando cuidado para evitar o deposição do cheiro defensivo na caixa. Se o animal estiver imóvel dentro do corpo do labirinto, use pistas visuais para estimular seu movimento na caixa. Se o animal permanecer no lugar, remova as caixas de braço para que a parte superior acrílica possa ser removida, em seguida, recolham o animal manualmente e transfiram-no para um saco.

Desmonte parcialmente o labirinto para permitir a remoção das partições internas, tomando cuidado para evitar perturbar o papel-cheiro e, em seguida, remontá-lo. Se ocorreu defecação, colete e absorva o máximo possível com panos de microfibra limpos, mas não lave a área. Use movimentos lentos e constantes ao segurar e transportar a caixa para minimizar o estresse ao animal focal.

Conecte a caixa base à base do labirinto Y usando porcas de asa ou cadeados. Certifique-se de que ambas as portas da caixa de braço estão abertas, em seguida, comece o ensaio focal abrindo e travando a porta da caixa base usando parafusos de barril. Fique fora da vista do animal e saia da área.

Uma infinidade de variáveis pode ser registrada e pontuada a partir de ensaios y-maze. A maioria dos estudos que utilizam Y-mazes relata dados simples de escolha binária e analisou os resultados com estatísticas paramétricas, como um teste binomial. Uma série de limiares estatísticos por estudo são retratados aqui, demonstrando quantos sucessos precisariam ocorrer para um determinado teste binomial produzir resultados estatisticamente significativos.

Estes são matematicamente derivados e, portanto, generalizáveis para qualquer teste de labirinto Y. Ao longo da duração de um experimento no qual os animais focais são observados, uma variedade de comportamentos individuais pode ser quantificada. Gravações de vídeo facilitam a pontuação comportamental.

Aspectos temporais do desempenho animal também podem ser quantificados durante os ensaios do labirinto Y. Com quaisquer estudos envolvendo comportamento animal, o viés dos observadores influencia significativamente a coleta de dados. Portanto, os observadores devem ser cegos para o tratamento que está sendo testado.

A maneira mais simples de fazer isso é codificar os arquivos de vídeo numericamente, e então classificá-los aleatoriamente antes de atribuí-los aos observadores. Qualquer aparelho experimental em estudos quimiológicos como Y-mazes deve ser construído para permitir baixo estresse, fácil remoção do animal dentro e deve ser fácil de desmontar para limpeza e reset completo. Estímulos podem ser testados em combinações únicas para determinar a influência multimodal de pistas, como a mudança de contextos de apresentação de pistas.

Por exemplo, pistas visuais e químicas podem ser apresentadas. Embora os labirintos Y tenham sido usados por aproximadamente 100 anos para testar o comportamento dos répteis, essa abordagem aumenta a capacidade de trabalhar com espécies grandes e invasoras, bem como para capturar remotamente dados de vídeo.