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Difusão e Montagem de Molécula Única em Membranas Lipídicas Repletas de Polímeros
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JoVE Journal Biochemistry
Single-Molecule Diffusion and Assembly on Polymer-Crowded Lipid Membranes

Difusão e Montagem de Molécula Única em Membranas Lipídicas Repletas de Polímeros

Full Text
2,949 Views
10:43 min
July 19, 2022

DOI: 10.3791/64243-v

Satyaghosh Maurya1, Vishwesh Haricharan Rai1, Aditya Upasani1, Saurabh Umrao1,2, Diksha Parwana1, Rahul Roy1,3

1Department of Chemical Engineering,Indian Institute of Science, 2Holonyak Micro & Nanotechnology Lab,University of Illinois, Urbana-Champaign, 3Center for BioSystems Science and Engineering,Indian Institute of Science

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui, um protocolo para realizar e analisar a ligação, mobilidade e montagem de moléculas individuais em membranas lipídicas artificiais apinhadas usando microscopia de fluorescência de reflexão interna total de molécula única (smTIRF) é apresentado.

As membranas celulares são altamente lotadas devido à presença de proteínas e açúcares incorporados. Demonstramos imagens de molécula única em bicamadas lipídicas sintéticas com aglomeração. Esta plataforma é útil para investigar o efeito do apinhamento nas reações biomoleculares da membrana, a nível molecular.

O protocolo explica a análise de ligação, difusão e montagem de biomoléculas de membrana. O sucesso no experimento depende da limpeza rigorosa do substrato, evitando danos à bicamada e mantendo uma alta relação sinal-ruído em imagens de molécula única. Demonstrando o procedimento comigo está Aditya Upasani e Vishwesh Haricharan Rai, estudantes de pós-graduação do laboratório.

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