Name: Avaliando o efeito dos pesticidas nas larvas das abelhas solitárias (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-10-15T14:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Aprenda a avaliar a ecotoxicidade de pesticidas em larvas de abelhas solitárias Osmia excavata usando simulação de alimentação contaminada. Este método ajuda a prevenir impactos prejudiciais às populações de polinizadores.

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Este estudo foi apoiado pelo National Key P&D Program of China (2017YFD0200400), Major Scientific and Technology Innovation Project (2017CXGC0214), Bee Industry Innovation Team of Shandong Province, Projeto de Inovação em Ciência e Tecnologia Agrícola da Academia de Ciências Agrícolas de Shandong (CXGC2019G01) e Projeto de Inovação em Ciência e Tecnologia Agrícola da Academia shandong de Ciências Agrícolas (CXGC2021B13).

1. Preparação do tubo de alimentação
<ol><li>Faça um orifício (~0,3 mm de diâmetro) na tampa de um tubo de centrífuga de 2 mL usando um ferro de enrolamento elétrico (ver Tabela de Materiais). Use esse tubo de centrífuga para manter uma larva de escavadeira O . e sua massa de provisão.</li>
</ol>2. Preparação de pesticidas
<ol><li>Dissolva o pesticida de grau técnico (ver Tabela de Materiais) em acetona para adquirir soluções de estoque de 1 x 104 μg a.i. mL-1. Em seguida, realize diluições gradientes da solução para mais de cinco concentrações. NOTA: Foram utilizados neste estudo os clorpirifos a 0,1, 0,2, 0,4, 0,8, 1,6, 3,2, 6,4 μg a.i. mL-1 .</li>
</ol>3. Elaboração das disposições
<ol><li>Adquira tubos de abelhas plásticas contendo provisões (ver Tabela de Materiais) e larvas recém-eclodidas de O. excavata de um programa de criação em massa. NOTA: Não foram utilizados pesticidas a partir de 20 dias antes da floração para todo o período de floração; os resultados da análise química mostraram que os conteúdos de pesticidas comumente utilizados em 50 provisões selecionadas aleatoriamente estavam ambos abaixo dos níveis mínimos de teste.</li>
	<li>As provisões separadas e as larvas utilizam suavemente uma escova macia. Selecione larvas femininas com base no tamanho da provisão e posição celular dentro do ninho9. Em seguida, coloque provisões de tamanho uniforme e larvas femininas selecionadas em placas de Petri (60 mm de diâmetro) e reserve-as para uso. NOTA: Cinquenta disposições foram selecionadas aleatoriamente para analisar o conteúdo de pesticidas comumente utilizados: clorpirifos, imidacloprido, fendifenuron, phoxim, avermectina. Os parâmetros da escova macia têm (a) diâmetro da escova: 0,3 mm, (b) comprimento da escova: 2 cm, (c) comprimento da caneta: 18 cm.</li>
</ol>4. Tratamento de provisão com pesticida
<ol><li>Mergulhe as provisões de tamanho uniforme selecionadas (a partir da etapa 3.2) em pesticida diluído (a partir da etapa 2.1; clororpirifos em 0,1, 0,2, 0,4, 0,8, 1,6, 3,2, 6,4 μg a.i. mL-1) para 10 s utilizando uma gaiola. Mergulhe a verificação de controle (CK) em solvente de 0,2% (acetona neste estudo). NOTA: Há três réplicas por tratamento de concentração, e cada réplica consistia em 60 provisões. A diferença de dosagem de cada provisão pode ser reduzida selecionando provisões de tamanho uniforme.</li>
	<li>Meça o volume da solução de pesticidas antes e depois de tratar as provisões com o pesticida. Em seguida, calcule o volume imerso de inseticida em cada tratamento, incluindo 60 provisões de massa (Tabela Suplementar 1). Coloque as provisões em tubos centrífugas separados com orifícios (a partir da etapa 1.1) após a secagem de ar em uma mesa de trabalho estéril. NOTA: Antes do experimento, coloque as gaiolas contendo as provisões na solução de pesticidas e, em seguida, meça o volume da solução de pesticidas antes e depois de imersão para eliminar o erro.</li>
	<li>Transfira larvas femininas individualmente para a superfície de provisões naturalmente secas usando uma escova macia. NOTA: Uma larva em um tubo.</li>
</ol>5. Condições de crescimento
<ol><li>Criar as larvas de O. escavar em uma câmara de crescimento no escuro, 65%-75% de umidade relativa, e 25 ± 2 °C16.</li>
</ol>6. Exame dos resultados
<ol><li>O teste de toxicidade letal aguda<ol>
<li>Meça a mortalidade das larvas após colocá-las no tratamento e nas provisões de controle (CK) por 48 h. NOTA: Os critérios de morte: quando as larvas não responderam ao toque leve usando uma escova macia sob as lâmpadas de luz preta22. Lâmpadas de luz preta foram utilizadas para simular as condições de crescimento escuro das larvas e evitar a influência da luz sobre as larvas ao verificar indicadores de crescimento. Para a eliminação do erro humano, também foram mensuradas as mortes com e sem remoção de larvas das disposições após 48h em grupos de controle.</li>
		<li>Pesar 60 provisões antes e depois de 48 horas de ensaios de criação de insetos para determinar a quantidade de provisão consumida por cada larva.</li>
		<li>Calcule a dose de pesticida em cada concentração consumida por cada larva de acordo com a porcentagem de provisão consumida e o teor de pesticidas em cada provisão. NOTA: A equação para cálculo da dose é23: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62946/62946eq01.jpg"> onde, D é a dose consumida de pesticida por cada larva; W1 é o peso de 60 provisões antes da infusão de pesticidas; W2 é o peso restante de 60 provisões após 48 h; V1 é o volume de pesticidas antes da imersão para 60 provisões; V2 é o volume de pesticidas após a imersão para 60 provisões; C é a concentração do pesticida.</li>
	</ol>
</li>
	<li>O teste de toxicidade subletal<ol>
<li>Pesar as larvas antes de criar testes e depois de 14 dias de tratamentos para determinar o ganho de peso larval.</li>
		<li>Observe O. escavar diariamente durante o casulo sob lâmpadas de luz negra para medir a duração do desenvolvimento larval.</li>
		<li>Pesar as demais porções de provisões após 14 dias de alimentação em provisões tratadas e ck para calcular o consumo e a eficiência da conversão de alimentos ingeridos (ECI)24.</li>
		<li>Examine o número de eclosões cortando os casulos usando uma pequena tesoura quando as abelhas de controle emergem em adultos.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Sgolastra, F., Tosi, S., Medrzycki, P., Porrini, C., Burgio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+of+spirotetramat+on+solitary+bee+larvae%2C+Osmia+cornuta+%28hymenoptera%3A+megachilidae%29%2C+in+laboratory+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Apicultural+Science%22%5BJournal%5D)">Toxicity of spirotetramat on solitary bee larvae, Osmia cornuta (hymenoptera: megachilidae), in laboratory conditions.</a> Journal of Apicultural Science. 59 (2), 73-83 (2015).</li>
<li>Wei, S. G., Wang, R., Smirle, M. J., Xu, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Release+of+Osmia+excavata+and+Osmia+jacoti+%28Hymenoptera%3A+Megachilidae%29+for+apple+pollination%5BTitle%5D)+AND+%22TheCanadian+Entomologist%22%5BJournal%5D)">Release of Osmia excavata and Osmia jacoti (Hymenoptera: Megachilidae) for apple pollination.</a> TheCanadian Entomologist. 134 (3), 369-380 (2002).</li>
<li>Men, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+characteristics+and+pollination+service+of+Mason+bee%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Biological characteristics and pollination service of Mason bee.</a> Chinese Journal of Applied Entomology. 55 (6), 973-983 (2018).</li>
<li>Bosch, J., Kemp, W. P., Trostle, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bee+population+returns+and+cherry+yields+in+an+orchard+pollinated+with+Osmia+lignaria+%28Hymenoptera%3A+Megachilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Bee population returns and cherry yields in an orchard pollinated with Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae).</a> Journal of Economic Entomology. 99 (2), 408-413 (2006).</li>
<li>Winfree, R., Williams, N. M., Dushoff, J., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Native+bees+provide+insurance+against+ongoing+honey+bee+losses%5BTitle%5D)+AND+%22Ecology+Letters%22%5BJournal%5D)">Native bees provide insurance against ongoing honey bee losses.</a> Ecology Letters. 10 (11), 1105-1113 (2007).</li>
<li>Garibaldi, L. A., Steffan-Dewenter, I., Winfree, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wild+pollinators+enhance+fruit+set+of+crops+regardless+of+honey+bee+abundance%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Wild pollinators enhance fruit set of crops regardless of honey bee abundance.</a> Science. 339 (6127), 1608-1611 (2013).</li>
<li>Bosch, J., Sgolastra, F., Kemp, W. P. Life cycle ecophysiology of Osmia. mason bees used as crop pollinators. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBosch%2C+J+%22Bee+Pollination+in+Agricultural+Ecosystems%22">Bee Pollination in Agricultural Ecosystems</a>. James, R. R., Pitts-Singer, T. L. , Oxford University Press. Oxford, UK. 83-104 (2008).</li>
<li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population+investigation+and+restriction+factors+analyses+of+Osmia+excavata+Alfken+in+Jiaodong%5BTitle%5D)+AND+%22Apiculture+of+China%22%5BJournal%5D)">Population investigation and restriction factors analyses of Osmia excavata Alfken in Jiaodong.</a> Apiculture of China. 69 (9), 68-71 (2018).</li>
<li>Biesmeijer, J. C., Roberts, S. P. M., Reemer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+declines+in+pollinators+and+insect-pollinated+plants+in+Britain+and+the+Netherlands%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Parallel declines in pollinators and insect-pollinated plants in Britain and the Netherlands.</a> Science. 313 (5785), 351-354 (2006).</li>
<li>Potts, S. G., Biesmeijer, J. C., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+pollinator+declines%3A+trends%2C+impacts+and+drivers%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Ecology+%26+Evolution%22%5BJournal%5D)">Global pollinator declines: trends, impacts and drivers.</a> Trends in Ecology & Evolution. 25 (6), 345-353 (2010).</li>
<li>Chen, L., Yan, Q., Zhang, J., Yuan, S., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Joint+toxicity+of+acetamiprid+and+co-applied+pesticide+adjuvants+on+honeybees+under+semi-field+and+laboratory+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Joint toxicity of acetamiprid and co-applied pesticide adjuvants on honeybees under semi-field and laboratory conditions.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 38 (9), 1940-1946 (2019).</li>
<li>Sgolastra, F., Medrzycki, P., Bortolotti, L., Renzi, M. T., Bosch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+mortality+between+a+neonicotinoid+insecticide+and+an+ergosterol-biosynthesis-inhibiting+fungicide+in+three+bee+species%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Management+Science%22%5BJournal%5D)">Synergistic mortality between a neonicotinoid insecticide and an ergosterol-biosynthesis-inhibiting fungicide in three bee species.</a> Pest Management Science. 73 (6), 1236-1243 (2017).</li>
<li>Bireley, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preface%3A+Workshop+on+pesticide+exposure+assessment+paradigm+for+non-Apis+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Preface: Workshop on pesticide exposure assessment paradigm for non-Apis bees.</a> Environmental Entomology. 48 (1), 1-3 (2019).</li>
<li>European Food Safety Authority. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EFSA+Guidance+Document+on+the+risk+assessment+of+plant+protection+products+on+bees+%28Apis+mellifera%2C+Bombus+spp.+and+solitary+bees%29%5BTitle%5D)+AND+%22EFSA+Journal%22%5BJournal%5D)">EFSA Guidance Document on the risk assessment of plant protection products on bees (Apis mellifera, Bombus spp. and solitary bees).</a> EFSA Journal. 11 (7), 3295(2013).</li>
<li>Rundlof, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seed+coating+with+a+neonicotinoid+insecticide+negatively+affects+wild+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Seed coating with a neonicotinoid insecticide negatively affects wild bees.</a> Nature. 521 (7550), 77-80 (2015).</li>
<li>Yuan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+and+hazard+assessment+of+six+neonicotinoid+insecticides+on+Osmia+excavata+%28hymenoptera%3Amegachilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Entomologica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Toxicity and hazard assessment of six neonicotinoid insecticides on Osmia excavata (hymenoptera:megachilidae).</a> Acta Entomologica Sinica. 61 (8), 950-956 (2018).</li>
<li>Lin, Z., Meng, F., Zheng, H., Zhou, T., Hu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+neonicotinoid+insecticides+on+honeybee+health%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Entomologica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Effects of neonicotinoid insecticides on honeybee health.</a> Acta Entomologica Sinica. 57 (5), 607-615 (2014).</li>
<li>Gradish, A. E., Scott-Dupree, C. D., Cutler, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Susceptibility+of+Megachile+rotundata+to+insecticides+used+in+wild+blueberry+production+in+Atlantic+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Susceptibility of Megachile rotundata to insecticides used in wild blueberry production in Atlantic Canada.</a> Journal of Pest Science. 85, 133-140 (2012).</li>
<li>Hodgson, E. W., Pitts-Singer, T. L., Barbour, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+the+insect+growth+regulator%2C+novaluron+on+immature+alfalfa+leafcutting+bees%2C+Megachile+rotundata%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Science%22%5BJournal%5D)">Effects of the insect growth regulator, novaluron on immature alfalfa leafcutting bees, Megachile rotundata.</a> Journal of Insect Science. 11, 43(2011).</li>
<li>Konrad, R., Ferry, N., Gatehouse, A. M. R., Babendreier, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+effects+of+oilseed+rape+expressing+oryzacystatin-1+%28OC-1%29+and+of+purified+insecticidal+proteins+on+larvae+of+the+solitary+bee+Osmia+bicornis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Potential effects of oilseed rape expressing oryzacystatin-1 (OC-1) and of purified insecticidal proteins on larvae of the solitary bee Osmia bicornis.</a> PLoS ONE. 3 (7), 2664(2008).</li>
<li>Abbott, V. A., Nadeau, J. L., Higo, H. A., Winston, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lethal+and+sublethal+effects+of+imidacloprid+on+Osmia+lignaria+and+clothianidin+on+Megachile+rotundata+%28Hymenoptera%3A+megachilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Lethal and sublethal effects of imidacloprid on Osmia lignaria and clothianidin on Megachile rotundata (Hymenoptera: megachilidae).</a> Journal of Economic Entomology. 101, 784-796 (2008).</li>
<li>Yan, Z., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublethal+effect+of+abamectin+on+3rd+instar+larvae+of+Prodenia+litura%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Tropical+Crops%22%5BJournal%5D)">Sublethal effect of abamectin on 3rd instar larvae of Prodenia litura.</a> Chinese Journal of Tropical Crops. 32 (10), 1945-1950 (2011).</li>
<li>Song, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+ecotoxicity+of+insecticides+with+different+modes+of+action+to+Osmia+excavata+%28Hymenoptera%3A+Megachilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicology+and+Environmental+Safety%22%5BJournal%5D)">Comparative ecotoxicity of insecticides with different modes of action to Osmia excavata (Hymenoptera: Megachilidae).</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 212 (5), 112015(2021).</li>
<li>Chen, F. J., Wu, G., Ge, F., Parajulee, M. N., Shrestha, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+elevated+CO2+and+transgenic+Bt+cotton+on+plant+chemistry%2C+performance%2C+and+feeding+of+an+insect+herbivore%2C+the+cotton+bollworm%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Experimentalis+Et+Applicata%22%5BJournal%5D)">Effects of elevated CO2 and transgenic Bt cotton on plant chemistry, performance, and feeding of an insect herbivore, the cotton bollworm.</a> Entomologia Experimentalis Et Applicata. 115 (2), 341-350 (2005).</li>
<li>Cang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+and+safety+evaluation+of+pesticides+commonly+used+in+strawberry+production+to+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Zhejiang+Agricultural+Sciences%22%5BJournal%5D)">Toxicity and safety evaluation of pesticides commonly used in strawberry production to bees.</a> Zhejiang Agricultural Sciences. (4), 785-787 (2009).</li>
<li>Cang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+toxicity+and+safety+assessment+of+chiral+fipronil+against+Apis+mellifera+and+Trichogramma+ostriniae%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicology%22%5BJournal%5D)">Acute toxicity and safety assessment of chiral fipronil against Apis mellifera and Trichogramma ostriniae.</a> Ecotoxicology. 7 (3), 326-330 (2012).</li>
<li>Liu, X., Pan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measures+to+ensure+pollination+effect+and+cocoon+recovery+rate+of+Osmia+excavata+in+apple+orchard%5BTitle%5D)+AND+%22Northwest+Horticulture%22%5BJournal%5D)">Measures to ensure pollination effect and cocoon recovery rate of Osmia excavata in apple orchard.</a> Northwest Horticulture. (3), 20-21 (2017).</li>
<li>Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublethal+concentrations+of+clothianidin+affect+honey+bee+colony+growth+and+hive+CO2+concentration%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony growth and hive CO2 concentration.</a> Scientific Reports. 11 (1), 4364(2021).</li>
<li>Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublethal+concentrations+of+clothianidin+affect+honey+bee+colony+behavior+and+interact+with+landscapes+to+affect+colony+growth%5BTitle%5D)+AND+%22BioRxiv%22%5BJournal%5D)">Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony behavior and interact with landscapes to affect colony growth.</a> BioRxiv. , (2020).</li>
<li>Wang, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+effects+of+three+neonicotinoid+pesticides+on+physiology+and+survival+of+honey+bees+%28Apis+mellifera+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Combination effects of three neonicotinoid pesticides on physiology and survival of honey bees (Apis mellifera L).</a> Journal of Environmental Entomology. 41 (3), 612-618 (2019).</li>
<li>Kopit, A. M., Pitts-Singer, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Routes+of+pesticide+exposure+in+solitary%2C+cavity-nesting+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Routes of pesticide exposure in solitary, cavity-nesting bees.</a> Environmental Entomology. 47 (3), 499-510 (2018).</li>
<li>Cheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+oral+toxicity+of+chlorpyrifos+and+imidacloprid+to+adult+honey+bees+%28Apis+mellifera+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+Journal+of+Ecotoxicology%22%5BJournal%5D)">Chronic oral toxicity of chlorpyrifos and imidacloprid to adult honey bees (Apis mellifera L).</a> Asian Journal of Ecotoxicology. 11 (2), 715-719 (2016).</li>
<li>Li, M., Ma, C., Xiao, L., Li, Z., Su, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+chlorpyrifos+on+behavior+response+of+Apis+mellifera+and+Apis+cerana%5BTitle%5D)+AND+%22Apicultural+Science+Association+of+China%22%5BJournal%5D)">Effects of chlorpyrifos on behavior response of Apis mellifera and Apis cerana.</a> Apicultural Science Association of China. , (2016).</li>
<li>Cresswell, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+meta-analysis+of+experiments+testing+the+effects+of+a+neonicotinoid+insecticide+%28imidacloprid%29+on+honey+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicology%22%5BJournal%5D)">A meta-analysis of experiments testing the effects of a neonicotinoid insecticide (imidacloprid) on honey bees.</a> Ecotoxicology. 20 (1), 149-157 (2011).</li>
<li>Nauen, R., Ebbinghaus-Kintscher, U., Schmuck, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+and+nicotinic+acetylcholine+receptor+interaction+of+imidacloprid+and+its+metabolites+in+Apis+mellifera+%28Hymenoptera%3B+Apidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Management+Science%22%5BJournal%5D)">Toxicity and nicotinic acetylcholine receptor interaction of imidacloprid and its metabolites in Apis mellifera (Hymenoptera; Apidae).</a> Pest Management Science. 57 (7), 577-586 (2001).</li>
<li>Colin, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+to+quantify+and+analyze+the+foraging+activity+of+honey+bees%3A+relevance+to+the+sublethal+effects+induced+by+systemic+insecticides%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Environmental+Contamination+and+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A method to quantify and analyze the foraging activity of honey bees: relevance to the sublethal effects induced by systemic insecticides.</a> Archives of Environmental Contamination and Toxicology. 47 (3), 387-395 (2004).</li>
<li>Decourtye, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+sublethal+toxicity+of+nine+pesticides+on+olfactory+learning+performances+of+the+honeybee+Apis+mellifera%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Environmental+Contamination+%26+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Comparative sublethal toxicity of nine pesticides on olfactory learning performances of the honeybee Apis mellifera.</a> Archives of Environmental Contamination & Toxicology. 48 (2), 242-250 (2005).</li>
<li>Williamson, S. M., Wright, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+multiple+cholinergic+pesticides+impairs+olfactory+learning+and+memory+in+honeybees%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Exposure to multiple cholinergic pesticides impairs olfactory learning and memory in honeybees.</a> Journal of Experimental Biology. 216 (10), 1799-1807 (2013).</li>
<li>Henry, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+common+pesticide+decreases+foraging+success+and+survival+in+honey+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A common pesticide decreases foraging success and survival in honey bees.</a> Science. 336 (6079), 348-350 (2012).</li>
<li>Matsumoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+in+homing+flights+in+the+honey+bee+Apis+mellifera+after+a+sublethal+dose+of+neonicotinoid+insecticides%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+Insectology%22%5BJournal%5D)">Reduction in homing flights in the honey bee Apis mellifera after a sublethal dose of neonicotinoid insecticides.</a> Bulletin of Insectology. 66 (1), 1-9 (2013).</li>
</ol>

Os autores não têm conflitos de interesse para declarar.

Para polinizadores adultos, existem dois métodos principais para medir a ecotoxicidade dos pesticidas. Um deles é o método de contato, no qual o pesticida é aplicado ao protórax dos insetos adultos; o outro é o método de toxicidade gástrica, no qual os polinizadores adultos são alimentados com água de mel contendo pesticida25,26. Nos últimos anos, verificou-se que o efeito de polinização e a taxa de eclosão de O. excavata são relativamente baixos<sup cla...

Os polinizadores desempenham um papel crítico nos serviços ecossistêmicos da agricultura global moderna. Enquanto abelhas (Apis mellifera; Hymenoptera: Apidae) têm sido tradicionalmente considerados como os polinizadores econômicos essenciais das culturas, pesquisas recentes sugerem que Osmia (Hymenoptera: Megachilidae) também é muito importante na melhoria da polinização para determinadas culturas, aumento do tamanho das frutas e número de sementes, e na redução da proporção de frutas assimétricas em pomares comerciais em diferentes partes do mundo1. A osmia excavata tem sido considerada uma espécie ideal para a polinização de maçãs, principalmente na Ásia, como no norte e noroeste da China e japão 2,3,4. Pode fornecer serviços de polinização para determinadas culturas com similar ou às vezes com maior eficiência. Nesse sentido, mostraram-se substituir ou trabalhar em sinergia com as abelhas 4,5,6.
As características biológicas de O. excavata são únicas em comparação com as abelhas sociais. Sua atividade univoltina, solitária e de aninhamento ocorre principalmente na primavera e início do verão. Os ninhos de O. excavata são geralmente encontrados em buracos pré-existentes, tipicamente em madeira morta, plantas ocas, tubos de palha e caule de bambu na condição natural3. A o. escavada adulta emerge de seu casulo para acasalar, coletar pólen e construir um ninho para colocar ovos, que começam a eclodir uma semana depois. Os óvulos fertilizados se desenvolvem em fêmeas, enquanto os óvulos não fertilizados se desenvolvem em machos3. As fêmeas são distribuídas na parte inferior do tubo de abelha, e as disposições correspondentes são mais significativas. Em contraste, os machos estavam nas proximidades da saída do tubo com provisões menores7, então os machos saem primeiro, e as fêmeas saem mais tarde. A fêmea mistura pólen com uma pequena quantidade de néctar em uma bolha úmida, a única fonte de alimento para cada larva na célula8.
Vários estudos têm relatado uma diminuição na população de insetos polinizadores 9,10. O uso extensivo de agrotóxicos tem sido identificado como um dos principais fatores para a redução da abundância e da diversidade de polinizadores e também pode colocar em risco os serviços de polinização11,12. Para reduzir e mitigar os efeitos adversos dos pesticidas, é necessário realizar uma avaliação do risco de pesticidas para polinizadores. Alguns países estabeleceram marcos regulatórios para garantir a segurança das abelhas dos pesticidas utilizados13,14. Estudos recentes mostraram que Osmia era mais suscetível a pesticidas do que as abelhas 1,15.
Curiosamente, a maioria das avaliações de risco foram focadas em abelhas adultas11,12; pouca pesquisa tem sido realizada em O. excavata, especialmente as larvas. Além disso, a mortalidade de Osmia diretamente causada por agrotóxicos é mais comumente considerada16. Ainda assim, as toxicidades crônicas como ganho de peso larval, duração do desenvolvimento, padrões de alimentação, capacidade de eclosão, comportamento adulto subsequente e fecundidade podem ter o mesmo dano que as toxicidades letais agudas e muitas vezes são ignoradas por causa da falta de um método experimental eficaz para as abelhas solitárias17.
Até agora, dois métodos são utilizados para avaliar os efeitos dos pesticidas nas larvas de abelhas solitárias: (1) foi aplicada uma quantidade adequada de pesticida no local localizado de provisões sem a remoção do ovo de abelhas solitárias 1,18,19,20; (2) substituição de provisões por misturas artificiais de pólen-néctar contendo uma quantidade específica de pesticida21. No entanto, existem algumas limitações para os dois métodos acima. O primeiro só pode medir a toxicidade aguda, mas não a toxicidade crônica porque as larvas ingeriram toda a dose em um curto período de tempo; este último levaria a uma alta taxa de mortalidade por causa da manipulação humana1. Aqui, o método de imersão foi descrito para estudar a ecotoxicidade dos pesticidas para o O. excavata sob condições de pesquisa altamente controladas, simulando o comportamento da alimentação larval em pesticidas residuais nas provisões no ambiente real. O método deste estudo resolve as desvantagens dos dois métodos acima e é adequado para medir os efeitos de uma substância perigosa na toxicidade aguda e crônica.

<table><tbody>Lâmpada de <tr><td>luz negra</td><td>Canamectina</td><td></td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Jinan Lvba Pesticide Co. Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Caixa de tubo centrífugo com 100 poços</td><td>Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubo centrífugo</td><td>Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd</td><td></td><td>2 mL; &nbsp; Servir como tubo de abelha</td></tr><tr><td>Ferro de solda elétrico</td><td>Kunshan Kaipai Hardware Electromechanical Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Balança eletrônica</td><td>Sartorius Scientific Instruments (Pequim) Co., Ltd</td><td>3137510295</td><td></td></tr><tr><td>Cilindro graduado</td><td>Anhui Weiss Experimental Equipment Co. Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Placas de Petri (60 mm de diâmetro)</td> <td>Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fornecimento de pólen</td><td>Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Escova macia</td><td>Wengang Wenhai fábrica de material</td><td></td><td></td>de pintura</tr><tr><td>Abelhas solitárias</td><td>Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

avaliando o efeito dos pesticidas nas larvas das abelhas solitárias

Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees

As avaliações atuais de risco ecológico de pesticidas em polinizadores têm considerado principalmente apenas condições laboratoriais. Para as larvas de abelhas solitárias, a ingestão de provisões contaminadas com pesticidas pode aumentar a taxa de mortalidade das larvas, diminuir a taxa de coleta e a população de abelhas solitárias adultas no próximo ano do ponto de vista demográfico. Mas há estudos limitados sobre os efeitos dos pesticidas nas larvas das abelhas solitárias. Portanto, compreender como os pesticidas influenciam as larvas das abelhas solitárias deve ser considerado parte integrante da avaliação do risco ecológico dos pesticidas. Este estudo apresenta um método para expor as larvas de abelhas solitárias, Osmia excavata, a doses letais ou subletais de pesticidas, rastreamento do ganho de peso larval, duração do desenvolvimento, capacidade de eclosão e conversão de eficiência de consumo alimentar de alimentos ingeridos. Para demonstrar a eficácia deste método, as larvas de O. excavata foram alimentadas com provisões contendo doses letais agudas e subletais de clorpirifos. Em seguida, foram investigados os índices acima das larvas tratadas. Essa técnica ajuda a prever e mitigar o risco de pesticidas para polinizadores.

O conteúdo de pesticidas comumente utilizados, clorpirifos, imidacloprido, fendifenuron, phoxim, avermectina em provisões foi inferior ao limite de quantificação (0,01-0,02 mg kg-1) no grupo controle; esses resultados excluíram a influência dos resíduos de pesticidas em cada tratamento. Avaliou-se a mortalidade com e sem a remoção de larvas das provisões após 48h em grupos de controle; os resultados não apresentaram diferenças significativas (Tabela 1), indicando um pequeno erro humano.
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O presente protocolo explica um método para alimentar provisões contaminadas por pesticidas às larvas das abelhas solitárias, Osmia escavada. O procedimento examina a ecotoxicidade do pesticida para as larvas das abelhas solitárias.

Avaliando o efeito dos pesticidas nas larvas das abelhas solitárias

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ...

Este protocolo pode ser usado para prever e mitigar os efeitos adversos dos pesticidas sobre abelhas solitárias. A principal vantagem dessa técnica é simular a alimentação larval em pesticidas residuais em provisões. A demonstração visual desse método é fundamental porque as características biológicas da Escavada de Osmia são únicas em comparação com as abelhas sociais, e pouca pesquisa tem sido realizada na O.excavata, especialmente na larva.Para preparar o tubo de alimentação, perfurar um orifício de 0,3 milímetros de diâmetro na tampa de um tubo de centrífuga de dois mililitros usando um ferro de enrolamento elétrico. Para preparar o pesticida, dissolva o pesticida de grau técnico em acetona para adquirir soluções de estoque de 10 miligramas por mililitro, em seguida, realizar diluições gradientes da solução para mais de cinco concentrações. Em seguida, adquira tubos de abelhas plásticas contendo provisões e larvas escavadas de Osmia recém-eclodidas de um programa de criação em massa.Usando uma escova macia, retire suavemente a larva das provisões, selecione as larvas femininas com base no tamanho da provisão e posição celular dentro do ninho, em seguida, coloque as provisões de

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Research

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Consórcios microbianos dentro bumble colmeias enriquecem e preservar o pólen para larvas de abelha. Usando o sequenciamento de próxima geração, juntamente com o laboratório e experiências no terreno, este manuscrito descreve protocolos usados para testar a hipótese de que resíduos do fungicida alteram o pólen microbiome e demografia de colônia, finalmente levando à colônia perda.

Técnicas empíricas, metagenômicas e computacionais iluminam os mecanismos pelos quais os fungicidas comprometem a saúde das abelhas

Apresentamos aqui   um método para alimentar pesticida alimentos contaminados se tanto a um indivíduo abelha do mel e uma colónia colmeia. O procedimento avalia o efeito pesticida em abelhas de mel individuais por alimentação in vivo de dieta da larva de base e também na condição natural da colónia colmeia.

Avaliando o efeito de substâncias químicas ambientais em Honey Bee Desenvolvimento do indivíduo para Colony Nível

Doses subletais de pesticidas podem afetar colônias nas maneiras que são difíceis de detectar usando métodos somente periódicos ou visuais. Métodos para medir a massa total de abelha adulta, ninhada e os recursos alimentares por pesagem urticária e partes da colmeia, fotografando quadros e instalação de sensores, são fornecidos. Análise de dados também é abordada.

Monitoramento de nível de colônia os efeitos da exposição de pesticidas subletais em mel de abelhas

Sprays de fungicida em plantas de floração podem expor abelhas solitárias para altas concentrações de resíduos do fungicida transmitidas pelo pólen. Usando experimentos baseados em laboratório, envolvendo-se em vitro-larvas de abelha criados, este estudo investiga os efeitos interativos de consumir pólen tratada com fungicida derivado de host e host não plantas.

In Vitro Criação de abelhas solitárias: uma ferramenta para avaliar os fatores de risco Larval

Este protocolo foi desenvolvido para aprimorar a compreensão de como os agrotóxicos afetam a reprodução das abelhas de mel (Apis mellifera),estabelecendo métodos para expor rainhas das abelhas e seus cuidadores de trabalhadores a agrotóxicos em um ambiente controlado e laboratorial e monitorando cuidadosamente suas respostas relevantes.

Avaliando o risco agroquímico para rainhas de abelhas de mel acasaladas

Este estudo teve como objetivo investigar a relação entre o momento da aplicação do pesticida e a atividade das abelhas, medida por bioacústica, na soja. A análise mostrou que a aplicação de pesticidas, independentemente do momento, não teve efeito sobre a atividade das abelhas, desfolhação ou produtividade. No entanto, a atividade das abelhas foi maior no final do dia e durante o pico de floração da soja.

Avaliação da repelência de uma combinação de inseticida e fungicida para abelhas usando bioacústica

flexibilidade conformacional desempenha um papel crucial na função da proteína. Aqui, nós descrevemos o uso de espectrometria de massa por ionização por electropulverização resolvida no tempo acoplado a troca de hidrogénio-deutério para sondar as rápidas mudanças estruturais que conduzem a função de proteínas ordenadas e desordenadas.

resolvida no tempo com ionização por electrospray Hidrogénio-deutério troca Espectrometria de Massa para estudar a estrutura e dinâmica das proteínas

Aqui descrevemos um protocolo simples para produzir rapidamente centenas de ágar de mídia de crescimento nematoide, placas de cultura de 96 poços, com números consistentes de Caenorhhabditis elegans por bem. Estas culturas são úteis para a seleção fenotípica de organismos toda. Nós focamos usando essas culturas para produtos químicos de tela para efeitos de pro-longevidade.

Um método simples para High Throughput Screening químico em Caenorhabditis Elegans

Agregação da proteína provoca estresse oxidativo celular. Este protocolo descreve um método para monitorar os Estados intracelulares de proteínas amiloidogénicos e o stress oxidativo associado a eles, usando citometria de fluxo. A abordagem é usada para estudar o comportamento de variantes do peptídeo β-amiloide solúveis e propensas a agregação.

Avaliação do impacto da agregação da proteína no estresse oxidativo celular na levedura

Toeprinting visa medir a capacidade de in vitro transcrito de RNA para formar complexos de iniciação de tradução com ribossomas sob uma variedade de condições. Este protocolo descreve um método para mamíferos RNA toeprinting e pode ser usado para estudar a tradução tanto cap-dependente e IRES-driven.

Análise de Toeprinting de formação do complexo iniciação tradução de mRNAs mamíferos

Aprenda a avaliar a ecotoxicidade de pesticidas em larvas de abelhas solitárias Osmia excavata usando simulação de alimentação contaminada. Este método ajuda a prevenir impactos prejudiciais às populações de polinizadores.

Avaliando o efeito dos pesticidas nas larvas das abelhas solitárias

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