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Uso de pinças ópticas duplas e microfluídicas para estudos de molécula única
Uso de pinças ópticas duplas e microfluídicas para estudos de molécula única
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JoVE Journal Biochemistry
Use of Dual Optical Tweezers and Microfluidics for Single-Molecule Studies

Uso de pinças ópticas duplas e microfluídicas para estudos de molécula única

Full Text
2,761 Views
06:53 min
November 18, 2022

DOI: 10.3791/64023-v

Piero R. Bianco1

1Department of Pharmaceutical Sciences, College of Pharmacy,University of Nebraska Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

A bioquímica visual de molécula única estudada através de câmaras microfluídicas é muito facilitada usando barril de vidro, seringas à prova de gás, conexões estáveis de tubos para células de fluxo e eliminação de bolhas colocando válvulas de comutação entre as seringas e a tubulação. O protocolo descreve armadilhas ópticas duplas que permitem a visualização de transações de DNA e interações intermoleculares.

A fixação de portas para acasalar em seringas com tubulação é crítica porque, quando é feita corretamente, não há vazamentos, não há bolhas na célula de fluxo e os experimentos podem ser feitos repetidamente usando a mesma célula de fluxo durante um período de um ano com uso cuidadoso. Aqui, dois métodos simples serão apresentados para anexar os conectores às células de fluxo. Estes são fáceis, são reprodutíveis e permitem que o investigador adapte facilmente a célula de fluxo às suas necessidades sem muitos problemas.

O uso dessas células de fluxo foi feito com experimentos de molécula única em mente. Em particular, o que chamamos de bioquímica visual, mas eles podem ser usados em qualquer estudo onde a microfluídica é necessária e em situações em que o fluxo de fluido laminal deve ser usado. Então, para evitar erros, em vez de usar células de fluxo valiosas para estabelecer as técnicas, sugiro praticar em uma lâmina de vidro ou uma folha de cobertura primeiro.

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