Gerando e Imageando Organoides Epitéliares de Camundongos e Humanos a partir de Tecido Mamário Normal e Tumoral Sem Passagem

Este protocolo é significativo para a produção de organoides epiteliais de memória que são gerados sem passar. A principal vantagem desta técnica é que os organoides podem ser isolados do tecido mamário e de memória humana e de camundongo após a digestão enzimática. Realizamos uma série de etapas de centrifugação diferencial que isolam organoides epiteliais sem ter que passar células.

Um indivíduo que realiza esta técnica pode enfrentar desafios ao incorporar os tecidos em colágeno ou matriz e chapeá-los dentro de uma placa de 96 poços. Além disso, o uso de colágeno polimerizado adequadamente e o revestimento de cúpulas estáveis é a chave para ver a invasão. Para começar, colete o tecido mamário de um rato eutanasiado jogando membros de camundongos e, usando quatro agulhas de calibre 19, prenda o rato pelas patas a uma tábua coberta com uma almofada absorvente com o lado ventral voltado para cima.