ACT1-CUP1 Assays Determine the Substrate-Specific Sensitivities of Spliceosomal Mutants in Budding Yeast

Clarisse van der Feltz

doi:10.3791/63232

Ensaios de ACT1-CUP1 determinam as sensibilidades específicas do substrato de mutantes spliceosso...

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ACT1-CUP1 Assays Determine the Substrate-Specific Sensitivities of Spliceosomal Mutants in Budding Yeast

Ensaios de ACT1-CUP1 determinam as sensibilidades específicas do substrato de mutantes spliceossomais em leveduras em brotamento

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07:31 min

June 30, 2022

DOI: 10.3791/63232-v

Clarisse van der Feltz¹

¹College of Arts and Sciences,Northwest University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

O ensaio ACT1-CUP1, um ensaio de crescimento de cobre, fornece uma leitura rápida do splicing de RNA mensageiro precursor (pré-mRNA) e do impacto que os fatores de splicing mutantes têm na função spliceossomal. Este estudo fornece um protocolo e destaca a personalização possível para abordar a questão do splicing de interesse.

O Ensaio ACT1-CUP1 pode identificar se uma mutação afeta o splicing de RNA pré-mensageiro e dar uma indicação de qual etapa de splicing é mais afetada. O ensaio ACT1-CUP1 liga a mutação do fator de splicing ao seu impacto no complexo processo de splicing. Ele utiliza a leitura simples do fenótipo de crescimento e tem uma ampla faixa de sensibilidade.

O uso eficiente do tempo é importante ao realizar um ensaio ACT1-CUP1. Comece com um ensaio de cinco a 10 cepas para minimizar as aberrações de crescimento induzidas pelo estresse. Demonstrando o processo estaremos eu e Isabelle Marasigan, pesquisadora de graduação do meu laboratório.

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