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DOI: 10.3791/63160-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a method for the continuous and robust ex utero development of postimplantation mouse embryos for up to six days. The protocol allows for successful embryo culture from pregastrulation stages until advanced organogenesis.
Uma plataforma aprimorada para a cultura de embriões integrais permite o desenvolvimento contínuo e robusto do ex útero de embriões de camundongos pós-implantação por até seis dias, desde estágios de pré-estresculação até organogênese avançada. Neste protocolo, detalhamos o procedimento padrão para a cultura de embriões bem sucedida usando placas estáticas e sistemas de garrafas rotativas.
Este método será fundamental para a compreensão da gastrulação ao longo de uma formação em mamíferos. Permitindo experimentação em embriões vivos durante estágios embrionários que há muito tempo estão escondidos dentro do útero materno. Permite, continua o crescimento eficiente e adequado de embriões de camundongos fora do útero por um período prolongado de até 6 dias.
Dissecção rápida e adequada de embriões e pregastrulação da concentração e pressão do gás são os passos mais críticos para o crescimento bem sucedido do embrião. Para começar a cultivar embriões de camundongos de 7,5 dias ou mais avançados, ligue o rotador e a unidade de aquecimento do sistema de incubadora de cultura de rolo por pelo menos 1 hora antes das dissecções do embrião. Além disso, adicione água autoclave ao frasco de entrada de gás e ao tubo de ensaio de saída.
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