2 de junho de 2022
O presente protocolo descreve um dispositivo de teste de atrito que aplica deslizamento recíproco simultâneo e carga normal a dois contrafacetos biológicos de contato.
Tradicionalmente, usamos o testador para estudar tecidos não vivos para calcular coeficientes de atrito, mas estamos expandindo significativamente as capacidades do testador para testar tecidos vivos e avaliar interações biológicas. O dispositivo de teste de atrito fornece movimento de tradução recíproca e carga compressiva para superfícies de contato de explanações de tecido vivo. O dispositivo é modular, permitindo o teste de várias contrafaces biológicas.
O método poderia fornecer uma visão de como as forças de atrito afetam as respostas mecânicas e mequenicobiológicas da cartilagem viva e do sinovia, o que pode levar a novas estratégias de manutenção da saúde articular. Comece colhendo o sinovium bovino juvenil. Usando uma lâmina de bisturi, rastreie o contorno da região do sinolio de interesse.
Usando fórceps, segure uma extremidade do sinolário e levante suavemente para esticar o distal do sinolio até o osso subjacente. Use uma lâmina de bisturi para remover o sinolio do osso e coloque o tecido em mídia cultural apropriada ou teste a solução de banho. Em seguida, colide a cartilagem bovina juvenil, fixando a tíbia em um suporte ajustável.
Remova o menisco cuidadosamente, evitando contato com a superfície da cartilagem. Nas bordas externas do platô tibial, use um cortador de caixa para cortar perpendicularmente à cartilagem em direção ao osso. Corte completamente através da cartilagem para fazer bordas retas ou laterais.
Remova o excesso de tecido. Nas bordas externas, use o cortador de caixa para fazer um corte limpo na interface entre o osso e a cartilagem. Para remover a tira tibial da superfície do planalto, insira delicadamente uma chave de fenda plana abaixo do corte e gire suavemente para afrouxar a cartilagem articular do osso subcondral.
À medida que a amostra se solta, empurre lentamente a chave de fenda para a frente até que a tira da cartilagem se desprende do osso. Certifique-se de que a chave de fenda é empurrada em direção ao osso, não à cartilagem. Usando um cortador de caixa, corte a superfície do platô tibial para produzir amostras retangulares de tamanho e espessura desejados.
Coloque o tecido em meios de cultura apropriados ou testando a solução de banho. Se a tira tibial for usada como contraface inferior, remova a base magnética destacável e cole uma placa de Petri de 60 milímetros de diâmetro à superfície superior da base destacável. Com a placa de Petri colada no lugar, conecte a base destacada à base fixa e marque a placa de Petri para indicar uma direção deslizante.
Aplique uma pequena quantidade de cianoacrilato no centro do prato. Alinhe a tira tibial com a direção deslizante do palco. Pressione suavemente a tira da cartilagem sobre o prato.
Restaurar a base magnética removível à sua base fixa emparelhada no testador de atrito. Encha a placa de Petri com a solução desejada de banho de teste. Se o sinovia for usado como contraface superior, remova a placa de carregamento e a haste de suporte do testador de atrito.
Coloque o sinovia em cima da placa circular. Para proteger o sinovia, espalhe um o-ring sobre sua circunferência. Usando fórceps, puxe suavemente o sinolário para esticar o tecido esticado e plano sob o anel O.
Corte o excesso de tecido com uma tesoura cirúrgica. Restaure a placa de carregamento e a haste de suporte no testador de atrito. Ajuste a altura vertical da placa de carregamento de tal forma que o sinolio paire sobre a contraface inferior e esteja submerso no banho de teste.
Insira as amostras montadas no dispositivo de teste de atrito. Abra a compilação de dados analógicos MF DAQ. Inicialize o Load PID e a trigger Dynamic Caller Windows no programa.
Execute a compilação de dados analógicos MF DAQ e inicialize a janela PID de carga pressionando o botão Executar. Navegue até a guia Stepper na janela 'Chamada dinâmica do gatilho'. Especifique a aceleração, a velocidade e a distância do estágio de tradução nas caixas de entrada do usuário.
Para inserir a duração do teste, clique no botão Pasta Aberta no canto inferior direito da tabela Time State e selecione o caminho do arquivo Stepper Time Index. Em seguida, especifique novamente a duração do teste na guia Bobina de voz. Selecione o caminho do arquivo Índice de Bobina de Voz clicando no botão 'Pasta aberta' no canto inferior direito da tabela Estado de tempo e selecione o arquivo.
Isto deve ser realizado se a bobina de voz é usada ou não. Aplique a carga normal. Se usar pesos mortos, coloque pesos desejados nos rolamentos lineares acima da placa de carregamento.
Certifique-se de que a carga aplicada mais o peso da placa de carregamento e da haste de suporte não superem a capacidade de célula de carga. Selecione o caminho e o nome do arquivo para armazenamento de dados usando o botão Abrir pasta à direita da caixa Direito de Arquivo. Salve o arquivo com uma extensão txt.
Centralizar a contraface inferior por baixo do contra-rosto superior e definir isso como a posição zero X. Para fazer isso, execute a janela Trigger Dynamic Caller pressionando o botão Executar. Na guia Stepper clique no botão Home para mover o palco para a última posição zeX salva.
Se as contraface não estiverem alinhadas, mova o palco clicando nos botões verde esquerda e direita da seta. Quando o local desejado for alcançado, clique no botão zero para salvar a localização do estágio atual como a nova posição zero X. Pare a janela 'Chamada dinâmica do gatilho', clicando no botão Parar.
Uma vez centradas as contrafaces superior e inferior, inicie o teste de atrito das amostras iniciando o movimento cíclico do estágio. Uma vez que o palco se move, lentamente coloque o contra-rosto superior em contato com a parte inferior. Deixe o teste funcionar, coletando os dados de teste de atrito.
Após a duração desejada do teste, pare o teste pressionando o botão Stop e descarregando os espécimes levantando o contraface superior e movendo-o para fora do contato com o contraface inferior. Use o código personalizado para calcular o coeficiente de atrito e a histerese por ciclo. Certifique-se de que uma única pasta contenha todos os arquivos relevantes.
Abra a execução do ciclo de atrito. arquivo m. Clique no botão Executar no script.
Selecione o arquivo de dados bruto para analisar e o local de salvamento desejado. O coeficiente de atrito e as parcelas de histerese serão produzidos pelo MATLAB. Uma configuração de sinovial-na-cartilagem foi usada para testar explants bovinos juvenis onde o sinolio foi montado em uma placa de carregamento acrílico de 10 milímetros de diâmetro, de tal forma que a camada intimal estaria em contato com a cartilagem subjacente.
Uma tira tibial foi usada como contraface de cartilagem. Um coeficiente de atrito eficaz foi calculado a partir da média de FT dividido por FN ao longo de cada ciclo recíproco e, em seguida, plotado contra a duração do teste para produzir um coeficiente de atrito versus tempo parcela. Para cada teste, os valores do coeficiente de atrito foram mediados ao longo de todo o teste.
Em um banho de teste de PBS, os valores médios do coeficiente de atrito aumentaram à medida que o estresse de contato aumentava. Por outro lado, os valores médios do coeficiente de atrito permaneceram semelhantes à medida que o estresse de contato aumentava em um banho de fluido sinovial bovino. Lembre-se de começar a coletar dados de carga antes de colocar as superfícies em contato.
Isso garante que uma carga de tare adequada possa ser calculada. Os componentes do banho de tecido e lubrificante podem ser avaliados antes e depois dos testes para avaliar as alterações biológicas transmitidas por um determinado regime experimental.
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Este protocolo descreve um dispositivo de teste de atrito projetado para avaliar as interações entre tecidos biológicos vivos. O dispositivo aplica deslizamento recíproco simultâneo e carga normal a duas superfícies biológicas em contato, expandindo suas capacidades além de tecidos não vivos.
Quantitative friction testing of living synovium and cartilage explants addresses a critical gap in early musculoskeletal target validation by enabling direct measurement of biomechanical and mechanobiological responses under physiologic loading. This capability supports predictive confidence in joint health research and informs risk-adjusted advancement of disease-relevant models for osteoarthritis and related disorders. The modular bioreactor platform positions frictional force quantification as a reusable asset for portfolio-wide mechanistic de-risking and assay development.
This friction testing bioreactor integrates into the discovery-to-preclinical continuum by enabling hypothesis-driven biomechanical studies, assay development, and translational model validation for joint tissue research.