Name: Geração de esferoides de tecido por meio de um dispositivo semelhante a um selo impresso em 3D (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-10-06T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 39 s
Description: Aprenda a produzir esferoides de tecido homogêneos em larga escala usando um dispositivo impresso em 3D. Este método garante alta viabilidade celular e qualidade consistente para aplicações em engenharia de tecidos e desenvolvimento de fármacos.

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<ol><li>Laschke, M., Menger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life+is+3D%3A+Boosting+spheroid+function+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Life is 3D: Boosting spheroid function for tissue engineering.</a> Trends in Biotechnology. 35 (2), 133-144 (2017).</li>
<li>Mekhileri, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+3D+bioassembly+of+micro-tissues+for+biofabrication+of+hybrid+tissue+engineered+constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Automated 3D bioassembly of micro-tissues for biofabrication of hybrid tissue engineered constructs.</a> Biofabrication. 10 (2), 024103(2018).</li>
<li>Itoh, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffold-free+tubular+tissues+created+by+a+bio-3D+printer+undergo+remodeling+and+endothelialization+when+implanted+in+rat+aortae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Scaffold-free tubular tissues created by a bio-3D printer undergo remodeling and endothelialization when implanted in rat aortae.</a> PLoS One. 10 (12), 0145971(2015).</li>
<li>Kronemberger, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hypertrophic+cartilage+induction+influences+the+building-block+capacity+of+human+adipose+stem%2Fstromal+cell+spheroids+for+biofabrication%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">The hypertrophic cartilage induction influences the building-block capacity of human adipose stem/stromal cell spheroids for biofabrication.</a> Artificial Organs. 45 (10), 1208-1218 (2021).</li>
<li>Mironov, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+printing%3A+Tissue+spheroids+as+building+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Organ printing: Tissue spheroids as building blocks.</a> Biomaterials. 30 (12), 2164-2174 (2009).</li>
<li>Skardal, A., Shupe, T., Atala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid-on-a-chip+and+body-on-a-chip+systems+for+drug+screening+and+disease+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Discovery+Today%22%5BJournal%5D)">Organoid-on-a-chip and body-on-a-chip systems for drug screening and disease modeling.</a> Drug Discovery Today. 21 (9), 1399-1411 (2016).</li>
<li>Garcez, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zika+virus+impairs+growth+in+human+neurospheres+and+brain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Zika virus impairs growth in human neurospheres and brain organoids.</a> Science. 352 (6287), 816-818 (2016).</li>
<li>Charelli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologically+produced+silver+chloride+nanoparticles+from+B.+megaterium+modulate+interleukin+secretion+by+human+adipose+stem+cell+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotechnology%22%5BJournal%5D)">Biologically produced silver chloride nanoparticles from B. megaterium modulate interleukin secretion by human adipose stem cell spheroids.</a> Cytotechnology. 70 (6), 1655-1669 (2018).</li>
<li>Cui, X., Hartanto, Y., Zhang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+multicellular+spheroids+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Royal+Society+Interface%22%5BJournal%5D)">Advances in multicellular spheroids formation.</a> Journal of the Royal Society Interface. 14 (127), 20160877(2017).</li>
<li>Achilli, T., Meyer, J., Morgan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+formation%2C+use+and+understanding+of+multi-cellular+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Biological+Therapy%22%5BJournal%5D)">Advances in the formation, use and understanding of multi-cellular spheroids.</a> Expert Opinion on Biological Therapy. 12 (10), 1347-1360 (2012).</li>
<li>Rolver, M., Elingaard-Larsen, L., Pedersen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+cell+viability+and+death+in+3D+spheroid+cultures+of+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessing cell viability and death in 3D spheroid cultures of cancer cells.</a> Journal of Visualized Experiments. (148), e59714(2019).</li>
<li>Quan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photo-curing+3D+printing+technique+and+its+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Bioactive+Materials%22%5BJournal%5D)">Photo-curing 3D printing technique and its challenges.</a> Bioactive Materials. 5 (1), 110-115 (2020).</li>
<li>Rodriguez-Salvador, M., Perez-Benitez, B., Padilla-Aguirre, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discovering+the+latest+scientific+pathways+on+tissue+spheroids%3A+Opportunities+to+innovate%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Bioprinting%22%5BJournal%5D)">Discovering the latest scientific pathways on tissue spheroids: Opportunities to innovate.</a> International Journal of Bioprinting. 7 (1), 331(2021).</li>
<li>Baptista, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+stem+cells+spheroids+to+optimize+cell+colonization+in+scaffolds+for+cartilage+and+bone+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Adult stem cells spheroids to optimize cell colonization in scaffolds for cartilage and bone tissue engineering.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (5), 1285(2018).</li>
<li>Shakeri, A., Khan, S., Didar, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conventional+and+emerging+strategies+for+the+fabrication+and+functionalization+of+PDMS-based+microfluidic+devices%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Conventional and emerging strategies for the fabrication and functionalization of PDMS-based microfluidic devices.</a> Lab on a Chip. 21 (16), 3053-3075 (2021).</li>
<li>vander Valk, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+bovine+serum+%28FBS%29%3A+Past+-+present+-+future%5BTitle%5D)+AND+%22ALTEX%22%5BJournal%5D)">Fetal bovine serum (FBS): Past - present - future.</a> ALTEX. 35 (1), 99-118 (2018).</li>
<li>vander Valk, J., Brunner, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+chemically+defined+cell+culture+media+-+Replacing+fetal+bovine+serum+in+mammalian+in+vitro+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+in+Vitro%22%5BJournal%5D)">Optimization of chemically defined cell culture media - Replacing fetal bovine serum in mammalian in vitro methods.</a> Toxicology in Vitro. 24 (4), 1053-1063 (2010).</li>
<li>Smyrek, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((microtubules+and+FAK+dominate+different+spheroid+formation+phases+and+important+elements+of+tissue+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Open%22%5BJournal%5D)">microtubules and FAK dominate different spheroid formation phases and important elements of tissue integrity.</a> Biology Open. 8 (1), 037051(2018).</li>
<li>McMillen, P., Holley, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+cell-cell+and+cell-ECM+adhesion+in+vertebrate+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Integration of cell-cell and cell-ECM adhesion in vertebrate morphogenesis.</a> Current Opinion in Cell Biology. 36, 48-53 (2015).</li>
<li>Tung, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+3D+spheroid+culture+and+drug+testing+using+a+384+hanging+drop+array%5BTitle%5D)+AND+%22The+Analyst%22%5BJournal%5D)">High-throughput 3D spheroid culture and drug testing using a 384 hanging drop array.</a> The Analyst. 136 (3), 473-478 (2011).</li>
<li>Guo, X., Li, S., Ji, Q., Lian, R., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+viability+and+neural+differential+potential+in+poor+post-thaw+hADSCs+by+agarose+multi-well+dishes+and+spheroid+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Cell%22%5BJournal%5D)">Enhanced viability and neural differential potential in poor post-thaw hADSCs by agarose multi-well dishes and spheroid culture.</a> Human Cell. 28 (4), 175-189 (2015).</li>
<li>Andréa Dernowsek, J., Rezende, R., Lopes daSilva, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+information+technology+in+the+future+of+3D+biofabrication%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+3D+Printing+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">The role of information technology in the future of 3D biofabrication.</a> Journal of 3D Printing in Medicine. 1 (1), 63-74 (2017).</li>
<li>Garcez, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zika+virus+impairs+growth+in+human+neurospheres+and+brain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Zika virus impairs growth in human neurospheres and brain organoids.</a> Science. 352 (6287), 816-818 (2016).</li>
<li>Skardal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-tissue+interactions+in+an+integrated+three-tissue+organ-on-a-chip+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Multi-tissue interactions in an integrated three-tissue organ-on-a-chip platform.</a> Scientific Reports. 7, 8837(2017).</li>
<li>Armoiry, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+chondrocyte+implantation+with+chondrosphere+for+treating+articular+cartilage+defects+in+the+knee%3A+An+evidence+review+group+perspective+of+a+NICE+single+technology+appraisal%5BTitle%5D)+AND+%22PharmacoEconomics%22%5BJournal%5D)">Autologous chondrocyte implantation with chondrosphere for treating articular cartilage defects in the knee: An evidence review group perspective of a NICE single technology appraisal.</a> PharmacoEconomics. 37 (7), 879-886 (2018).</li>
<li>Nakamura, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bio-3D+printing+iPSC-derived+human+chondrocytes+for+articular+cartilage+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Bio-3D printing iPSC-derived human chondrocytes for articular cartilage regeneration.</a> Biofabrication. 13 (4), 044103(2021).</li>
<li>Mesquita, C., Charelli, L., Baptista, L., Naveira-Cotta, C., Balbino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous-mode+encapsulation+of+human+stem+cell+spheroids+using+droplet-based+glass-capillary+microfluidic+device+for+3D+bioprinting+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Engineering+Journal%22%5BJournal%5D)">Continuous-mode encapsulation of human stem cell spheroids using droplet-based glass-capillary microfluidic device for 3D bioprinting technology.</a> Biochemical Engineering Journal. 174, 108122(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Placa de 6 poços</td><td>Merck</td><td>CLS3516</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Promega</td><td>V3121</td><td></td></tr><tr><td>Biodevice&nbsp;</td>Armário de Segurança Biológica <td>Bioedtech</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>51029701</tr><tr><td>Centrífuga</td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>75004031</tr><tr><td>Tubos de centrífuga Corning 50 mL</td><td>Merck</td><td>CLS430829-500EA</td><td></td></tr><tr><td>Frascos de cultura de células Corning área de superfície 75 cm2</td><td>Merck</td><td>CLS430641</td><td></td></tr><tr><td>Draft Resin&nbsp;</td><td>FormLabs</td><td>FLDRBL01</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&prime; s Águia Modificada&prime; s Média - baixa glicose</td><td>Merck</td><td>D6046</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Soro Bovino (FBS)</td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>16000044</tr><tr><td>Form 2</td><td>FormLabs</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Incubadora</td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>51033782</tr><tr><td>Linhagens celulares L929</td><td>Estabelecidas em laboratório&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Penicilina e Estreptomicina (PS)</td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>15140122</tr> solução <tr><td>salina tamponada com fosfato (PBS)</td> <td>Merck</td><td>806552</td><td></td></tr><tr><td>tripsina com EDTA</td><td>Merck</td><td>T3924</td><td></td></tr></tbody></table>

geração de esferoides de tecido por meio de um dispositivo semelhante a um selo impresso em 3d

Generation of Tissue Spheroids via a 3D Printed Stamp-Like Device

Geração de microressecções homogêneas usando o dispositivo semelhante a um carimbo impresso em 3D O dispositivo semelhante a um selo impresso em 3D foi fabricado com sucesso pelo método de estereolitografia12 usando uma resina fotocurável (Figura 2A). O dispositivo final foi composto por micropinos cilíndricos com altura de 1,3 mm e largura de 650 μm (Figura 2A). Seu uso como molde mestre para produzir microrressecções...

Geração de esferoides de tecido por meio de um dispositivo semelhante a um selo impresso em 3D

Advances in 3D cell culture have developed more physiologically relevant in vitro models, such as tissue spheroids. Cells cultivated as spheroids have ...

generation-of-tissue-spheroids-via-a-3d-printed-stamp-like-device

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Nós descrevemos um método simples e rápida de gerar tecido 3D-como esferóides e sua potencial aplicação para quantificar as diferenças de interações célula-célula.

Uma simples gota de suspensão Protocolo Cultura de Células para a geração de esferóides 3D

Os esferoides são um tipo de modelo de cultura de células 3D usado para representar com mais precisão o ambiente de uma célula em comparação com os modelos de monocamada de cultura de células 2D. No protocolo de exemplo, veremos os cientistas gerarem esferóides a partir de uma linha de células de câncer colorretal e aplicarem imagens de células vivas para rastrear o crescimento dos esferoides.

Geração de esferóides a partir de linhagens celulares: um método de cultura celular tridimensional (3D)

Este vídeo demonstra a transformação de células-tronco pluripotentes humanas (hPSCs) em organoides cerebrais esféricos. Usando inibidores específicos, as hPSCs são guiadas para se diferenciar em direção a uma linhagem neuronal, formando colônias neuroectodérmicas. Fatores especiais de crescimento são então introduzidos, o que estimula a auto-organização e proliferação das colônias, levando à formação de organoides cerebrais esféricos.

Geração de esferoides a partir de células-tronco pluripotentes humanas

Este protocolo descreve a bioprinção 3D do tecido cardíaco sem o uso de biomateriais. Os remendos cardíacos bioprinted 3D apresentam integração mecânica de esferóides componentes e são altamente promissores na regeneração do tecido cardíaco e como modelos 3D de doenças cardíacas.

Criação de tecido cardíaco exibindo integração mecânica de esferóides usando 3D Bioprinting

Apresentamos um dispositivo microfluídico centrífuga movido a motor que pode cultivar esferóides celulares. Usando este dispositivo, esferóides de tipos de células únicas ou múltiplas podem ser facilmente coculturados condições de alta gravidade.

Plataforma lab-on-a-CD para geração de esferóides tridimensionais multicelulares

O protocolo descreve a geração de spheróides de alto rendimento para bioimpressão usando a análise multi-paramétrica de sua oxigenação e morte celular em um microscópio padrão de fluorescência. Essa abordagem pode ser aplicada para controlar a viabilidade dos esferoides e realizar a padronização, o que é importante na modelagem do tecido 3D, microambiente tumoral e biofabricação (micro)tecido bem sucedida.

Biofabricção assistida por microscopia de oxigênio acessível de esferoides multicelulares

Aqui, descrevemos a produção em larga escala de esferoides esferoides de células-tronco derivados de adiposos (ASC) usando um sistema automatizado de pipetização para semear a suspensão celular, garantindo assim a homogeneidade do tamanho e forma de spheroid. Estes esferoides ASC podem ser usados como blocos de construção para abordagens de bioimpressão 3D.

Produção automatizada em larga escala de esferoides de células-tronco derivados de adiposo para bioimpressão 3D

Este artigo demonstra um método padronizado para a construção de esferoides tumorais tridimensionais. Uma estratégia para observação esferoide e análise de aprendizagem profunda baseada em imagens usando um sistema de imagem automatizado também é descrita.

Geração de esferoides tumorais 3D para estudos de avaliação de fármacos

Este estudo apresenta uma metodologia econômica e eficiente para gerar estruturas celulares 3D usando um sistema baseado em carimbos para criar micropoços em moldes de agarose. O sistema promove a formação de esferóides/organoides uniformes, melhorando assim as interações celulares. Essa abordagem reduz a variabilidade experimental e oferece suporte a aplicações em testes de medicamentos e engenharia de tecidos.

Geração de esferoides/organoides tridimensionais a partir de culturas de células bidimensionais usando um novo dispositivo de carimbo

A prolina-prolina endopeptidase-1 (PPEP-1) é uma metaloprotease secretada e um alvo promissor do patógeno humano Clostridium difficile. Aqui descrevemos todos os métodos necessários para a produção e determinação da estrutura desta proteína.

Produção, cristalização e determinação da estrutura de<em&gt; C. difficile</em&gt; PPEP-1 via microdispersão e Zinco-SAD

Aprenda a produzir esferoides de tecido homogêneos em larga escala usando um dispositivo impresso em 3D. Este método garante alta viabilidade celular e qualidade consistente para aplicações em engenharia de tecidos e desenvolvimento de fármacos.

Geração de esferoides de tecido por meio de um dispositivo semelhante a um selo impresso em 3D

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