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DOI: 10.3791/64243-v
Satyaghosh Maurya1, Vishwesh Haricharan Rai1, Aditya Upasani1, Saurabh Umrao1,2, Diksha Parwana1, Rahul Roy1,3
1Department of Chemical Engineering,Indian Institute of Science, 2Holonyak Micro & Nanotechnology Lab,University of Illinois, Urbana-Champaign, 3Center for BioSystems Science and Engineering,Indian Institute of Science
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui, um protocolo para realizar e analisar a ligação, mobilidade e montagem de moléculas individuais em membranas lipídicas artificiais apinhadas usando microscopia de fluorescência de reflexão interna total de molécula única (smTIRF) é apresentado.
As membranas celulares são altamente lotadas devido à presença de proteínas e açúcares incorporados. Demonstramos imagens de molécula única em bicamadas lipídicas sintéticas com aglomeração. Esta plataforma é útil para investigar o efeito do apinhamento nas reações biomoleculares da membrana, a nível molecular.
O protocolo explica a análise de ligação, difusão e montagem de biomoléculas de membrana. O sucesso no experimento depende da limpeza rigorosa do substrato, evitando danos à bicamada e mantendo uma alta relação sinal-ruído em imagens de molécula única. Demonstrando o procedimento comigo está Aditya Upasani e Vishwesh Haricharan Rai, estudantes de pós-graduação do laboratório.
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