Análise do Efeito do Estresse Composto de Sal na Germinação de Sementes e Análise de Tolerância ao Sal de Pimenta (Capsicum annuum L.)

Este estudo fornece orientação teórica para a criação de variedades de pimenta tolerância ao sal e calibração de alto rendimento e qualidade em solo salino-alcalino. O período de experimentação é de 15 dias com alta eficiência, velocidade mais rápida, boa repetibilidade e resultados precisos. Essa tecnologia pode fornecer referências técnicas e orientações teóricas para a avaliação da tolerância ao sal de outras culturas.

Desejo especialista preliminar para avaliar a tolerância ao sal das sementes. Comece preparando as sementes da cultura para a cultivar Hongtianhu 101 com forte tolerância ao sal e a cultivar Xinxiang 8 com baixa tolerância. Prepare 2000 mililitros de solução de permanganato de potássio a 0,2% como um reagente desinfetante de sementes imediatamente antes do uso.

Prepare a solução salina mista usando sete sais, incluindo carbonato de sódio, bicarbonato de sódio, cloreto de sódio, cloreto de cálcio, cloreto de magnésio, sulfato de magnésio e sulfato de sódio. Em seguida, prepare placas de Petri de uso único, nove centímetros e papel de filtro qualitativo de velocidade média de nove centímetros. Selecione sementes de pimenta com tamanho consistente e partículas cheias de cada variedade, com um diâmetro médio de 4,2 milímetros para Hongtianhu 101 e 3,7 milímetros para sementes Xinxiang 8.

Calcule o número total de sementes selecionadas de acordo com a carga de trabalho de teste. Para a desinfecção de sementes, mergulhe sementes de pimenta selecionadas em solução de permanganato de potássio a 0,2%. Após 15 minutos, enxaguar as sementes cinco vezes com água destilada.

Transfira as sementes esterilizadas para água destilada por 24 horas para imersão. Uma vez feito, lave as sementes várias vezes com água destilada antes de secá-las para uso posterior. Preparar seis concentrações dos sais mistos e medir a condutividade da solução salina, utilizando um medidor de condutividade.

Em uma placa de Petri com duas camadas de papel de filtro, coloque uniformemente 40 sementes de pimenta. Preparar as sementes para seis tratamentos experimentais e cinco repetições. Adicione uma quantidade adequada das seis concentrações mistas de sal à placa de Petri para germinação, para garantir que o papel de filtro esteja úmido.

Coloque as sementes em uma incubadora de ar a 28 graus Celsius e 80% de umidade do ar para germinação no escuro. Após a germinação das sementes, deixe as plântulas crescerem por 14 dias em aproximadamente 450 lux de intensidade luminosa. Com o ciclo de luz de 12 horas escuras e 12 horas de período de luz na incubadora.

Reabasteça a solução na placa de cultura a cada 12 horas para reter um papel de filtro úmido e lave completamente o papel de filtro a cada 24 horas com a concentração correspondente da solução salina mista, para manter uma concentração constante de sal misto na placa de Petri. Para os índices de germinação das sementes, determine a taxa de germinação, diariamente, após semeadura com o radical quebrando o revestimento da semente, atingindo metade do comprimento do diâmetro da semente como marcador de germinação. Para determinar o índice de crescimento das plântulas, selecione aleatoriamente 10 plântulas representativas de cada placa de Petri no dia 14 após a semeadura e meça o comprimento da raiz e o comprimento do hipocótilo.

Use uma faca para dividir as mudas de pimenta em partes radicais e acima do solo. Retire a água das mudas limpando e pese as mudas separadamente para determinar o peso fresco. Para preservar as mudas de pimenta, selecione aproximadamente 24 gramas de mudas de pimenta inteiras representativas de cada tratamento no dia 14 após a semeadura.

Depois de remover a água superficial, congele imediatamente as mudas em nitrogênio líquido por um minuto. E guarde-os em uma geladeira a menos 80 graus Celsius. Recuperar aproximadamente um grama de amostra de plântulas de cada tratamento coletado em triplicado.

Imediatamente, coloque a amostra de plântula em um tubo de centrífuga. Adicione nitrogênio líquido e moa a amostra usando uma haste de moagem para determinar os índices fisiológicos das plântulas, incluindo a atividade enzimática protetora das plântulas, o malondialdeído e o conteúdo de prolina. À medida que a concentração mista de sal aumentava, o potencial de germinação e o índice de germinação de Hongtianhu 101 e Xinxiang 8 diminuíram significativamente.

À medida que as concentrações de sal misto aumentavam, a taxa de germinação das duas variedades diminuía gradualmente e a taxa relativa de danos ao sal para as variedades aumentava. O índice de vigor germinativo das sementes de Hongtianhu 101 foi superior ao de Xinxiang 8 em cada nível de concentração de sal misto. Na concentração mista de 15 gramas por litro, o comprimento da raiz de Hongtianhu 101 e Xinxiang 8 diminuiu 89,4% e 91,1% e o peso fresco da raiz diminuiu 81,7% e 71,2%, respectivamente, em comparação com o controle.

Com base nas diferenças varietais, o comprimento do hipocótilo e o peso fresco acima do solo de Xinxiang 8 foram maiores que Hongtianhu 101 em cada concentração de sal. A cinco e três gramas por litro, as concentrações de malondialdeído e prolina atingiram seus valores mais baixos, respectivamente. Na concentração de sal de três a 15 gramas por litro, o teor de prolina de Xinxiang 8 aumentou lentamente e permaneceu relativamente estável, enquanto o teor de prolina de Hongtianhu 101 aumentou rapidamente.

À medida que a concentração mista de sal aumentava, as atividades de catalase, peroxidase e superóxido dismutase das plântulas Hongtianhu 101 e Xinxiang 8 diminuíram e, em seguida, aumentaram, com os menores valores obtidos em três gramas por litro. As atividades de catalase e peroxidase de Hongtianhu 101 foram maiores que as de Xinxiang 8, e a diferença entre elas aumentou gradualmente. Mantenha uma constante de concentração de sal misto na placa de Petri, retendo um papel de filtro úmido e lavando completamente o papel de filtro.

Os pesquisadores podem inovar com base nesse experimento, como alterar a proporção de diferentes sais mistos para obter resultados mais extensos e aprofundados.