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DOI: 10.3791/64567-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a noninvasive mouse model of anxiety induced by social isolation, utilizing wild type C56BL/6J mice. The model simulates real-life patterns of social isolation and is ideal for investigating stress and anxiety disorders without the need for invasive procedures.
Apresentamos aqui um modelo de rato de ansiedade induzido por isolamento social (SI) que utiliza camundongos selvagens do tipo C56BL/6J para induzir estresse e comportamento semelhante à ansiedade com manuseio mínimo e sem procedimentos invasivos. Este modelo reflete os padrões da vida moderna de isolamento social e é ideal para estudar ansiedade e distúrbios relacionados.
Este modelo imita a vida social humana e isolada e é uma maneira não invasiva e simples de criar um modelo de ansiedade e comprometimento cognitivo leve. Esta técnica requer apenas as condições de alojamento apropriadas e trado de tratamento, e não requer processos tediosos como injeções ou manipulação genética. Para o isolamento social dos animais, pegue uma gaiola de rato padrão com um espaço quadrado de 75 polegadas.
Adicione metade da quantidade de roupa de cama e um pedaço quadrado de algodão de uma polegada para nidificação. Envolva o exterior das paredes da gaiola em sacos de plástico pretos opacos sem nenhum segmento do saco acessível a partir do interior. Prenda o saco usando fita adesiva e certifique-se de que o ambiente externo ou o ambiente do animal não sejam visíveis.
Deixe a parte superior e inferior da gaiola desembrulhadas, a menos que os ratos possam ver os animais vizinhos através deles. Mantenha os ratos de controle em grupos de dois ou três em condições normais de gaiola em uma gaiola de rato padrão com uma quantidade total de cama, um pedaço quadrado de algodão de duas polegadas ou equivalente para nidificação, sem embrulho de sacos opacos. Certifique-se de que os ratos alojados em grupo sejam compatíveis sem conflitos.
Caso contrário, exclua o agressor da análise. Troque as gaiolas apenas uma vez por semana durante o ciclo escuro com o mesmo saco plástico reembrulhado em uma nova gaiola, a menos que haja danos significativos. Para ratos de controle, troque as gaiolas duas vezes por semana ou mais durante o ciclo escuro.
Continue isolando os camundongos por pelo menos quatro semanas para observar os melhores resultados. Para preparar o tratamento, adicione ágar a 3% à água deionizada e dissolva-a a aproximadamente 90 graus Celsius usando uma placa de aquecimento ou micro-ondas. Evite que a solução borbulhante derrame ou ferva.
Gire a solução até que ela se torne homogênea. Enquanto a solução ainda estiver quente, adicione 5% de sacarose. Gire a solução homogênea antes de despejar a solução em um molde.
Deixe esfriar e solidificar à temperatura ambiente ou 4 graus Celsius. No caso de tratamento sensível à luz, proteja o molde da luz. Uma vez solidificado, corte o ágar em cubos de 0,5 por 0,5 por 0,5 por 0,5 centímetros e armazene a 4 graus Celsius até a administração.
Administrar o tratamento no tempo e frequência planejados com o mínimo de manuseio possível. Silenciosa e cuidadosamente, coloque um único cubo em um barco de maneira pequena ou equivalente, como a tampa de um tubo de crônica de 50 mililitros durante a fase escura do ciclo escuro claro sem tocar no mouse. Permita que o mouse consuma o ágar.
Depois de confirmar o consumo completo do ágar, retire cuidadosamente o barco da gaiola e repita conforme necessário. Camundongos socialmente isolados passam significativamente menos tempo no braço aberto e um tempo significativamente maior no braço fechado em comparação com o grupo controle. No teste de campo aberto, camundongos socialmente isolados viajaram menos distância, criaram menos e passaram mais tempo nos cantos.
Da mesma forma, eles passaram menos tempo na área central do que no controle, indicando um comportamento semelhante à ansiedade aumentado. Camundongos socialmente isolados também exibiram reconhecimento reduzido de novos objetos e novos contextos em comparação com o controle, sugerindo comprometimento cognitivo. Esta técnica nos permite estudar o desenvolvimento de ansiedade e comprometimento cognitivo, em vez de apenas o resultado dos transtornos.
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