Estabelecimento de um Modelo de Rato Simples e Eficaz para Imagem Intraoperatória da Glândula Paratireoide

A glândula paratireoide é um pequeno órgão com funções muito importantes. Nosso protocolo pode ser usado para o desenvolvimento de novas tecnologias de identificação de PG que podem ajudar os cirurgiões a protegê-lo durante a tireoidectomia para câncer de tireoide. A principal vantagem deste modelo é que ele pode observar uma clara diferença entre a tireoide e os PGs através da imagem negativa do IONP.

Além disso, o custo e a dificuldade operacional são consideravelmente menores para este modelo de rato do que para modelos animais de grande porte. Para começar, coloque uma almofada de aquecimento pré-aquecida na mesa cirúrgica, a fim de manter a temperatura corporal do animal durante a cirurgia e, em seguida, transfira o rato anestesiado para uma cortina cirúrgica colocada na mesa de operação. Usando elásticos, fixe os membros do rato à mesa de operação e coloque um travesseiro cilíndrico feito de cortina sob o ombro do rato para inclinar a cabeça para trás, expondo completamente a área do pescoço, em seguida, aplique creme depilatório na área do pescoço, até o espaço submandibular, até o processo xifoide e, em ambos os lados, para o exterior do músculo esternocleidomastoideo.

Após três minutos, limpe suavemente o cabelo e o creme depilatório com um lenço de papel. Em seguida, usando uma bola de algodão iodóforo, esterilize o meio do pescoço e a área circundante. do qual o cabelo é removido.

Cubra o animal com uma cortina cirúrgica, mantendo o orifício alinhado com a área desinfetada. Usando o bisturi, faça aproximadamente uma incisão longitudinal de cinco centímetros na linha média anterior do pescoço do rato. Levante a pele ao longo de ambos os lados da incisão e usando uma tesoura, cortada longitudinalmente ao longo da linha alba cervical.

Use fórceps para separar o músculo esterno-hióideo e esternotireoide. Aperte os músculos separados na frente do pescoço usando pinça vascular e puxe o tecido pinçado para fora. Usando a agulha, passe a sutura através do tecido pinçado.

Faça um nó e fixe a sutura na cortina cirúrgica da mesa de operação. Localize a cartilagem tireoidiana com base em sua forma de escudo e cartilagem cricoide com base em sua forma de anel como o limite superior na área de operação, em seguida, localize a traqueia com base em sua forma de anel de cartilagem tubular na frente e no meio do pescoço como o limite inferior na área de operação. Localize a glândula tireoide, uma glândula vermelha em forma de borboleta no lado oposto da traqueia entre os limites superior e inferior.

Em seguida, localize duas glândulas paratireoides em uma forma fusiforme que são avermelhadas, mas mais leves do que a glândula tireoide circundante com um certo limite nos lados superior e externo da glândula tireoide. Tire uma fotografia frontal das glândulas paratireoides com a traqueia, tireoide e laringe. Dissecar a parte de trás do esôfago e, usando um afastador, expor o lado direito das glândulas paratireoides.

Tire uma fotografia do lado direito das glândulas paratireoides com a glândula tireoide e a traqueia e, da mesma forma, exponha e capture o lado esquerdo das glândulas. Use uma seringa de insulina para injetar localmente 10 microlitros de suspensão de nanopartículas de óxido de ferro preto no centro da glândula tireoide e pressione suavemente o local da injeção com gaze por cinco segundos, em seguida, observe a rápida difusão das nanopartículas de óxido de ferro preto dentro das glândulas tireoides, mas não as glândulas paratireoides, pois mancha negativamente as glândulas paratireoides e as diferencia da tireoide circundante. Capture as fotografias frontais, esquerdas e direitas das glândulas paratireoides coradas negativamente, juntamente com a traqueia, a glândula tireoide e a laringe.

Após a injeção, o agente de contraste, nanopartículas de óxido de ferro preto, difunde-se prontamente dentro da glândula tireoide e mancha-a de preto, mas não pode se infiltrar na glândula paratireoide devido à sua alta densidade tecidual. A análise histológica das nanopartículas de óxido de ferro preto injetadas na glândula tireoide revelou que as glândulas paratireoides são enriquecidas com células principais estreitamente alinhadas, enquanto a glândula tireoide apresenta muitos lúmens soltos, indicando densidade tecidual muito menor. Duas coisas importantes devem ser lembradas neste procedimento.

Primeiro, a postura do rato. Recomendamos inclinar as orelhas e a cabeça para trás, expondo completamente a área do pescoço. Em segundo lugar, quando injetamos os IONPs, devemos usar uma agulha de garantia fina, porque a superfície da tireoide está cheia de vasos sanguíneos.

Este procedimento também pode ser realizado por imagem de autofluorescência do PG, que não é invasivo, fornece informações em tempo real e não usa corante como agente de contraste, mas o sinal de autofluorescência é fraco e a eficiência da imagem também é fraca. Outros pesquisadores podem usar esse modelo de rato simples e eficaz para desenvolver e avaliar novas tecnologias e produtos de identificação de PG, em vez de usar animais de grande porte mais complicados e caros, como cães e porcos.