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Identificação da Atividade Hemolítica e Fosfolipase em Extratos Brutos de Anêmonas do Mar por Bio...
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JoVE Journal Biochemistry
Identification of Hemolytic and Phospholipase Activity in Crude Extracts from Sea Anemones by Straightforward Bioassays

Identificação da Atividade Hemolítica e Fosfolipase em Extratos Brutos de Anêmonas do Mar por Bioensaões Simples

Full Text
3,350 Views
12:12 min
March 29, 2022

DOI: 10.3791/63630-v

Santos Ramírez-Carreto1, Sandra I. Salazar-García1, Giovanni Macías Martínez1, Claudia Rodríguez-Almazán1,2

1Instituto de Biotecnología,Universidad Nacional Autónoma de México, 2Departamento de Micro y Nanotecnologías,Instituto de Ciencias Aplicadas y Tecnología, Universidad Nacional Autónoma de México

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui, descrevemos um protocolo para obter extrato de veneno bruto da anêmona do mar e detectar sua atividade hemolítica e fosfolipase.

A interação com a toxina de anêmona do mar deve usar o menor número de organismos e protocolos eficientes para obter grande diversidade e abundância das toxinas e identificação rápida de uma toxina específica. Combinamos duas técnicas eficientes para preparar o extrato bruto com uma alta quantidade de proteína e descrever ensaios reprodutíveis, específicos, rápidos e baratos para identificar bases hemólise e fosfólicas no veneno de anêmona marinha. O método pode ser usado em quase qualquer exemplo que se desprendou para identificar um ou ambos os tipos de citolysinas.

A eficiência do método é alcançada cuidando dos tempos em cada etapa durante a preparação do extrato bruto. A chave para a hemólise é o manuseio cuidadoso do eritrócito para evitar a lise mecânica, e no ensaio de fosfólise, cuidando da temperatura na preparação da placa. Demonstrando o procedimento estarão o Dr. Santos Ramirez-Carreto, a bióloga Sandra Salazar Garcia e o biólogo Giovanni Macias Martinez do meu laboratório.

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