Análise da dinâmica da microbiota fecal em camundongos propensos a lúpus usando um método de isolamento de DNA simples e econômico

O método de isolamento de DNA proposto pode servir para estudar a dinâmica da microbiota intestinal em modelos de camundongos com doenças autoimunes. Um método mais versátil, econômico e eficiente é proposto para obter DNA de amostras fecais que são comparáveis aos kits comercialmente disponíveis. Para começar, tire cada rato individualmente de sua gaiola, colete uma pelota fecal diretamente do ânus e armazene-a a menos 80 graus Celsius até ser processada.

Processe as amostras com pinças, tubos e luvas estéreis e limpos. Adicione um pellet congelado a um tubo de tampa de rosca pré-pesado de dois mililitros e registre o peso fecal em gramas, que deve estar entre 0,02 a 0,05 gramas por pellet fecal. Adicione ao pellet uma fina camada de contas de vidro de 0,1 milímetro, 500 microlitros de tampão de lise e 200 microlitros de dodecil sulfato de sódio a 20%.