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DOI: 10.3791/64364-v
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Os cardiomiócitos derivados de células-tronco pluripotentes induzidos por humanos (hiPSC-CMs) oferecem uma alternativa ao uso de animais para triagem pré-clínica de cardiotoxicidade. Uma limitação à adoção generalizada de hiPSC-CMs na triagem pré-clínica de toxicidade é o fenótipo imaturo e semelhante ao fetal das células. São apresentados protocolos para maturação robusta e rápida de hiPSC-CMs.
Esse protocolo é significativo porque permite aos pesquisadores amadurecer os hiPSC-CMs comerciais ou internos para um fenótipo semelhante ao adulto que melhora significativamente o valor preditivo dos hiPSC-CMs no rastreamento de cardiotoxicidade. A principal vantagem deste protocolo é que ele fornece hiPSC-CMs maduros em um formato de alto rendimento para mapeamento óptico de cálcio ou mudança de tensão. Esse protocolo pode ser usado para investigar mecanismos de doença ou para rastrear drogas para cardiotoxicidade.
Quem demonstrará o procedimento será Jeffrey Creech, pesquisador associado do meu laboratório. Comece lavando as placas da matriz extracelular indutora de maturação, ou MECM, duas vezes com 200 microlitros de solução salina balanceada de Hank, ou HBSS, 1 hora antes do plaqueamento dos cardiomiócitos. Mantenha os poços hidratados.
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