Name: Auto-nanoemulsificação de óleos saudáveis para aumentar a solubilidade de drogas lipofílicas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-07-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 18 s
Description: Aprenda a otimizar sistemas de auto-nanoemulsificação com óleos ricos em ômega-3 para aumentar a biodisponibilidade de fármacos lipofílicos. Este método utiliza óleo de peixe para manter o perfil lipídico saudável.

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Os autores agradecem ao Departamento de Farmácia da Universidade Quaid-i-Azam, Islamabad, Paquistão, por fornecer as instalações necessárias para concluir este estudo.

1. Triagem dos óleos, surfactantes e cosurfactantes
<ol><li>Triagem dos óleos, surfactantes e co-surfactantes quanto à solubilidade do medicamento<ol><li>Misture 100 mg de rosuvastatina separadamente em 1 mL de diferentes óleos ricos em ácidos graxos ômega-3 (óleo de peixe, azeite, óleo de gergelim e óleo de linhaça) e 1 mL de surfactantes e cosurfactantes (Tween 80, Capryol PGMC, PEG 400 e etanol) por vórtice por 5 min a uma velocidade fixa de 2.500 rpm. Em seguida, colocar em banho-maria agitada durante 48 h a 50 °C.</li>
		<li>Após agitar, deixe a mistura repousar por pelo menos 6 h em temperatura ambiente para que o medicamento não dissolvido seja precipitado. Tome 0,1 mL de sobrenadante usando uma micropipeta e dilua até 1 mL com metanol.</li>
		<li>Analisar com um espectrofotómetro UV-visível a 242 nm e calcular a concentração adicionando a absorção à equação linear da curva de calibração19,20. NOTA: Estabeleça a curva de calibração preparando uma solução estoque de 100 μg / mL e fazendo diluições seriadas de até 0,5 μg / mL. A absorbância é tomada para todas as diluições e um gráfico é traçado entre absorbância e concentração em uma planilha. A equação linear (y = mx + b) do gráfico é reorganizada de modo que o valor da absorbância (y) possa ser usado para calcular a concentração desconhecida (x) 19 , 20 .</li>
	</ol></li>
	<li>Triagem do surfactante e co-surfactantes para miscibilidade com óleo<ol><li>Misture o surfactante e o co-surfactante (Smix) na proporção de 3:1. Adicione Smix e óleo em diferentes proporções; misture e aqueça até 50 °C para garantir a homogeneização.</li>
		<li>Pegue 0,1 mL de cada mistura e dilua com 25 mL de água destilada em um tubo de ensaio de vidro.</li>
		<li>Inverta o tubo de ensaio; O número de inversões nas quais uma emulsão é formada representa a eficácia da emulsificação e a facilidade da emulsificação. Medir a transparência (T%) medindo a emulsão a 650 nm com um espectrofotómetro UV-visível utilizando água destilada como branco21.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Construção do diagrama de fases pseudo-ternário
<ol><li>Misture os surfactantes e os co-surfactantes em várias proporções de volume (1:0, 1:1, 1:2, 1:3,1:4 e 1:5) para formar misturas de surfactantes (Smix). Adicione óleo ao Smix em frascos separados em várias proporções de volume de 1: 1,1: 2,1: 3,1: 4,1: 5,1: 6,1: 7, 1: 8, 1: 9, 2: 8, 3: 7, 4: 6, 5: 5, 6: 4, 7: 3, 8: 2 e 9: 1 e misture por vórtice.</li>
	<li>Adicione óleo e misturas de Smix em um frasco de vidro de 10 mL e aqueça até 50 °C com agitação constante a 300 rpm para uma mistura ideal.</li>
	<li>Arrefecer a mistura a 37 °C e transferir 1 ml para um copo de água de 250 ml e adicionar gota a gota a água destilada pré-aquecida (37 °C) sob agitação suave a 50 rpm. Examine a dispersão visualmente e a mistura que forma uma nanoemulsão transparente azulada é considerada como SNEDDS21.</li>
	<li>Construa o gráfico pseudoternário em diferentes proporções Smix (Tabela Suplementar 1) por meio de software (por exemplo, Triplot).</li>
</ol>3. Otimização via software usando uma metodologia de superfície de resposta (RSM)
<ol><li>Selecione três variáveis independentes como óleo (A), surfactante (B) e co-surfactante, e execute o software para otimização e triagem. Em seguida, selecione o design flexível escolhendo 'NÃO' para uma seleção difícil de alterar.<ol><li>Observe o efeito desses fatores criticamente em variáveis dependentes, como tamanho de partícula (Y1, nm), potencial zeta (Y2, mV), tempo de emulsificação (Y3, s), bem como eficiência de aprisionamento (Y4, %) conforme mencionado na Tabela 2. NOTA: As execuções foram aumentadas até que os sinais de alerta desaparecessem e o próprio software selecionasse o design Box-Benhken para otimização.</li>
	</ol></li>
	<li>Selecione os valores mais altos e mais baixos como -1 identificando o valor mais baixo da variável, enquanto +1 representa o valor mais alto. O valor médio representava o valor médio. O projeto Box-Benhken sugeriu um total de 17 corridas com cinco pontos centrais como medida para reduzir o erro.</li>
	<li>Registre as respostas a ensaios individuais e ajuste aos modelos lineares, 2F1 e quadráticos para garantir o modelo mais adequado. Gere equações polinomiais e utilize para fazer a inferência com base na magnitude dos sinais numéricos correspondentes do coeficiente.</li>
	<li>Exiba dados de regressão polinomial como gráficos 3D. Avalie o modelo de dados mais bem ajustado comparando o valor ajustado de R2 e o valor previsto de R2 22. NOTA: Os critérios de seleção exigidos da formulação foram baseados em eficiência máxima de aprisionamento, menor tamanho de partícula, maior potencial zeta e período mínimo de emulsificação. Y = β0 + β1A + β2B + β3C + β12AB + β13AC + β23BC + β11A2 + β22B2 + β33C2 Eq. (1) Aqui, β0 apareceu como interceptação, Y como resposta, ad β1, β2 e β3 como coeficientes lineares. Β11, β22 e β33 como termos quadráticos e coeficientes quadrados, enquanto β12, β13 e β23 como coeficientes de interação. A, B e C foram empregadas como variáveis independentes que foram selecionadas a partir dos resultados do estudo preliminar.</li>
</ol>4. Caracterização
<ol><li>Estudos de estabilidade termodinâmica<ol><li>Armazene o SNEDDS diluído a 4 ° C em uma geladeira e transfira-o para uma incubadora a 50 ° C. Realize seis desses ciclos, sendo cada ciclo igual ou superior a 48 h.</li>
		<li>Examinar a formulação da separação de fases23.</li>
	</ol></li>
	<li>Teste de centrifugação<ol><li>Centrifugue o SNEDDS diluído por 30 min a 3.500 rpm a -4 °C.</li>
		<li>Examine o SNEDDS à temperatura ambiente para separação de fases ou sedimentação do medicamento24.</li>
	</ol></li>
	<li>Teste de dispersibilidade para eficácia de autoemulsificação<ol><li>Adicionar 1 ml da formulação gota a gota a 500 ml de água bidestilada mantida a 37 °C e 50 rpm. Observe o tempo em que uma emulsão homogênea clara é formada por inspeção visual.</li>
		<li>Realize uma avaliação visual de acordo com o seguinte sistema de classificação25. Grau 1: uma emulsão azulada clara com tempo de emulsificação <1 min Grau 2: uma emulsão branco-azulada com tempo de emulsificação <1 min Grau 3: aparência leitosa com tempo de emulsificação <2 min Grau 4: óleo de aparência cinza e branca no topo com tempo de emulsificação >2 min Grau 5: falha de emulsificação com gota de óleo maior no topo. NOTA: O tempo necessário para a emulsificação ou taxa de emulsificação é vital para a eficácia da emulsificação. O teste é realizado em um aparelho de dissolução USP tipo II.</li>
	</ol></li>
	<li>Robustez a diluições<ol><li>Dilua a formulação SNEDDS otimizada 50, 100 e 1.000 vezes com diferentes transportadores, como água destilada, HCl 0,1 N (pH 1,0) para imitar o pH gástrico e tampão fosfato (pH 6,8) para imitar o pH intestinal.</li>
		<li>Misture bem as misturas diluídas e reserve por 12 h.</li>
		<li>Examine visualmente as formulações para precipitação de medicamentos, separação de fases e qualquer outro problema de estabilidade 26,27.</li>
	</ol></li>
</ol>5. Estudos de dissolução in vitro
<ol><li>Realize a liberação do medicamento do SNEDDS e da suspensão pura do medicamento usando um banho de agitação com água mantido a 37 ° C e 50 rpm.</li>
	<li>Mergulhe as membranas de diálise na respectiva solução de meio por 24 horas antes do ensaio de dissolução do medicamento para obter boa integridade e ativação. Encha a suspensão do medicamento (em água) e SNEDDS equivalente a 10 mg de rosuvastatina na membrana de diálise; amarre e coloque em copos separados (50 mL).</li>
	<li>Colher 1 ml da amostra a intervalos específicos e encher o copo com meios frescos (1 ml) após cada amostra.</li>
	<li>Filtrar as amostras colhidas e analisar utilizando um espectrofotómetro UV-visível a 242 nm 21,28,29,30.</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

Este estudo foi projetado para explorar o potencial do óleo rico em ácidos graxos ômega-3, como óleo de peixe, óleo de gergelim, azeite de oliva e óleo de linhaça para atuar como transportadores de medicamentos. A auto-nanoemulsificação foi selecionada como uma técnica preferida para fabricar o sistema de entrega que carece de água, tornando-o mais estável do que os sistemas de emulsão clássicos32. Os óleos ricos em ácidos graxos ômega-3 são conhecidos por seus efeitos benéficos à saúde<sup class=...

Os lipídios têm sido usados há séculos para aumentar a absorção gastrointestinal de componentes insolúveis em água de alimentos e medicamentos1. As emulsões são as formulações mais utilizadas para uso oral, intravenoso (suplementação nutricional) e tópico2. Uma variedade de lipídios (gorduras e óleos) é usada na fabricação de emulsões farmacêuticas e sistemas de administração de medicamentos auto-nanoemulsificantes à base de lipídios (SNEDDS). As técnicas de autoemulsificação são amplamente adotadas nas ciências farmacêuticas para a administração transmucosa de medicamentos. Ao contrário das emulsões, os SNEDDS consistem em uma mistura de óleo e surfactante que se autoemulsifica em meio aquoso do estômago para formar gotículas de emulsão3. Eles podem carregar drogas lipofílicas na fase oleosa e evitar que se degradem no ambiente estomacal4. O SNEDDS demonstrou aumentar efetivamente a fração biodisponível de drogas lipofílicas (quatro a seis vezes), aumentando a solubilidade e a permeabilidade 5,6. A ausência de uma fase aquosa no SNEDDS oferece vantagens significativas em termos de facilidade de fabricação e estabilidade em comparação com emulsões que são dispersões metaestáveis propensas à degradação química7. Muitas combinações de excipientes lipídicos estão disponíveis comercialmente devido às suas características desejáveis 8,9.
Os distúrbios cardiovasculares são uma das principais causas de mortalidade em todo o mundo10 e a hiperlipidemia faz com que os vasos sanguíneos obstruam o fluxo sanguíneo devido ao espessamento dos vasos sanguíneos11. O aumento da ingestão de lipídios na dieta e um estilo de vida sedentário são os principais fatores de risco para o desenvolvimento de hiperlipidemia. Além disso, os lipídios também demonstraram danificar diretamente o miocárdio do coração, levando à insuficiência cardíaca não isquêmica12. A rosuvastatina é uma potente droga hipolipidêmica que pertence à classe das estatinas e inibe a síntese de colesterol, levando à redução dos níveis lipídicos para o tratamento da hiperlipidemia/dislipidemia13. A rosuvastatina é um sistema de classificação biofarmacêutica (BCS) classe II com baixa solubilidade aquosa (0,01796 mg/mL)14. Avanços recentes na pesquisa farmacêutica reconheceram que os lipídios usados na administração de medicamentos podem perturbar o perfil lipídico dos pacientes. O papel das emulsões no aumento das lipoproteínas de baixa e alta densidade e do colesterol livre foi demonstrado no final do século XX15. Além disso, os sistemas de administração de medicamentos à base de lipídios demonstraram aumentar os triglicerídeos16 e outros metabólitos lipídicos no sangue17. Portanto, há uma extrema necessidade de desenvolver formulações farmacêuticas de óleos que sejam incapazes de perturbar o perfil lipídico de pacientes cardiovasculares e hiperlipidêmicos.
O óleo de peixe é uma fonte rica em ácidos graxos ômega-3, como o ácido eicosapentaenóico e o ácido docosahexaenóico. O óleo de peixe mostrou muitos efeitos na saúde com evidências substanciais de seu papel benéfico nos sistemas cardiovascular e nervoso18. O objetivo do estudo foi utilizar o óleo de peixe como alternativa aos óleos convencionais para formular SNEDDS para a administração de um medicamento lipofílico, a rosuvastatina. Nenhum estudo anterior empregou óleo de peixe como transportador para formular sistemas de administração de medicamentos. Parâmetros apropriados de formulação e processamento foram selecionados e a otimização foi realizada usando software especialista em design.

<table><tbody><tr><td>Acetato de amônio</td><td>Sigma-Aldrich, Alemanha</td><td>A1542</td><td>Grau analítico</td></tr><tr><td>Capryol PGMC</td><td>Gattefoss&eacute;, França</td><td>RT9P9S09QI</td><td></td></tr><tr><td>Software especializado em design de</td> grau analítico <td>StatEase, Estados Unidos</td><td>Versão 12.0.3.0</td><td>Software analítico (disponível gratuitamente para assinatura)</td></tr><tr><td>Tubo de diálise (12.000 Daltons MWCO)</td><td>Visking, Reino Unido</td><td>12000.02.30</td><td>Membranas de celulose natural regenerada pura com 12.000 Daltons MWCO</td></tr><tr><td>Aparelho de dissolução</td><td>Memmert, Alemanha</td><td>SV 1422</td><td>USP tipo II aparelho de dissolução</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Honeywell, Alemanha</td><td>24194</td><td>Óleo de peixe de grau analítico</td></tr><tr><td></td><td>Wilshire Labs Pvt (Ltd), Paquistão</td><td>não aplicável</td><td>Recebido como amostra de presente.</td></tr><tr><td>Ácido clorídrico</td><td>BDH Laboratories Ltd, Reino Unido</td><td>BDH3036-54L</td><td>Metanol de grau analítico</td></tr><tr><td></td><td>Honeywell, Alemanha</td><td>34966</td><td>Refrigerador de grau analítico</td></tr><tr><td>(farmacêutico)</td><td>Panasonic, Paquistão</td><td>MPR-161 DH-PE</td><td>Refrigerador para armazenamento a 4 &deg; C</td></tr><tr><td>Rosuvastatina cálcio</td><td>Searle Pharmaceuticals Pvt (Ltd) Paquistão</td><td>não aplicável</td><td>Recebido como amostra de presente.</td></tr><tr><td>Hidróxido de sódio</td><td>Honeywell, Alemanha</td><td>38215</td><td>Grau analítico</td></tr><tr><td>Span 80</td><td>BDH Laboratories Ltd, Reino Unido</td><td>MFCD00082107</td><td>Grau analítico</td></tr><tr><td>Software Triplot</td><td>Planilha MS Excel desenvolvida por Tod Thompson</td><td>Triplot Ver. 4.1.2</td><td>Software analítico (disponível gratuitamente)</td></tr><tr><td>Tween-80</td><td>Sigma-Aldrich, Alemanha</td><td>P1754-500ML</td><td>Grau analítico</td></tr><tr><td>Espectrofotômetro UV-Vis</td><td>Dynamica, Reino Unido</td><td>Espectrofotômetro de feixe duplo</td><td>Halo DB-20</td></tr><tr><td>Banho-maria</td><td>Memmert, Alemanha</td><td>WNB 7</td><td>Lote de água para aquecimento de até 70 > O</td></tr></tbody></table>

auto-nanoemulsificação de óleos saudáveis para aumentar a solubilidade de drogas lipofílicas

Self-Nanoemulsification of Healthy Oils to Enhance the Solubility of Lipophilic Drugs

A baixa solubilidade aquosa de muitos medicamentos reduz sua biodisponibilidade no sangue. Os óleos têm sido usados há séculos para aumentar a solubilidade dos medicamentos; no entanto, podem perturbar o perfil lipídico dos pacientes. Neste estudo, sistemas de liberação de medicamentos auto-nanoemulsificantes de óleos ricos em ácidos graxos ômega-3 são preparados e otimizados para a entrega de medicamentos lipofílicos. A rosuvastatina, uma potente droga hipolipidêmica, foi usada como droga lipofílica modelo. O óleo de peixe apresentou uma solubilidade mais de 7 vezes maior da rosuvastatina do que outros óleos e, portanto, foi selecionado para o desenvolvimento de sistemas de liberação de medicamentos auto-nanoemulsificantes (SNEDDS). Diferentes combinações de surfactantes e co-surfactantes foram selecionadas e uma mistura de surfactante de Tween 80 (surfactante) e Capryol PGMC (cosurfactante) foi selecionada para compatibilidade com óleo de peixe e rosuvastatina. Um diagrama de fase pseudoternário de óleo, surfactante e co-surfactante foi projetado para identificar a região da emulsão. O diagrama de fase pseudoternária previu uma mistura de óleo e surfactante de 1:3 como a proporção mais estável para o sistema de emulsão. Em seguida, uma metodologia de superfície de resposta (design Box-Behnken) foi aplicada para calcular a composição ótima. Após 17 ensaios, óleo de peixe, Tween 80 e Capryol PGMC nas proporções de 0,399, 0,67 e 0,17, respectivamente, foram selecionados como formulação otimizada. Os sistemas de liberação de fármacos auto-nanoemulsificantes mostraram excelente potencial de emulsificação, robustez, estabilidade e características de liberação de fármacos. Nos estudos de liberação do medicamento, o SNEDDS liberou 100% da carga útil em cerca de 6 h, enquanto a liberação do medicamento simples foi inferior a 70%, mesmo após 12 h. Portanto, os lipídios saudáveis ricos em ácidos graxos ômega-3 têm um enorme potencial para aumentar a solubilidade de drogas lipofílicas, enquanto a autoemulsificação pode ser usada como uma abordagem simples e viável para explorar esse potencial.

Aqui, a nanoformulação de óleo de peixe rico em ácidos graxos ômega-3 é preparada e otimizada por autoemulsificação com diferentes surfactantes e co-surfactantes. A Figura 1 mostra a solubilidade da rosuvastatina em diferentes óleos, surfactantes e co-surfactantes. Com base na solubilidade, o óleo de peixe foi selecionado como óleo, Tween 80 como surfactante e Capryol PGMC como co-surfactante nos estudos a seguir. A Tabela 1 mostra a triagem de Smix em diferentes proporções ...

Os óleos usados para aplicações de administração de medicamentos podem perturbar o perfil lipídico dos pacientes, o que é indesejável em doenças cardiovasculares. Os óleos ricos em ácidos graxos ômega-3 são uma alternativa saudável aos óleos convencionais e têm um enorme potencial para sistemas de administração de medicamentos autoemulsionados.

Auto-nanoemulsificação de óleos saudáveis para aumentar a solubilidade de drogas lipofílicas

The low aqueous solubility of many drugs reduces their bioavailability in the blood. Oils have been used for centuries to enhance the solubility of drugs; ...

Os óleos ricos em ácidos graxos ômega-3 podem aumentar a solubilidade dos medicamentos lipofílicos sem prejudicar o perfil lipídico. A otimização cuidadosa do óleo e dos excipientes é fundamental para a preparação de sistemas de administração de medicamentos auto-nanoemulsificantes. O óleo de peixe não atrapalha o perfil lipídico e possui efeitos benéficos próprios.A otimização acelera o processo de desenvolvimento de formulações, economiza recursos e garante estabilidade para a aplicação pretendida. As nanoformulações à base de óleo de peixe podem não apenas aumentar a biodisponibilidade sem perturbar o perfil lipídico, mas também podem sinergizar o efeito terapêutico da droga, conforme mostrado por muitos ensaios clínicos. Este estudo pode ser empregado para a otimização de diferentes sistemas ternários à base de óleo, como emulsões e SNEDDS, determinando as proporções de diferentes componentes da formulação e seu efeito nas características da formulação.As pistas iniciais das taxas iniciais podem ser retiradas da literatura publicada. Os pesquisadores devem ser claros sobre quais fatores podem afetar as características da formulação. Para começar, misture 100 miligramas de rosuv

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