Name: Um Modelo de Aneurisma da Aorta Abdominal de Camundongo Induzido por Fosfato de Cálcio (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 14 s
Description: Aprenda a criar um modelo de aneurisma da aorta abdominal induzido por fosfato de cálcio em camundongos C57BL6J. Este método rápido e econômico permite estudar mecanismos moleculares e testar estratégias terapêuticas para AAA.

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Esta pesquisa foi apoiada pelo financiamento da Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (NSFC, 81730010, 91839302, 81921001, 31930056 e 91529203) e do Programa Nacional de P & D de Chaves da China (2019YFA 0801600).

Os estudos em animais foram realizados em conformidade com as diretrizes do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais do Centro de Ciências da Saúde da Universidade de Pequim e foram aprovados pelo Comitê de Ética Biomédica da Universidade de Pequim (LA2015142). Todos os camundongos para cirurgia foram anestesiados com isoflurano (1,5%-2%), e a anestesia foi cuidadosamente monitorada para evitar dor ou desconforto para os camundongos.
1. Preparação
<ol><li>Corte tiras de 0,3 cm de largura de luvas de borracha e gaze sem pó.</li>
	<li>Compre ratos machos C57BL/6J de 8-10 semanas de idade. Abrigar os animais em um ambiente climatizado com um ciclo claro-escuro de 12 horas e livre acesso a comida e água.</li>
	<li>Autoclave a gaze, cotonetes, tesouras e fórceps antes da cirurgia.</li>
	<li>Obtenha betadina, etanol a 70% e lavagem antisséptica das mãos.</li>
	<li>Coloque uma máscara, avental e luvas estéreis.</li>
</ol>2. Procedimento cirúrgico
<ol><li>Alimentar comprimidos de carprofeno mastigável (dose de 5 mg/kg) a um rato C57BL/6J de 8-10 semanas de idade 2-4 h antes da cirurgia. Em seguida, coloque o rato numa câmara de indução (206 mm x 210 mm x 140 mm) com isoflurano a um caudal de 1,5%-2%.<ol><li>Monitore o mouse por cerca de 5 minutos até que a respiração esteja visivelmente mais lenta. Certifique-se de que o rato não tem resposta à estimulação da dor antes da cirurgia.</li>
	</ol></li>
	<li>Aplique uma pomada oftálmica nos olhos e forneça suporte térmico com uma almofada de aquecimento ou cobertor. Confirme a profundidade da anestesia com uma pitada no dedo do pé a cada 15 minutos durante o procedimento cirúrgico.</li>
	<li>Raspe os pelos abdominais do rato usando um cortador elétrico ou creme de depilação. Esfregue e limpe a área raspada com betadine, seguida de etanol a 70%, várias vezes em movimento circular. Troque as luvas para manter a esterilidade.</li>
	<li>Use uma tesoura para fazer uma incisão de ~ 1,5 cm no abdômen inferior ao longo da linha média do abdômen.</li>
	<li>Use um cotonete estéril umedecido com solução salina normal para remover cuidadosamente o intestino até que a aorta infrarrenal esteja visível.</li>
	<li>Dissecar o tecido conjuntivo e a gordura da aorta infrarrenal por uma seção de aproximadamente 0,5 cm. Observe os pequenos vasos para o lado dorsal e evite rasgá-los. Não há necessidade de separar a aorta abdominal da veia principal abdominal.</li>
	<li>Embale um pedaço da tira de luva de borracha embebida em solução salina sob a aorta abdominal e a veia principal abdominal. Use um cotonete para limpar o excesso de líquido.</li>
	<li>Embale um pedaço de gaze embebido com CaCl2 0,5 M na adventícia da vasculatura abdominal infrarrenal por 10 min. Para o grupo de camundongos simulados, substitua o CaCl2 0,5 M por solução salina normal.</li>
	<li>Retire a gaze e embale outro pedaço de gaze embebido com solução de PBS por 5 min para gerar cristais de CaPO4 in situ na adventícia da aorta.</li>
	<li>Retire cuidadosamente a tira de luva de borracha e a gaze. Redefina o trato intestinal do rato.</li>
	<li>Suture a incisão abdominal e a pele com uma sutura 5-0.</li>
	<li>Coloque o rato numa almofada de aquecimento até que o rato recupere a consciência. Fornecer alojamento de recuperação da dor pós-cirúrgica e analgesia, de acordo com o comitê de ética animal local.</li>
	<li>Abrigue o mouse por mais 14 dias. Monitore o rato de perto após a cirurgia e observe pelo menos 1x todos os dias posteriormente. Realize uma necropsia imediatamente se algum rato morrer durante este período.</li>
</ol>3. Colheita para imagem de aortas
<ol><li>14 dias após a cirurgia, sacrifique os ratos usando CO2.</li>
	<li>Abra as cavidades torácica e abdominal do rato ventralmente e abra o átrio direito.</li>
	<li>Perfundir os camundongos com tampão PBS através do ventrículo esquerdo do coração para remover o sangue na aorta e, em seguida, perfundir com paraformaldeído a 4%, conforme descrito anteriormente8.</li>
	<li>Colha a aorta sob o estereoscópio.</li>
	<li>Colocar as aortas colhidas em tubos contendo 5 mL de paraformaldeído a 4% por 48 h.</li>
	<li>Remova o tecido adventício e a gordura cuidadosamente sob o estereoscópio e prenda a aorta em uma placa de cera preta com agulhas de insetos.</li>
	<li>Adquira imagens da aorta.</li>
</ol>4. Avaliação da degradação das fibras elásticas
<ol><li>Corte os tecidos do aneurisma da aorta em criosecções seriadas (7 μm de espessura).</li>
	<li>Analise as fibras elásticas usando um kit de coloração elástica comercial van Gieson (EVG) de acordo com o protocolo do fabricante.</li>
	<li>Classifique a degradação da elastina. Grau 1: <25% de degradação; grau 2: 25% a 50% de degradação; grau 3: 50% a 75% de degradação; ou grau 4: >75% de degradação.</li>
</ol>

<ol><li>Kent, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Abdominal aortic aneurysms.</a> The New England Journal of Medicine. 371, 2101-2108 (2014).</li>
<li>Patelis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+the+research+of+abdominal+aortic+aneurysms+development%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development.</a> Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).</li>
<li>Gertz, S. D., Kurgan, A., Eisenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneurysm+of+the+rabbit+common+carotid+artery+induced+by+periarterial+application+of+calcium-chloride+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Aneurysm of the rabbit common carotid artery induced by periarterial application of calcium-chloride in vivo.</a> Journal of Clinical Investigation. 81 (3), 649-656 (1988).</li>
<li>Yamanouchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+aneurysmal+dilation+associated+with+apoptosis+and+inflammation+in+a+newly+developed+calcium+phosphate+rodent+abdominal+aortic+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Accelerated aneurysmal dilation associated with apoptosis and inflammation in a newly developed calcium phosphate rodent abdominal aortic aneurysm model.</a> Journal of Vascular Surgery. 56 (2), 455-461 (2012).</li>
<li>Wang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+apolipoprotein+E%2C+age+and+aortic+site+on+calcium+phosphate+induced+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Influence of apolipoprotein E, age and aortic site on calcium phosphate induced abdominal aortic aneurysm in mice.</a> Atherosclerosis. 235 (1), 204-212 (2014).</li>
<li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unspliced+xbp1+confers+VSMC+homeostasis+and+prevents+aortic+aneurysm+formation+via+foxo4+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Unspliced xbp1 confers VSMC homeostasis and prevents aortic aneurysm formation via foxo4 interaction.</a> Circulation Research. 121 (12), 1331-1345 (2017).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+macrophage+TFEB-14-3-3+epsilon+interface+by+naringenin+inhibits+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Discovery%22%5BJournal%5D)">Targeting macrophage TFEB-14-3-3 epsilon interface by naringenin inhibits abdominal aortic aneurysm.</a> Cell Discovery. 8 (1), 21(2022).</li>
<li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564(2012).</li>
<li>Yu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CYLD+deubiquitinates+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+4+contributing+to+adventitial+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">CYLD deubiquitinates nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 contributing to adventitial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (8), 1698-1709 (2017).</li>
<li>Altobelli, E., Rapacchietta, L., Profeta, V. F., Fagnano, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+for+abdominal+aortic+aneurysm+in+population-based+studies%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Risk factors for abdominal aortic aneurysm in population-based studies: A systematic review and meta-analysis.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (12), 2805(2018).</li>
<li>Theivacumar, N. S., Stephenson, M. A., Mistry, H., Valenti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+mellitus+and+aortic+aneurysm+rupture%3A+A+favorable+association%5BTitle%5D)+AND+%22Vascular+and+Endovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Diabetes mellitus and aortic aneurysm rupture: A favorable association.</a> Vascular and Endovascular Surgery. 48 (1), 45-50 (2014).</li>
<li>Tanaka, T., Takei, Y., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+suppresses+calcium+phosphate-induced+aneurysm+formation+through+inhibition+of+macrophage+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia suppresses calcium phosphate-induced aneurysm formation through inhibition of macrophage activation.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (3), 003062(2016).</li>
<li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53191(2015).</li>
<li>Urry, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutral+sites+for+calcium+ion+binding+to+elastin+and+collagen%3A+A+charge+neutralization+theory+for+calcification+and+its+relationship+to+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Neutral sites for calcium ion binding to elastin and collagen: A charge neutralization theory for calcification and its relationship to atherosclerosis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 68 (4), 810-814 (1971).</li>
<li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Runx2+%28runt-related+transcription+factor+2%29-mediated+microcalcification+is+a+novel+pathological+characteristic+and+potential+mediator+of+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Runx2 (runt-related transcription factor 2)-mediated microcalcification is a novel pathological characteristic and potential mediator of abdominal aortic aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 40 (5), 1352-1369 (2020).</li>
<li>Kelly, M. J., Igari, K., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoclast-like+cells+in+aneurysmal+disease+exhibit+an+enhanced+proteolytic+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Osteoclast-like cells in aneurysmal disease exhibit an enhanced proteolytic phenotype.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), 4689(2019).</li>
</ol>

A aplicação periaórtica de CaPO4 é uma abordagem robusta para induzir AAA em camundongos. Vários estudos têm utilizado o modelo CaPO4 e consistentemente relatado que este é um método rápido e reprodutível para estudar AAA em camundongos 7,9. Este modelo é considerado para recapitular parte das características do aneurisma da aorta humana e fornecer insights mecanicistas sobre a patogênese AAA, incluindo inflamação e degradação da matriz extr...

Um aneurisma da aorta abdominal (AAA) é uma doença cardiovascular letal caracterizada por dilatação permanente da aorta abdominal, com altas taxas de mortalidade uma vez que ocorre a ruptura. O AAA está associado ao envelhecimento, tabagismo, sexo masculino, hipertensão arterial e hiperlipidemia1. Vários processos patológicos demonstraram contribuir para a formação de AAA, incluindo proteólise de fibra de matriz extracelular, infiltração de células imunes e perda de células musculares lisas vasculares. Atualmente, os mecanismos patológicos do AAA permanecem elusivos, e não há medicamentos comprovados para o tratamento do AAA1. A pesquisa em AAA humano é limitada devido à existência de poucas amostras de aorta humana; assim, vários modelos de AAA animal induzidos por modificação química foram estabelecidos e amplamente adotados, incluindo infusão subcutânea de angiotensina II (AngII), incubação de elastase perivascular ou intraluminal e aplicação de fosfato de cálcio perivascular2. Um modelo de camundongo comumente utilizado é a aplicação de fosfato de cálcio (CaPO4) na adventícia da aorta abdominal infrarrenal, que é custo-efetiva e não requer modificação genética.
A aplicação direta de CaCl2 na artéria carótida de coelhos para induzir alteração aneurismática foi inicialmente relatada por Gertz et al.3 e posteriormente aplicada nas aortas abdominais de camundongos. O modelo foi desenvolvido por Yamanouchi et al. para acelerar a dilatação da aorta utilizando cristais CaPO 4 em camundongos4. A infiltração de CaPO4 em aortas de camundongos recapitula muitas características patológicas observadas em AAAs humanos, incluindo infiltração profunda de macrófagos, degradação da matriz extracelular e deposição de cálcio. Os fatores de risco do AAA humano, como a hiperlipidemia, também aumentam o AAA induzido por CaPO4 em camundongos5. Em contraste com o AAA induzido por perfusão AngII em camundongos ApoE-/- ou LDLR-/-, o AAA induzido por CaPO 4 ocorre na região aórtica infrarrenal, que imita o AAA humano. Atualmente, esse método tem sido amplamente aplicado para avaliar a suscetibilidade ao desenvolvimento de AAA em camundongos geneticamente modificados e avaliar os efeitos anti-AAA de fármacos 6,7.

<table><tbody><tr><td>CaCl2</td><td>MECKLIN</td><td>C805225</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Biomed</td><td>SH5001-01</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>HARVEYBIO</td><td>MB5051</td><td></td></tr><tr><td>Ventilador para animais de pequeno porte</td><td>RWD</td><td>H1550501-012</td><td></td></tr></tbody></table>

um modelo de aneurisma da aorta abdominal de camundongo induzido por fosfato de cálcio

A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model

Um aneurisma da aorta abdominal (AAA) é uma doença cardiovascular com risco de vida que ocorre em todo o mundo e é caracterizada por dilatação irreversível da aorta abdominal. Atualmente, vários modelos de AAA murino quimicamente induzidos são usados, cada um simulando um aspecto diferente da patogênese do AAA. O modelo AAA induzido por fosfato de cálcio é um modelo rápido e custo-efetivo em comparação com os modelos AAA induzidos por angiotensina II e elastase. A aplicação de cristais de CaPO4 na aorta do rato resulta em degradação de fibras elásticas, perda de células musculares lisas, inflamação e deposição de cálcio associada à dilatação da aorta. Este artigo apresenta um protocolo padrão para o modelo AAA induzido por CaPO4. O protocolo inclui o preparo do material, a aplicação cirúrgica do CaPO4 na adventícia da aorta abdominal infrarrenal, a colheita de aortas para visualização de aneurismas da aorta e análises histológicas em camundongos.

14 dias após a aplicação do CaPO4, os camundongos machos C57BL/6J foram sacrificados e suas aortas foram colhidas e limpas. A morfologia das aortas foi fotografada para visualizar a formação de AAA. Como mostra a Figura 1A-B, a aplicação do CaPO4 levou à dilatação da aorta abdominal infrarrenal. Histologicamente, o CaPO4 resultou em uma degradação dramática das fibras elásticas, como ilustrado pelas quebras de elastina (<stro...

Este protocolo descreve um modelo de rato com aneurisma da aorta abdominal induzido por fosfato de cálcio (AAA) para estudar as características patológicas e os mecanismos moleculares dos AAAs.

Um Modelo de Aneurisma da Aorta Abdominal de Camundongo Induzido por Fosfato de Cálcio

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening cardiovascular disease that occurs worldwide and is characterized by irreversible dilation of the ...

Este protocolo descreve o modelo de camundongo triplo A do aneurisma da aorta abdominal induzido por fosfato de cálcio para estudar as características patológicas nos mecanismos moleculares do aneurisma da aorta abdominal. O modelo de aneurisma da aorta abdominal induzido por fosfato de cálcio é um modelo rápido e custo-efetivo em comparação com os modelos de tubo de angiotensina e aneurisma da aorta abdominal induzido por elastase. Demonstrando o procedimento estará Zeyu Cai, pós-médico aqui, um colega do nosso laboratório.Para começar, corte tiras de 0,3 centímetro de largura de luvas de borracha e gaze sem pó. Em seguida, compre de oito a dez semanas de idade com ratos C57BL6J Mayo e abrigue os animais em um ambiente com ar condicionado, com um ciclo escuro claro de 12 horas e acesso gratuito a comida e água. Em seguida, autoclave a gaze, cotonetes, tesouras e fórceps antes da cirurgia e obtenha Betadine, etanol a 70% e lavagem antisséptica das mãos.Raspe os pelos abdominais do rato anestesiado usando um cortador elétrico ou creme de depilação. Em seguida, esfregue e limpe a área raspada com Betadine, seguido de etanol a 70% várias vezes em um movimento circular. Em seguida, faça uma incisão de aproximadamente 1,5 centímetro no abdômen inferior ao longo da linha média do abdômen usando uma tesoura.Usando um cotonete estéril umedecido com solução salina normal, remova cuidadosamente o intestino até que a aorta infrarrenal esteja visível. Em seguida, disseque o tecido conjuntivo e a gordura da aorta infrarrenal por uma seção de aproximadamente 0,5 centímetro, evitando qualquer ruptura nos pequenos vasos para o lado dorsal. Em seguida, embale um pedaço da tira de luva de borracha embebida em solução salina sob a aorta abdominal e a veia principal abdominal enquanto limpa o excesso de líquido usando um cotonete.Depois, embale um pedaço de gaze embebido com cloreto de cálcio 0,5 molar na adventícia da vasculatura abdominal infrarrenal por 10 minutos. Retire a gaze e embale outro pedaço de gaze embebido com solução de PBS por cinco minutos para gerar cristais de ortofosfato de cálcio em C2 na adventícia da aorta. Em seguida, remova cuidadosamente a tira de luva de borracha e a gaze.Depois de redefinir o trato intestinal do rato, suture a incisão abdominal e a pele com uma sutura de cinco zero. Em seguida, coloque o mouse em uma almofada de aquecimento até que o mouse recupere a consciência. Abrigue o rato por mais 14 dias e monitore o rato de perto após a cirurgia e observe pelo menos todos os dias subsequentemente.Após 14 dias da cirurgia, abra as cavidades torácica e abdominal do rato eutanasiado ventralmente e abra o átrio direito. Profuse os camundongos com tampão PBS através do ventrículo esquerdo do coração para remover o sangue na aorta e, em seguida, perfundir com 4% de paraformaldeído, conforme descrito no manuscrito. Remova o tecido adventício e a gordura cuidadosamente sob um microscópio estéreo.Em seguida, colha a aorta e coloque-a em um tubo contendo cinco mililitros de paraformaldeído a 4% por 48 horas. Em seguida, prenda a aorta em uma placa de cera preta com agulhas de insetos e prossiga para adquirir imagens da aorta. Após 14 dias de aplicação do ortofosfato de cálcio, a morfologia das aortas foi fotografada para visualizar a formação do aneurisma da aorta abdominal.Observou-se que o ortofosfato de cálcio levou à dilatação da aorta abdominal infrarrenal e resultou em uma degradação dramática das fibras elásticas, como ilustrado pelas quebras de elastina. Usando um cotonete estéril umedecido com solução salina normal para remover o intestino até que a aorta infrarrenal seja visível e, em seguida, extraindo o tecido conjuntivo e a gordura da aorta infrarrenal. No geral, o modelo de aneurisma da aorta abdominal induzido por fósforo de cálcio em camundongos é uma abordagem rápida e econômica para explorar mecanismos moleculares e as estratégias terapêuticas do aneurisma da aorta abdominal e poderia ser aplicado em paralelo com os outros modelos para imitar totalmente as características do aneurisma da aorta abdominal humana.

a-calcium-phosphate-induced-mouse-abdominal-aortic-aneurysm-model

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Este vídeo mostra como induzir aneurismas da aorta abdominal (AAA) em camundongos através de infusão intraluminal transitória da elastase pancreática suína no segmento de infra-renal da aorta abdominal. O modelo tem a capacidade de adicionar uma visão ampla para o pathobiology da AAA, devido ao surgimento de inúmeros transgênicos e camundongos knockout do gene.

Criação de Murina Experimental aneurismas de aorta abdominal com Elastase

Este artigo descreve uma metodologia detalhada de usando uma borracha de silicone radiopaco à base de chumbo para perfundir vasculatura murino para quantificação do diâmetro da aorta em um modelo do rato de aneurisma da aorta e dissecação.

Análise quantitativa de Micro-CT de Aortopathy em um modelo do rato de β-aminopropionitrile-induzida de aneurisma da aorta e dissecação

Este modelo novo cria aneurismas abdominais infra-renais robustos no suíno usando uma combinação de angioplastia do balão, perfusão elastase/collagenase, aplicação tópica da elastase, e administração do composto oral β-aminopropionitrile, que interfere com a cruz-ligação do colágeno.

Modelo suíno de aneurisma aórtica abdominal infra-renal

O presente protocolo descreve um método cirúrgico padronizado para o modelo AAA induzido por elastase através da aplicação direta de elastase à adventitia da aorta abdominal infrarenal em camundongos.

Modelo de Aneurisma De aootico Abdominal do Rato Induzido pela Aplicação Perivascular do Elastase

Este manuscrito apresenta um protocolo para estabelecer um modelo de aneurisma de aorta abdominal de camundongo usando cloreto de cálcio e elastase, combinando as vantagens dos métodos de modelagem anteriores. Este modelo pode ser utilizado para investigar os mecanismos fisiopatológicos subjacentes aos aneurismas da aorta abdominal.

Um modelo de aneurisma de aorta abdominal de camundongo por infiltração periadventícia de cloreto de cálcio e elastase

Este protocolo descreve uma abordagem cirúrgica metódica para modelar aneurismas avançados da aorta abdominal em camundongos por uma combinação de aplicação direta de elastase na aorta infrarrenal e administração de ß-aminopropionitrila através da água potável.

Modelagem Avançada de Aneurisma da Aorta Abdominal em Camundongos por Combinação de Elastase Tópica e ß-aminopropionitrila Oral

Esse protocolo oferece um método repetível e confiável para induzir aneurismas da aorta abdominal (AAA) em camundongos C57BL/6, utilizando sensibilização com elastina e aplicação de elastase perivascular, como um modelo AAA que incorpora um componente de sensibilização imunológica.

Criação confiável de um modelo de aneurisma aórtico abdominal murino usando sensibilização com elastina e elastase perivascular

Angiogênese, o surgimento de vasos sanguíneos da vasculatura pré-existentes, está associado a ambos os processos naturais e patológicas. Aqui demonstramos um ensaio anel aórtico que permite potenciadores e inibidores angiogênicos para ser adicionado diretamente anéis de aorta na cultura. Brotação e crescimento Neovaso formado pode ser determinada por inspeção dos anéis da aorta durante um período de 6-12 dias.

Aórtica Assay Anel

Modelos animais ortotópico de câncer de ovário replicar melhor as doenças humanas e, portanto, melhorar nosso entendimento sobre a progressão do câncer e da resposta do tumor à terapia. Um modelo de camundongo recebe uma injeção de intrabursal luciferase células que expressam tumor de ovário. O tratamento é administrado através de gavagem oral. O crescimento do tumor é monitorado...

In vivo de imagens e tratamentos terapêuticos em um modelo de camundongo ortotópico de câncer de ovário

As células endoteliais vasculares desempenham um papel significativo em muitos distúrbios cardiovasculares importantes. Este artigo descreve um método simples para isolar e expandir as células endoteliais da aorta do camundongo sem o uso de nenhum equipamento especial. Nosso protocolo fornece um meio eficaz de identificar mecanismos na fisiopatologia das células endoteliais.

Isolamento e cultura primária de células de camundongo aórtica endoteliais

Aprenda a criar um modelo de aneurisma da aorta abdominal induzido por fosfato de cálcio em camundongos C57BL6J. Este método rápido e econômico permite estudar mecanismos moleculares e testar estratégias terapêuticas para AAA.

Um Modelo de Aneurisma da Aorta Abdominal de Camundongo Induzido por Fosfato de Cálcio

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