Name: Um modelo de camundongo In Vivo de anestesia intravenosa total durante a cirurgia de ressecção do câncer (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-08T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 40 s
Description: Aprenda a modelar anestesia intravenosa total com propofol em camundongos durante cirurgia de ressecção de câncer. Este método permite investigar os efeitos da técnica anestésica na recorrência tumoral.

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Os autores desejam agradecer aos membros do Cancer Neural-Immune Laboratory e ao Dr. Cameron Nowell do Monash Institute of Pharmaceutical Sciences, Monash University, Parkville. Este trabalho foi apoiado por doações do Conselho Nacional de Saúde e Pesquisa Médica 1147498, da Fundação Nacional do Câncer de Mama IIRS-20-025, do Colégio Australiano e Neozelandês de Anestesistas (ANZCA), Perpetual e CTC for Cancer Therapeutics.

Todos os estudos em animais foram realizados sob a aprovação do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Monash. Neste estudo, foram utilizadas fêmeas de camundongos Balb/c com idades entre 6-8 semanas.
1. Prepare as células cancerosas
<ol><li>Cultura de células tumorais em meio. Cultura de células de câncer mamário murino 66cl4 em alfa-MEM contendo 10% de FBS e 200 mM de glutamina. As células devem enviar texto negativo para micoplasma. OPCIONAL: Use células que são transduzidas de forma estável para expressar luciferase de vagalume para imagens de bioluminescência para permitir o monitoramento da recorrência do câncer após a cirurgia de ressecção11 (ver etapa 4). NOTA: A linhagem celular e o meio mencionado acima foram utilizados neste estudo.</li>
	<li>Cultivar células a 37 °C com 5% de CO2. Células de passagem assepticamente em um exaustor com <80% de confluência. Use células de baixa passagem na fase de crescimento logarítmico para obter ótimos resultados in vivo.</li>
	<li>Levantar as células aderentes com 0,5 mg/mL de tripsina em PBS com EDTA 10 mM; 2 ml para um balão T75. Quando levantado, adicione o meio para desativar a tripsina e lave as células em PBS.</li>
	<li>Conte as células usando um hemocitômetro. Dilua as células em PBS para injeção. Para 66cl4 células cancerígenas mamárias, injete 1 x 105 células em 20 μL de PBS por rato.</li>
	<li>Coloque as células no gelo antes da injeção.</li>
</ol>2. Gerar um modelo de rato de câncer de mama
<ol><li>Use isoflurano a 4% para anestesiar o camundongo em uma câmara de indução. Em seguida, mantenha a anestesia com isoflurano a 2%-3% usando um cone nasal. Confirme a anestesia adequada por falta de resposta à beliscão do dedo do pé.</li>
	<li>Prepare o local da injeção limpando a quarta área da almofada mamária esquerda usando um cotonete com álcool de uso único.</li>
	<li>Desenhe as células tumorais (ver passo 1.4) numa seringa Hamilton de 25 μL ligada a uma agulha hipodérmica estéril de 27 G.</li>
	<li>Injete as células na quarta almofada mamária esquerda. Use fórceps para prender e levantar a pele. Injete aproximadamente 1 mm do mamilo.</li>
	<li>OPCIONAL: Se as células forem marcadas com luciferase, confirme a injeção bem-sucedida de células tumorais por imagem de bioluminescência. Injete 100 μL de 150 mg/kg de D-luciferina na veia lateral da cauda dos camundongos anestesiados usando uma seringa de insulina de 0,5 mL com uma agulha hipodérmica de 30 G.</li>
	<li>OPCIONAL: Coloque o rato num sistema de imagem de bioluminescência com a almofada de gordura mamária virada para cima. Aguarde 2 minutos da injeção de luciferina para uma absorção tecidual ideal de luciferina e, em seguida, a imagem por 10 s.</li>
	<li>Coloque o rato numa gaiola limpa e deixe-o recuperar da anestesia.</li>
	<li>Continuar a monitorar o bem-estar animal de acordo com as diretrizes institucionais de ética animal.</li>
</ol>3. Induzir anestesia estável com administração intravenosa de propofol
<ol><li>Monitorar o crescimento do tumor primário usando a medida do paquímetro e calcular o volume do tumor usando a equação: Volume (mm3) = (comprimento x (largura)2 ÷ 2 ).</li>
	<li>Realize a cirurgia de ressecção tumoral em camundongos quando o tumor primário atingir o volume necessário (aqui, 80-90 mm3).</li>
	<li>Configure uma bomba de seringa automatizada com uma seringa de insulina 30 G 1 mL contendo formulação de propofol (Lipuro propofol a 2%) (Figura 1A).</li>
	<li>Induzir anestesia do rato numa câmara de indução com sevoflurano ou isoflurano a 3%. NOTA: Aqui, o sevoflurano foi utilizado, pois este é o volátil predominante usado clinicamente.</li>
	<li>Transfira o rato para uma almofada de aquecimento a 37 °C durante a cirurgia. Mantenha brevemente a anestesia com sevoflurano a 2%-3% usando um cone nasal.</li>
	<li>Aplique lubrificante aquoso nos olhos para evitar a secagem.</li>
	<li>Injete 0,05 mg/kg de buprenorfina por via subcutânea para analgesia.</li>
	<li>Para se preparar para a cirurgia, raspe o abdômen e prepare a pele para a cirurgia com uma solução de iodo-povidona. Limpe a pele usando um álcool ou lenço umedecido.</li>
	<li>Para administrar a TIVA à base de propofol, canular a veia lateral da cauda usando uma agulha hipodérmica estéril de 30 G presa a um cateter de poliuretano estéril. Confirme a colocação correta por flashback de sangue no cateter (Figura 1B). Ajustar a administração de sevoflurano conforme necessário durante a canulação intravenosa para manter uma profundidade estável de anestesia demonstrada pela perda do reflexo corneano e pedal, e frequência respiratória < 100 respirações por minuto.</li>
	<li>Iniciar propofol-TIVA administrando propofol a 2% como bolus inicial de 27 mg/kg por mais de 1 min. Cessar a administração de sevoflurano.</li>
	<li>Continue a infusão de propofol a uma taxa de manutenção de 2,2-4,0 mg/kg/min para manter uma profundidade estável de anestesia durante a cirurgia (Figura 1C).</li>
</ol>4. Ressecar o tumor primário
<ol><li>Faça uma incisão reta de 1 cm inferior ao tumor na região da almofada mamária quarta esquerda. Ressecar cuidadosamente o tumor e o linfonodo inguinal esquerdo usando dissecção com pinça contundente.</li>
	<li>OPCIONAL: Se estiver usando células tumorais marcadas com luciferase, use imagens de bioluminescência para confirmar margens cirúrgicas claras. Injete 150 mg/kg de D-luciferina na veia lateral da cauda, aguarde 2 minutos e, em seguida, faça uma imagem por 60 s usando um sistema de imagem de bioluminescência. Se um tumor residual for identificado, resssecte o tecido adicional da almofada mamária e refaça a imagem para obter margens claras.</li>
	<li>Assegure-se da hemostasia no local da cirurgia e feche a pele usando suturas de nylon 5-0. Certifique-se de que a pele não entre no local da cirurgia.</li>
	<li>Na conclusão da cirurgia de ressecção, cesse a anestesia. Coloque o rato numa gaiola limpa numa almofada de aquecimento a 37 °C e deixe-o recuperar da anestesia.</li>
	<li>Monitore a cada 15 minutos após a anestesia até que o rato tenha retornado ao estado de alerta normal. Em seguida, monitore o mouse a cada 12 h por 48 h após a cirurgia.</li>
	<li>Administrar 0,05 mg/kg de buprenorfina por via subcutânea a cada 12 h durante 48 h após a cirurgia.</li>
	<li>Após 7-10 dias, remova as suturas usando cortadores de ponto curvos estéreis sob breve anestesia com sevoflurano ou isoflurano.</li>
</ol>5. Acompanhe a recorrência do câncer com imagens in vivo
<ol><li>Use imagens de bioluminescência para rastrear a recorrência do câncer após a cirurgia de ressecção de forma não invasiva. Use um sistema de imagem de bioluminescência para monitorar os camundongos uma vez por semana em busca de evidências de recorrência do tumor primário ou recorrência à distância, começando na semana seguinte à cirurgia.</li>
	<li>Induzir anestesia do rato numa câmara de indução com isoflurano a 4%. Em seguida, transfira o rato para uma almofada de aquecimento a 37 °C durante a anestesia e mantenha a anestesia com isoflurano a 2%-4% utilizando um cone nasal.</li>
	<li>Aplique lubrificante aquoso nos olhos para evitar a secagem.</li>
	<li>Injete D-luciferina 150 mg/kg na veia lateral da cauda. Aguarde 2 minutos e, em seguida, meça a bioluminescência ao longo de uma exposição de 60 s para detectar a recorrência do tumor primário ou metástase à distância.</li>
	<li>Se o tumor primário se repetir e se tornar palpável, inicie o monitoramento do crescimento do tumor usando medidas de paquímetro.</li>
	<li>No final do experimento, mate humanamente os ratos de acordo com o protocolo aprovado. Aqui, utilizou-se CO2 , seguido de luxação cervical.</li>
</ol>

<ol><li>Sullivan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cancer+surgery%3A+delivering+safe%2C+affordable%2C+and+timely+cancer+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Global cancer surgery: delivering safe, affordable, and timely cancer surgery.</a> Lancet Oncology. 16 (11), 1193-1224 (2015).</li>
<li>Lim, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+propofol+and+sevoflurane+on+cancer+cell%2C+natural+killer+cell%2C+and+cytotoxic+T+lymphocyte+function+in+patients+undergoing+breast+cancer+surgery%3A+an+in+vitro+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">The effect of propofol and sevoflurane on cancer cell, natural killer cell, and cytotoxic T lymphocyte function in patients undergoing breast cancer surgery: an in vitro analysis.</a> BMC Cancer. 18 (1), 159(2018).</li>
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<li>Lai, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propofol-based+total+intravenous+anesthesia+is+associated+with+better+survival+than+desflurane+anesthesia+in+hepatectomy+for+hepatocellular+carcinoma%3A+a+retrospective+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Propofol-based total intravenous anesthesia is associated with better survival than desflurane anesthesia in hepatectomy for hepatocellular carcinoma: a retrospective cohort study.</a> British Journal of Anaesthesia. 123 (2), 151-160 (2019).</li>
<li>Hong, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthetics+and+long-term+survival+after+cancer+surgery-total+intravenous+versus+volatile+anesthesia%3A+a+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Anesthetics and long-term survival after cancer surgery-total intravenous versus volatile anesthesia: a retrospective study.</a> BMC Anesthesiology. 19 (1), 233(2019).</li>
<li>Flecknell, P. Special Techniques. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFlecknell%2C+P+%22Laboratory+Animal+Anaesthesia.+Fourth+edition%22">Laboratory Animal Anaesthesia. Fourth edition</a>. , Elsevier. Chapter 3 (2015).</li>
<li>Cicero, L., Fazzotta, S., Palumbo, V. D., Cassata, G., Lo Monte, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+protocols+in+laboratory+animals+used+for+scientific+purposes%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomedica%22%5BJournal%5D)">Anesthesia protocols in laboratory animals used for scientific purposes.</a> Acta Biomedica. 89 (3), 337-342 (2018).</li>
<li>Sloan, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sympathetic+nervous+system+induces+a+metastatic+switch+in+primary+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">The sympathetic nervous system induces a metastatic switch in primary breast cancer.</a> Cancer Research. 70 (18), 7042-7052 (2010).</li>
<li>Al-Hashimi, M., Scott, S. W. M., Thompson, J. P., Lambert, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opioids+and+immune+modulation%3A+more+questions+than+answers%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Opioids and immune modulation: more questions than answers.</a> British Journal of Anaesthesia. 111 (1), 80-88 (2013).</li>
<li>DeMarco, G. J., Nunamaker, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Review+of+the+effects+of+pain+and+analgesia+on+immune+system+function+and+inflammation%3A+relevance+for+preclinical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Medicine%22%5BJournal%5D)">A Review of the effects of pain and analgesia on immune system function and inflammation: relevance for preclinical studies.</a> Comparative Medicine. 69 (6), 520-534 (2019).</li>
<li>Hiller, J. G., Perry, N. J., Poulogiannis, G., Riedel, B., Sloan, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perioperative+events+influence+cancer+recurrence+risk+after+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Perioperative events influence cancer recurrence risk after surgery.</a> Nature Reviews Clinical Oncology. 15 (4), 205-218 (2018).</li>
</ol>

Os autores declaram não haver interesses financeiros concorrentes.

Este estudo relata um protocolo para administração de anestesia venosa total (TIVA) com propofol em um modelo de camundongo de câncer de mama que replica aspectos-chave da prática clínica para TIVA em pacientes que necessitam de cirurgia oncológica. O protocolo permite a investigação de desfechos clinicamente relevantes a curto e longo prazo após a cirurgia de câncer em um modelo de camundongo de progressão do câncer, incluindo a medição dos níveis de citocinas e recorrência do câncer (Figura 2</stro...

Mais de 60% dos pacientes com câncer recebem anestesia para ressecção cirúrgica1. Atualmente, não existem diretrizes clínicas específicas que determinem a escolha da anestesia utilizada em pacientes com câncer. Levantamentos com anestesiologistas indicam preferência pela anestesia volátil, inclusive durante a cirurgia oncológica 2,3. No entanto, há um crescente corpo de evidências de que o uso de anestesia venosa total (TIVA) baseada em propofol durante a cirurgia oncológica pode estar associado a melhores resultados pós-operatórios (sobrevida livre de progressão, sobrevida global) quando comparado à anestesia volátil4. Estudos clínicos subsequentes continuam a relatar resultados contraditórios 5,6,7,8. Esses achados reforçam a necessidade de estudos pré-clínicos para entender melhor os efeitos mecanicistas de diferentes agentes anestésicos nos desfechos relacionados ao câncer.
No entanto, em estudos in vivo que modelam a cirurgia de câncer, a anestesia é frequentemente uma parte incidental do procedimento. A justificativa para a escolha da anestesia muitas vezes não é o foco do delineamento experimental, e seu impacto nos desfechos relacionados ao câncer pode não ser avaliado. Por exemplo, estudos in vivo que requerem manutenção da anestesia para cirurgia oncológica mais comumente utilizam anestesia volátil inalatória9. Nos casos em que o propofol tem sido utilizado em estudos in vivo , ele foi administrado por dose única em bolus com administração intraperitoneal, que não replica protocolos clínicos onco-anestésicos10. Essa abordagem da administração de propofol induz anestesia leve que é adequada para procedimentos rápidos. No entanto, não permite a manutenção da anestesia que é necessária para a cirurgia de ressecção do câncer, que pode ser prolongada. Além disso, a cinética de absorção do parto intraperitoneal é distinta dos métodos clínicos de administração.
Um modelo de TIVA baseada em propofol para cirurgia de ressecção de câncer foi desenvolvido para atender a essa necessidade. Um protocolo para manutenção sustentada da anestesia com titulação do agente anestésico para permitir a resposta ao estímulo cirúrgico foi desenvolvido para replicar aspectos-chave da entrega anestésica a pacientes submetidos à cirurgia oncológica. O protocolo resultante é usado com um modelo de câncer em camundongo para fornecer TIVA durante a cirurgia de ressecção do câncer. O efeito sobre os resultados relacionados ao câncer de curto e longo prazo é avaliado.

<table><tbody><tr><td>0,9% de soro fisiológico</td><td>Fresnius Kabi</td><td>AUST R 197198</td><td></td></tr><tr><td>Pinça de artéria</td><td>Proscitech</td><td>TS1322-140</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Temgesic</td><td>TEMG I</td><td></td></tr><tr><td>Tapete cirúrgico aquecido</td><td>Agulha</td><td></td> hipodérmica personalizada (30 G, seringa de <td></td></tr><tr><td>insulina de 1 mL)</td><td>Terumo</td><td>NN3013R</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Lumina</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td></td>126274</tr><tr><td>Luciferina</td><td>Promega</td><td>P1041 / 2/3</td><td></td></tr><tr><td>Cateter de poliuretano</td><td>Intramedic</td><td>427401</td><td></td></tr><tr><td>Povidona Iodo</td><td>Betadine</td><td>AUST R 29562</td><td></td></tr><tr><td>Propofol Lipuro, 2%</td> <td>Braun</td><td>3521490</td><td></td></tr><tr><td>Sevoflurano</td><td>Baxter</td><td>ANZ2L9117</td><td></td></tr><tr><td>Vaporizador de Sevoflurano</td><td>Vetquip</td><td>VQ1334</td><td></td></tr><tr><td>Gaze estéril</td><td>Multigate Medical Products</td><td>11-600A</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura cirúrgica</td><td>Proscitech</td><td>TS1044</td><td></td></tr><tr><td>Suturas, 5-0 nylon</td><td>Dynek</td><td>V504</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de seringa</td><td>Harvard Apparatus</td><td>70-4500</td><td></td></tr><tr><td>Seringas (1 mL)</td> <td>Terumo</td><td>SS + 01T</td><td></td></tr></tbody></table>

um modelo de camundongo in vivo de anestesia intravenosa total durante a cirurgia de ressecção do câncer

An In Vivo Mouse Model of Total Intravenous Anesthesia During Cancer Resection Surgery

A anestesia é um componente de rotina do tratamento do câncer que é usado para procedimentos diagnósticos e terapêuticos. A técnica anestésica tem sido recentemente implicada em impactar os resultados do câncer a longo prazo, possivelmente através da modulação de respostas adrenérgico-inflamatórias que afetam o comportamento das células cancerígenas e a função das células imunes. Evidências emergentes sugerem que a anestesia intravenosa total (TIVA) baseada em propofol pode ser benéfica para os desfechos de câncer a longo prazo quando comparada à anestesia volátil inalatória. No entanto, os achados clínicos disponíveis são inconsistentes. Estudos pré-clínicos que identifiquem os mecanismos subjacentes envolvidos são criticamente necessários para orientar o desenho de estudos clínicos que acelerem a percepção. A maioria dos modelos pré-clínicos de anestesia foi extrapolada a partir do uso de anestesia em pesquisas in vivo e não são projetados de forma ideal para estudar o impacto da própria anestesia como desfecho primário. Este artigo descreve um método para a administração de anestesia propofol-TIVA em um modelo de camundongo de ressecção de câncer de mama que replica aspectos-chave da entrega clínica em pacientes com câncer. O modelo pode ser usado para estudar mecanismos de ação da anestesia sobre os resultados do câncer em diversos tipos de câncer e pode ser extrapolado para outras áreas não cancerígenas da pesquisa em anestesia pré-clínica.

Este método descreve um modelo de anestesia venosa total (TIVA) com propofol durante a cirurgia de ressecção de câncer em camundongos. O propofol é administrado neste modelo de camundongo através de um cateter intravenoso usando uma bomba de seringa (Figura 1A,B) para replicar a administração de TIVA no ambiente clínico de anestesia para cirurgia de câncer. O uso da bomba de seringa minimiza a exposição à anestesia volátil, permitindo a rápida conversão da indução inicial pe...

Este artigo descreve um método para modelar a anestesia venosa total (TIVA) durante a cirurgia de ressecção de câncer em camundongos. O objetivo é replicar as principais características da administração anestésica a pacientes com câncer. O método permite investigar como a técnica anestésica afeta a recorrência do câncer após a cirurgia de ressecção.

Um modelo de camundongo In Vivo de anestesia intravenosa total durante a cirurgia de ressecção do câncer

Anesthesia is a routine component of cancer care that is used for diagnostic and therapeutic procedures. The anesthetic technique has recently been ...

Este novo protocolo descreve a anestesia cirúrgica em camundongos usando anestesia com propofol. O método permite a pesquisa sobre anestesia com propofol em modelos de doença em camundongos. O protocolo permite a avaliação da anestesia venosa total e evita o uso de anestesia volátil.O protocolo pode ser usado para explorar como a anestesia com propofol afeta os resultados relacionados à doença. Por exemplo, aqui avaliamos os resultados do câncer a curto e longo prazo após a cirurgia para remover o tumor. Para começar, cultive 66 células cancerígenas mamárias CL4 Mirai que são transduzidas de forma estável para expressar luciferase de vagalume em meio alfa MEM contendo 10% de FBS e 200 milimolares de glutamina.Incubar as células a 37 graus Celsius, mas 5% de dióxido de carbono. Subcultura das células quando as células atingirem aproximadamente 80% de confluência. Quando as células estão em uma fase de crescimento logarítmico com dois mililitros de gotejamentos em solução de EDTA, levante as células aderentes e conte as células usando um hemocitômetro.Em seguida, dilua as células em PBS e mantenha a suspensão de células diluídas no gelo até que o rato esteja pronto para a injeção. Um

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O rato modelo estase completa de veia cava inferior trombose produz quantidades mensuráveis ​​de tecido veia parede e trombo. Ele tem se mostrado útil para avaliar as interações entre a parede da veia eo trombo oclusivo e na avaliação da progressão de aguda a inflamação crônica.

Modelo do mouse completa de Stasis Inferior Trombose da veia cava

Fonte: Shannonhouse, J., et al. In vivo Imagem de cálcio de conjuntos neuronais em redes de neurônios sensoriais primários em gânglios da raiz dorsal intactos. J. Vis. Exp. (2023). O vídeo demonstra uma técnica de imagem de cálcio in vivo para monitorar a atividade neuronal nos gânglios da raiz dorsal (DRG) de um camundongo transgênico. Os neurônios DRG expressam um indicador de cálcio que aumenta a intensidade da fluorescência ao se ligar ao cálcio. Estímulos mecânicos ou térmicos aplicados a...

Imagem de cálcio in vivo de conjuntos neuronais nos gânglios intactos da raiz dorsal de um camundongo

Fonte: Alomari, S., et al. Implementação de ressecção minimamente invasiva de tumor cerebral em roedores para coleta de tecidos de alta viabilidade. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra o uso de um sistema de ressecção minimamente invasivo (MIRS) para extirpar o tecido tumoral de um camundongo anestesiado implantado com um tumor. O procedimento envolve prender o mouse em uma estrutura estereotáxica, reabrir o local cirúrgico anterior para acessar o cérebro e inserir uma cânula especializada...

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Viver de imagem de Respostas de drogas no microambiente tumoral em modelos do rato do cancro da mama

Apresentado aqui é um método simples para o isolamento e análise de citometria de fluxo de células mononucleares de sangue periférico que se infiltram no glioma que produz dados quantitativos tempo-dependente do número e estado de activação das células do sistema imunológico que entram no microambiente do tumor cerebral precoce.

Isolamento e Análise de Citometria de Fluxo infiltrantes Glioma Células Mononucleares do Sangue Periférico

Este manuscrito descreve o desenvolvimento de um modelo animal que permite testar diretamente os efeitos da hipóxia tumoral na metástase e decifrar os mecanismos de sua ação. Embora os experimentos descritos aqui se concentrem no sarcoma de Ewing, uma abordagem semelhante pode ser aplicada a outros tipos de tumores.

No modelo in vivo para o ensaio do efeito de hipoxia em metástase tumoral

Este protocolo descreve a implantação de uma janela de vidro na medula espinal de um rato para facilitar o visualização pela microscopia intravital.

Implante de janela de laminectomia e medula espinhal no mouse

Nós descrevemos em detalhe um modelo clinicamente relevante do tumor das metástases do fígado do cancro colorretal (crlm) e a influência do reperfusão da isquemia do fígado (I/R) no crescimento e na metástase do tumor. Este modelo pode ajudar a compreender melhor os mecanismos subjacentes à promoção cirurgia-induzida do crescimento metastático do fígado.

Modelo murino de tumores hepáticos metastáticos no cenário de lesão de reperfusão de isquemia

Neste protocolo, descrevemos um modelo de camundongo de ressecção cirúrgica incompleta de sarcoma de tecido mole para testar (neo)terapias adjuvantes.

Um modelo de mouse de sarcoma de tecido mole incompletamente ressectado para testar (Neo)terapias adjuvantes

Apresentamos um protocolo para expor o tronco cerebral do rato adulto do lado ventral. Usando uma lente de índice gradiente-refrativo com um microscópio em miniatura, a imagem de cálcio pode ser usada para examinar a atividade de somata neural inferior de oliva in vivo.

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O presente protocolo descreve uma ressecção padronizada de tumores cerebrais em roedores através de uma abordagem minimamente invasiva com um sistema integrado de preservação de tecidos. Esta técnica tem implicações para espelhar com precisão o padrão de cuidado em roedores e outros modelos animais.

Implementação de ressecção de tumor cerebral minimamente invasiva em roedores para coleta de tecido de alta viabilidade

Aprenda a modelar anestesia intravenosa total com propofol em camundongos durante cirurgia de ressecção de câncer. Este método permite investigar os efeitos da técnica anestésica na recorrência tumoral.

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