26 de outubro de 2021
Este trabalho descreve um protocolo padrão para testes sensoriais quantitativos mecânicos e térmicos a quente para avaliar o sistema somatossensorial em cães. Os limiares sensoriais são medidos usando anestesiômetro eletrônico de von Frey, algômetro de pressão e termo de contato quente.
Este protocolo para avaliar os limiares sensoriais em cães usando testes sensoriais quantitativos ou QST ajudará a padronizar os estudos, permitindo comparações valiosas entre diferentes estudos. Esta técnica fornece um método não invasivo para medir os limiares sensoriais em cães. Nosso protocolo ajuda a orientar os pesquisadores sobre as melhores práticas para obter dados precisos e consistentes.
Este protocolo pode fornecer informações sobre os mecanismos de sensação de dor em cães, incluindo após cirurgias e para doenças associadas a estados de dor crônica. O aspecto mais importante dessa técnica é estar ciente do comportamento canino. Para garantir testes seguros e precisos, todos os envolvidos devem estar atentos ao comportamento e aos níveis de ansiedade do cão.
Comece organizando a configuração do instrumento aplicando suavemente uma ponta rígida de Von Frey de 0,9 milímetro na célula de carga, garantindo que a célula de carga esteja firmemente aparafusada na peça de mão. Em seguida, conecte o cabo da peça de mão ao dispositivo de gravação através do canal M0. Em seguida, ligue o dispositivo de gravação e pressione o botão máximo para registrar e exibir a força máxima alcançada quando o cão responde ao estímulo aplicado.
Zere o instrumento pressionando o botão CLR. Para coletar os dados e medir os limiares, instrua o cão a deitar e, em seguida, ajude-o a ficar na posição de decúbito lateral. Aplique contenção mínima a moderada para manter o cão na posição e relativamente imóvel.
Forneça suporte manual suave ao membro do cão que está sendo testado para manter o membro fora do chão e forneça um suporte estável para aplicar força, sem impedir que o cão retire o membro. Quando o cão estiver calmo e relaxado, com o membro sendo testado em 70% de extensão, aplique o estímulo uma vez. Coloque a ponta de Von Frey perpendicular à pele da área que está sendo testada.
Se o cão exibir movimentos reflexos da sensação da ponta de Von Frey na pele, permita que o cão relaxe o membro novamente antes de reaplicar a ponta de Von Frey. Quando a pele não causar movimentos reflexos, faça uma medição aplicando a ponta de Von Frey. Aplique força cada vez maior com a ponta de Von Frey a 20 gramas por segundo até que o cão retire o membro, vocalize.
vira-se para olhar para o estímulo ou exibe outros movimentos ou respostas comportamentais indicando a percepção consciente do estímulo. Remova o estímulo quando o cão retirar o membro ou a força máxima for atingida e registre a força máxima aplicada que é exibida no dispositivo de gravação. Repita as medições por cinco tentativas, permitindo um minuto entre cada medição com o cão em decúbito lateral se ele permanecer relativamente calmo e relaxado com nenhuma ou mínima restrição.
Zere o instrumento entre cada etapa pressionando o botão CLR. Em seguida, registre uma pontuação de viabilidade de zero a cinco para indicar a facilidade de coleta de dados. Dê ao cão uma pausa de cinco minutos antes de iniciar as medições com o algômetro de pressão sem corte.
Ao configurar o instrumento, certifique-se de que a pequena sonda romba esteja firmemente aparafusada no dispositivo. Em seguida, ligue o dispositivo de gravação e pressione o botão máximo para continuar quando solicitado na tela. Pressione o botão da unidade até que a unidade seja exibida como gramas na parte superior da tela e pressione o botão zero para zerar o instrumento.
Em seguida, coloque e prepare o cão em decúbito lateral para medir os limiares, conforme mencionado anteriormente. Aplique a sonda romba perpendicular à pele da área que está sendo testada para aplicar uma força cada vez maior com a sonda a 20 gramas por segundo até que o cão exiba respostas comportamentais que indiquem a percepção consciente do estímulo. Remova o estímulo quando o cão retirar o membro ou a força máxima for atingida.
Depois de registrar a força máxima aplicada do dispositivo de registro, repita as medições por um total de cinco tentativas. Permita que o cão permaneça em decúbito lateral para sentar, ficar de pé ou se mover pela sala QST para manter o conforto durante o intervalo entre as tentativas. Em seguida, substitua o cão em decúbito lateral antes da medição subsequente.
Registre uma pontuação de viabilidade de zero a cinco para indicar a facilidade com que os dados foram coletados. Dê ao cão uma pausa de cinco minutos antes de iniciar as medições com a sonda térmica quente. Antes de iniciar o experimento, prepare o cão conforme explicado anteriormente.
Em seguida, aplique o termodo na pele da área que está sendo testada e clique no botão Iniciar no canto inferior esquerdo da guia de teste para iniciar o teste. Quando o cão apresentar movimentos ou respostas comportamentais que indiquem a percepção consciente do estímulo ou quando a latência máxima for atingida, remova o termodo enquanto simultaneamente para o cronômetro. Registre a latência para retirar.
Repita as medições para um total de cinco tentativas clicando primeiro no botão de parada e, em seguida, clicando no botão de pré-teste entre cada medição para interromper o aquecimento do termodo. Isso permitirá que o software recalibre o termodo para se preparar para a próxima aplicação. Registre uma pontuação de viabilidade de zero a cinco para indicar a facilidade com que os dados foram coletados.
A análise representativa resume os dados de QST mecânicos e térmicos quentes de um grupo de cães saudáveis e sem dor. Os dados das medições dos limiares sensoriais do estesiômetro eletrônico de Von Frey não mostraram efeito significativo dos pesos corporais sobre os limiares sensoriais. Um impacto semelhante dos pesos corporais foi observado nos dados dos limiares sensoriais do algômetro de pressão contundente.
Por outro lado, os dados coletados para a latência sensorial da sonda térmica quente mostraram um efeito significativo do peso corporal sobre a latência sensorial. A média geral, o desvio padrão e a amplitude dos limiares sensoriais para o QST mecânico e térmico quente foram resumidos no mesmo grupo de cães saudáveis e sem dor. Isso fornece valores de referência para futuros pesquisadores que usam essas técnicas: É mais importante identificar com segurança a resposta comportamental do cão que indica a percepção consciente do estímulo, que pode parecer diferente para cães diferentes.
Além dos testes sensoriais quantitativos, a coleta de informações comportamentais por meio de questionários validados do proprietário e testes de reatividade emocional pode ajudar a fornecer uma avaliação abrangente do estado afetivo do cão.
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Este estudo apresenta um protocolo padrão para testes sensoriais quantitativos (QST) em cães, com o objetivo de avaliar o sistema somatossensorial por meio de métodos mecânicos e térmicos quentes. Ao utilizar ferramentas como o algesiômetro eletrônico de von Frey e o algesiômetro de pressão, o protocolo busca padronizar as avaliações, permitindo comparações entre diversos estudos.
A avaliação sensorial quantitativa (QST) em cães oferece uma abordagem padronizada e não invasiva para avaliar a função somatossensorial, apoiando pesquisas translacionais sobre dor e o desenvolvimento de modelos comparativos. O estabelecimento de limiares sensoriais de referência e pontos finais comportamentais permite uma avaliação pré-clínica mais preditiva de candidatos analgésicos e a redução de riscos mecanicistas nos fluxos de trabalho de neurociência veterinária e comparativa. Protocolos padronizados de QST facilitam a comparabilidade de dados entre estudos e entre centros, fortalecendo a tomada de decisões em portfólios na descoberta inicial e na pesquisa translacional.
A TQS integra-se ao continuum de descoberta a pré-clínico como uma leitura funcional para validação de alvo, otimização de compostos líderes e desenvolvimento de biomarcadores translacionais em pipelines de dor e distúrbios sensoriais.