Estabelecendo um Modelo de Lesão da Medula Espinhal por Contusão de Camundongo Baseado em uma Técnica Minimamente Invasiva

Técnicas minimamente invasivas reduzem as correntes de instabilidade, causadas pelo excesso de danos físicos. Cultivando para analisar o microambiente da medula espinhal com precisão. Esta técnica combina o princípio clássico de abstinência de Alan com o procedimento de operação de precisão para estabelecer um modelo de lesão medular reprodutível.

O foco principal deste protocolo é familiarizar-se com a estrutura anatômica. O que é mais fácil de seguir mesmo para o segundo ano como eu. Demonstrando o procedimento será Xiangchuang Fan A pós-graduação do Hospital Qilu, Zhongze Yuan e Zimeng Yang.

Ambos os alunos de graduação da Faculdade de Medicina Cheeloo da Universidade de Shandong. Para começar a montar a plataforma com uma mesa cirúrgica sobre um estabilizador t-bral e uma ponta impactante. Coloque a ponta, que permite a localização precisa da medula espinhal na manga.

Selecione as massas adequadas das gotas de peso para o experimento, que são 1,3, 2,0 e 2,7 gramas para os grupos leve, moderado e grave, respectivamente. Conecte o pino de tração nos orifícios da queda de peso. Monte a queda de peso na parte superior da manga com o pino de tração encaixado no sulco do braço XYZ, de modo que, uma vez concluída a localização, o peso seja liberado para atingir a ponta do impactor.

Consequentemente, a confusão da medula espinhal e as alterações na medula espinhal são observadas ao microscópio. Coloque o rato em posição prona numa parte designada da mesa de operações. Explore a 13ª costela de um lado da porção óssea, sob o microscópio cirúrgico.

Explore o processo espinhoso na linha média tocando levemente a área do ângulo costovertebral e, em seguida, em direção ao rostral para localizar o espaço interespinhoso entre a 12ª e a 13ª vértebras torácicas. Explore o espaço interespinhoso entre a 9ª e a 10ª vértebras torácicas do espaço da 12ª e 13ª vértebras torácicas até o lado rostral. Dissecar o músculo paraespinhal ao longo do processo espinhoso do T9 para as articulações facetadas anterior e posterior de ambos os lados com micro tesoura.

Retraia os músculos paraespinhais com micro afastadores e limpe o tecido mole na lâmina, e no espaço interespinhoso do T8 a T9 e T9 a T10, com micro tesoura. Para realizar a laminectomia T9, pincele o processo espinhoso de T9 com pinça de microcirurgia. Ligeiramente levantada, insira a microtesoura paralelamente, ao longo do lado lateral dorsal direito da lâmina.

Evitando danos à medula espinhal e cortando a lâmina com micro tesoura. Repita no lado esquerdo e a medula espinhal pode ser exposta. Antes de fixar a vértebra, solte o braço universal e aperte lentamente as articulações da 9ª à 10ª faceta em ambos os lados da vértebra com a micropinça do mosquito do estabilizador vertebral.

Aperte os parafusos na pinça do micro mosquito e a vértebra é estabilizada. Ajuste a medula espinhal para o plano horizontal. Aperte o braço universal e a vértebra é fixada.

Uma vez que a medula espinhal de nível T9 esteja exposta e a vértebra esteja fixa, aponte para a medula espinhal pela ponta dentro da manga sob a micoscopia operacional. Depois de localizar o espaço interespinhoso do T12 a T13, abaixe a manga até que a extremidade do pêndulo seja consistente com a marca na janela de observação e a altura especificada de 22 milímetros seja atingida. Puxe o pino de tração para liberar o peso.

Remova o impactor quando a contusão for feita e observe o grau de lesão da medula espinhal sob o microscópio cirúrgico. No grupo leve, a alteração da cor vermelha clara pode ser vista enquanto no grupo moderado. A visão da lesão exibe vermelho escuro em três a quatro segundos, e possivelmente a eminência pode ser observada.

No grupo grave, as manifestações vermelhas escuras podem aparecer imediatamente, e a eminência óbvia na dura-máter se manifesta, mas a dura-máter ainda está em uma forma consistente. A área da lesão, gradualmente aumentou significativamente dos grupos leve para grave no primeiro dia pós-lesão. Enquanto isso, a continuidade da substância branca em ambos os lados da medula espinhal foi melhor no grupo leve.

Com pequenos vacúolos redondos observáveis, que são as características do edema intersticial. No grupo moderado, a substância branca apresentou baixa continuidade, e a estrutura da substância branca ventral não foi ordenada. No grupo grave, a substância branca ventral exibiu ruptura mais grave, e uma grande área da cavidade apareceu no centro da lesão.

Além disso, o tecido circundante mostrou preenchimento óbvio dos glóbulos vermelhos, e os glóbulos vermelhos perto do canal central se reuniram em tiras. Astrócitos formadores de cicatrizes sobrepostas foram visíveis no centro de todos os três grupos de lesões. Com o comprimento da área da lesão, aumentando com a gravidade da lesão, enquanto o diâmetro da cicatriz diminuiu.

Isso, sugere a presença de contratura cicatricial, o que pode levar a uma diminuição no diâmetro da medula espinhal. Remover os tecidos moles na frente e atrás da lâmina, tanto quanto possível, facilita o relaxamento da lâmina e evita danos à medula espinhal durante o corte paralelo. A presente técnica fornece um modelo animal simples, reprodutível e menos invasivo.

lesão medular pós-traumática, especialmente lesão por contusão.