Proteômica por Espectrometria de Massas Guiada por Linhagem Celular no Embrião em Desenvolvimento (Rã)

Esta abordagem guiada por linhagens permite a análise proteômica de eventos importantes do desenvolvimento com resolução espacial e temporal dentro do embrião vertebrado, transmitindo informações que não seriam acessíveis através de medidas embrionárias inteiras. Esta abordagem pode ser prontamente estendida para estudar proteínas, metabólitos e transcritos de diferentes células embrionárias à medida que se diferenciam durante o desenvolvimento. Este método pode avançar nossa compreensão dos mecanismos moleculares que controlam o desenvolvimento normal e da doença, incluindo mecanismos de indução tecidual e comprometimento do destino celular durante o desenvolvimento inicial.

Use um laço de cabelo para guiar cada embrião em um poço e posicione-os suavemente de modo que a célula-alvo de interesse esteja no ângulo certo com a microagulha. Siga os mapas de destino do tecido xenopus laevis para identificar a célula precursora da linhagem de interesse. Use duas pinças afiadas para remover suavemente a membrana vitelínica ao redor do embrião.