Name: Medição dos Tempos de Relaxamento T2 Tumorais após Administração de Nanopartículas de Óxido de Ferro (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-19T13:10:00.000+00:00
Duration: 5 min 30 s
Description: Aprenda a medir tempos de relaxamento T2* tumorais usando nanopartículas de óxido de ferro e software OsiriX. Este protocolo padronizado melhora a garantia de qualidade em imagens de ressonância magnética sem exigir conhecimentos de programação.

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Este trabalho foi em parte apoiado por uma bolsa do Instituto Nacional do Câncer, bolsa número U24CA264298. Agradecemos a Dawn Holley, Kim Halbert e Mehdi Khalighi do Centro de Serviços Metabólicos de PET/RM por sua assistência com a aquisição de exames de PET/RM no Lucas Research Center em Stanford. Agradecemos aos membros do laboratório Daldrup-Link pela valiosa contribuição e discussões sobre este projeto.

Este protocolo foi gerado para um ensaio clínico prospectivo e pesquisa co-clínica. O estudo foi aprovado pelo Conselho de Revisão Institucional (IRB) da Universidade de Stanford. Todos os pacientes ou seu representante legal assinaram um termo de consentimento livre e esclarecido, e todas as crianças entre 7 e 18 anos de idade assinaram um termo de assentimento.
1. Instalando e iniciando o plugin T2 Fit Map
<ol><li>Inicie o software Osirix. Instale o plugin T2 Fit Map a partir do gerenciador de plug-ins e reinicie o software.<ol><li>Na barra de menus, clique no botão Plug-ins. Clique no menu suspenso e selecione Instalar um pacote de plug-in (Figura 1).</li>
		<li>Depois que o gerenciador de plug-ins for carregado, selecione os plug-ins disponíveis no menu suspenso e, em seguida, T2 Fit Map (Figura 2).</li>
		<li>Clique em download &amp; install. Feche o gerenciador de plug-ins e reinicie o software.</li>
	</ol></li>
	<li>Carregue as imagens de sequência de eco gradiente multi-eco como arquivos DICOM no software.</li>
	<li>Altere a função do botão do mouse para desenhar uma Região de Interesse (ROI) (Figura 3).</li>
	<li>Usando essa função de botão do mouse, defina uma forma para a ROI necessária: selecione Polígono Oval ou Fechado ou a forma desejada no menu suspenso (Figura 4).</li>
	<li>Desenhe ROIs nas imagens necessárias com diferentes tempos de eco (TEs).</li>
	<li>Selecione as ROIs em todas as imagens com TEs diferentes para as quais o mapa T2* é necessário.</li>
	<li>Clique no botão Plug-ins , selecione Filtros de imagem no menu suspenso e selecione T2 Fit Map.</li>
	<li>Clique em T2 Fit Map. Uma caixa de diálogo será aberta; clique em Generate Map (que está localizado na parte inferior da caixa de diálogo) (Figura 5). NOTA: Uma curva de ajuste é gerada com valores mínimos, médios e máximos de T2* para as ROIs selecionadas com vários TEs (ms). O valor médio de T2* é calculado e apresentado abaixo da curva (Figura 6).</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig01.jpg"> Figura 1: Selecionando 'Instalar um pacote de plug-in' no menu suspenso. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig02.jpg"> Figura 2: Selecionando 'T2 Fit Map' nos plugins disponíveis. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig03.jpg"> Figura 3: Captura de tela demonstrando como alterar a função do botão do mouse para desenhar uma região de interesse (ROI). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig04.jpg"> Figura 4: Captura de tela mostrando como selecionar formas diferentes para o ROI. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig05.jpg"> Figura 5: Captura de tela mostrando como selecionar 'Gerar mapa' depois de selecionar 'T2 Fit Map'. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig05large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig06.jpg"> Figura 6: Captura de tela mostrando a geração de uma curva de ajuste para valores T2*. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig06large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
2. Exclusão de ruído utilizando a definição de máscara
NOTA: Para definir uma máscara no primeiro eco dos dados T2map_MSME usados para calcular os mapas paramétricos, defina um limite de sinal de primeiro eco mais baixo para o cálculo do valor T2* (o volume do mapa T2* agora excluirá os pixels com sinais muito baixos para o cálculo preciso no primeiro eco multi-spin multi-echo (MSME). O limite pode ser aumentado para excluir mais pixels ou diminuído para incluir mais pixels).
<ol><li>Para definir a ROI da máscara em uma série de imagens fora dos dados paramétricos, abra a série desejada (por exemplo, primeiro eco da T2map_MSME com TE = 15) e selecione uma fatia.</li>
	<li>Na parte inferior do menu suspenso ROI, selecione Crescer região....</li>
	<li>Selecione o botão de opção 3D Growing Region... (Figura 7).</li>
	<li>No menu suspenso Algoritmo, selecione Limite (limites inferiores/superiores).</li>
	<li>Defina os limiares inferior e superior para 0 e X% do sinal muscular da panturrilha contralateral, respectivamente (por exemplo, defina o limiar para o valor que mascarará a maior mancha na ROI tumoral e deixará o tumor T2(*)s mais avaliável).</li>
	<li>Defina o nome do ROI conforme desejado.</li>
	<li>Clique na imagem para colocar uma semente para o crescimento do ROI.</li>
	<li>Clique no botão Computar .</li>
	<li>No menu ROI, selecione Salvar todas as ROIs desta série... (Figura 8). NOTA: Agora, o ROI que define a área a ser mascarada dos mapas paramétricos foi salvo e pode ser aplicado aos dados paramétricos.</li>
	<li>Abra o conjunto de dados Paramétrico no visualizador 4D.</li>
	<li>No menu ROI, selecione Importar ROI(s).... NOTA: O ROI da máscara está agora na primeira série paramétrica.</li>
	<li>Verifique se os ROIs estão no primeiro volume 3D e não 4D.</li>
	<li>Aplique máscara para mapear os dados. Para fazer isso, na parte inferior do menu suspenso ROI, selecione Definir valores de pixel para. Em seguida, selecione aplicar a: ROIs com o mesmo nome... (Figura 9).</li>
	<li>Marque a caixa Propagar para a série 4D .</li>
	<li>Defina os pixels que estão dentro das ROIs.</li>
	<li>Defina Para este novo valor: como 0.</li>
</ol><img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig07.jpg"> Figura 7: Captura de tela mostrando os parâmetros de segmentação. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig07large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig08.jpg"> Figura 8: Captura de tela mostrando como selecionar "Salvar todas as ROIs desta série...". <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig08large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig09.jpg"> Figura 9: Captura de tela mostrando os valores a serem inseridos em "Set Pixel Values To". <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig09large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

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<li>Ishiyama, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-liver+contrast+and+subjective+tumor+conspicuity+of+respiratory-triggered+T2-weighted+fast+spin-echo+sequence+compared+with+T2%2A-weighted+gradient+recalled-echo+sequence+for+ferucarbotran-enhanced+magnetic+resonance+imaging+of+hepatic+malignant+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Magnetic+Resonance+Imaging%22%5BJournal%5D)">Tumor-liver contrast and subjective tumor conspicuity of respiratory-triggered T2-weighted fast spin-echo sequence compared with T2*-weighted gradient recalled-echo sequence for ferucarbotran-enhanced magnetic resonance imaging of hepatic malignant tumors.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 27 (6), 1322-1326 (2008).</li>
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</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

Nosso protocolo nos permite medir os tempos de relaxamento T2* do tumor com base em sequências gradiente-eco multi-eco, um software externo e um plugin para criar mapas T2*. As etapas críticas dentro do protocolo são a inclusão da sequência gradiente-eco multi-eco com TEs muito curtos no protocolo de varredura e o ajuste monoexponencial das imagens gradiente-eco multi-eco usando software externo. É importante organizar as imagens de entrada multi-eco gradiente-eco de acordo com seus tempos de aquisição. Isso pode ser obt...

A quantificação não invasiva do tempo de relaxamento tumoral T2* em vários tecidos do corpo com a ressonância magnética (RM) está amplamenteestabelecida1. A justificativa para este artigo é fornecer um protocolo para a medição do tempo de relaxamento tumoral T2* que é independente de um software de scanner como o Osirix2. Isso permitirá análises uniformes de dados de imagem de diferentes centros, diferentes scanners e diferentes fornecedores. De fato, milhares de usuários poderiam potencialmente usar a mesma abordagem, aumentando assim a padronização das dosagens tumorais de T2*. As medidas de T2* são usadas para diferentes finalidades por neurorradiologistas, especialistas em imagem cardíaca e em imagem abdominal, entre outros. Sequências de pulso de RM para medidas dos tempos de relaxamento T2* tecidual têm sido aplicadas e otimizadas para a avaliação de sangramentos intracranianos3, conteúdo hepático de ferro1,4, conteúdo de ferro cardíaco5,6, entre outros. Outros pesquisadores utilizaram medidas de T2* para gerar estimativas quantitativas do acúmulo de nanopartículas de óxido de ferro em tumoresmalignos7,8. No entanto, muitas dessas abordagens anteriores utilizavam softwares institucionais ou scanners específicos, que seriam limitados ao uso em uma instituição específica ou para o processamento de dados obtidos em um scanner específico. Aqui, descrevemos uma abordagem universalmente aplicável para gerar mapas T2* tumorais e tempos de relaxamento T2* tumoral com base em dados pré-clínicos ou clínicos de RM de qualquer scanner que possa gerar imagens de gradiente eco multi-eco. A sequência de gradiente eco necessária deve ter tempos de primeiro eco muito curtos e espaçamento intereco estreito 9,10. As imagens de gradiente eco multi-eco são então alimentadas no software externo, mapas T2* do tumor são calculados e os tempos de relaxamento T2* do tumor são medidos. O plugin T2 Fit Map nas curvas de decaimento T2* dos modelos externos como um ajuste monoexponencial para S(t) = S o e-t/T2* 11 onde S(t) representaosinal ou valor do processo em um dado tempo t; S 0 é o valor inicial do sinal ou processo em t =0; t denota tempo; T2*, também conhecido como tempo de relaxamento transversal aparente, caracteriza a taxa de decaimento do sinal ou processo; e e é a base do logaritmo natural (aproximadamente igual a 2,71828). A equação descreve um decaimento exponencial, onde o sinal ou processo diminui ao longo do tempo em função da taxa de decaimento T2*. Quanto maior o valor de T2*, mais lenta é a taxa de decaimento, e vice-versa. O mesmo software também pode ser usado para inserir imagens spin echo multi-eco e gerar valores de T2 tumoral ajustando a curva de decaimento de T2 para S(t) = So e-t/T2. O ajuste da curva foi realizado por meio de software externo, sem incorporar deslocamento constante. Ambas as curvas de decaimento exibem comportamento exponencial único, com T2* demonstrando menor duração em relação a T2.
Em pacientes com hemossiderose e hemocromatose, a quantificação do conteúdo hepático de ferro por biópsia tecidual é o padrão-ouro, enquanto a RM não invasiva é o ponto de cuidado para estabelecer valores basais e monitorar as mudanças ao longo do tempo de forma não invasiva12,13. Embora a geração de mapas T2* para quantificação de ferro hepático esteja bemestabelecida4, não há um protocolo padronizado para medir o tempo de relaxamento tumoral T2*. Embora os mapas T2* também possam ser gerados pelo software do scanner, ele é limitado a um scanner e fornecedor específicos. No campo da oncologia, estudos seriados de imagem de um determinado paciente geralmente ocorrem em diferentes scanners, e os dados de RM multicêntricos são adquiridos com base em estudos de imagem de diferentes scanners e diferentes fornecedores. Além disso, a pesquisa de imagem coclínica está sendo cada vez mais implementada e requer a comparação de dados de RM de pacientes e modelos de camundongos que simulam seu tumor. O objetivo deste protocolo é fornecer um protocolo para a mensuração dos tempos de relaxamento T2* tumoral que sejam independentes do software do scanner. Isso permitirá uma análise uniforme dos dados de imagens de diferentes centros e diferentes scanners. De fato, milhares de usuários poderiam potencialmente usar a mesma abordagem, aumentando assim a padronização e a reprodutibilidade das dosagens tumorais de T2*. Nosso protocolo utiliza software externo, que pode ser baixado da internet. Imagens de gradiente eco multieco são alimentadas no software e ajustadas a uma fórmula de decaimento monoexponencial para gerar um mapa T2*, no qual os tempos de relaxamento T2* do tumor podem ser medidos usando regiões de interesse (ROIs) definidas pelo operador5. Nanopartículas de óxido de ferro podem ser infundidas em diferentes doses 14, Em nosso estudo, a paciente recebeu uma injeção de Ferumoxytol (30 mg/mL) contendo 510 mg de ferro elementar em um volume de17 mL, na dose de 5 mg de ferro elementar por kg de peso corporal. Posteriormente, sequências multieco gradiente eco foram obtidas15 usando parâmetros de sequência definidos para aquisição de dados.

<table><tbody><tr><td>OsiriX</td><td>Pixmeo SARL</td><td></td><td>https://www.osirix-viewer.com/</td></tr> <tr><td>3T GE MR 750</td><td>GE Healthcare, Chicago, IL</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FERAHEME (injeção de ferumoxitol)</td><td>AMAG Pharmaceuticals, Inc. 1100 Winter Street Waltham, MA 02451</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

medição dos tempos de relaxamento t2* tumorais após administração de nanopartículas de Óxido de ferro

Measurement of Tumor T2* Relaxation Times after Iron Oxide Nanoparticle Administration

A relaxometria T2* é um dos métodos estabelecidos para medir o efeito de nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro em tecidos tumorais com ressonância magnética (RM). As nanopartículas de óxido de ferro encurtam os tempos de relaxamento T1, T2 e T2* dos tumores. Enquanto o efeito T1 é variável com base no tamanho e composição das nanopartículas, os efeitos T2 e T2* são geralmente predominantes, e as medidas de T2* são as mais eficientes em termos de tempo em um contexto clínico. Aqui, apresentamos nossa abordagem para medir os tempos de relaxamento T2* do tumor, usando sequências de gradiente eco multi-eco, software externo e um protocolo padronizado para criar um mapa T2* com software independente de scanner. Isso facilita a comparação de dados de imagem de diferentes scanners clínicos, diferentes fornecedores e trabalho de pesquisa co-clínica (ou seja, dados de tumor T2* obtidos em modelos de camundongos e pacientes). Uma vez que o software é instalado, o plugin T2 Fit Map precisa ser instalado a partir do gerenciador de plugins. Este protocolo fornece detalhes processuais passo a passo, desde a importação das sequências de gradiente de eco multi-eco para o software, até a criação de mapas T2* codificados por cores e a medição dos tempos de relaxamento T2* do tumor. O protocolo pode ser aplicado a tumores sólidos em qualquer parte do corpo e foi validado com base em dados pré-clínicos de imagem e dados clínicos em pacientes. Isso poderia facilitar as dosagens de T2* tumoral para ensaios clínicos multicêntricos e melhorar a padronização e a reprodutibilidade das dosagens de T2* tumoral em análises de dados co-clínicas e multicêntricas.

<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64773/64773fig10.jpg"> Figura 10: Mapa T2* com ROI sobreposta à lesão metastática do osteossarcoma que mostra o valor médio e desvio padrão de T2*. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64773/64773fig10large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
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Apresentamos um protocolo padronizado para a quantificação dos tempos de relaxamento T2* dos tumores utilizando software externo. Imagens de gradiente eco multi-eco são adquiridas e alimentadas no software para criar mapas T2* tumorais e medir os tempos de relaxamento T2* tumoral.

Medição dos Tempos de Relaxamento T2* Tumorais após Administração de Nanopartículas de Óxido de Ferro

T2* relaxometry is one of the established methods to measure the effect of superparamagnetic iron oxide nanoparticles on tumor tissues with magnetic ...

Nosso protocolo permite medições padronizadas de T2* do tumor em vários scanners, fabricantes e instituições. Este protocolo permite a melhoria da garantia de qualidade e ampla habilidade clínica sem a necessidade de linguagem de programação. A principal vantagem desta técnica é a capacidade de facilitar medições confiáveis e consistentes de T2* do tumor em vários scanners de ressonância magnética.Além disso, oferece uma abordagem acessível e de fácil utilização, reduzindo as barreiras à adopção. Os NOIs podem ter dificuldades com a configuração adequada da sequência e a seleção do ROI. O conselho é seguir as etapas do protocolo, garantir a disposição correta de T e praticar o desenho do ROI para geração e ajuste precisos do mapa T2*.Comece iniciando o software OsiriX para instalar o T2 Fit Map Plugin. Clique no botão Plug-ins na barra de menus e selecione Gerenciador de plug-ins no menu suspenso. Depois que o Gerenciador de Plug-ins estiver carregado, selecione T2 Fit Map nos plug-ins disponíveis.Clique em Baixar instalação. Em seguida, feche o Gerenciador de plug-ins. Uma vez que o software é reiniciado, carregue as imagens de sequência de gradiente de eco múltiplo como arquivos

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Medicine

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Bioimaging métodos utilizados para avaliar biodistribuição das células de nanopartículas são aplicáveis ​​para monitorização terapêutica e de diagnóstico de compostos nanoformulated. Os métodos descritos neste documento são sensíveis e específicos, quando avaliada por coregistration histológica. As metodologias de fornecer um caminho de translação de roedores para aplicação em seres humanos.

BioImaging registradas de Nanomateriais para Monitoramento de Diagnóstico e Terapêutica

Este protocolo descreve a síntese de nanopartículas biofuncionalizadas de azul da Prússia e seu uso como agentes de imagem molecular multimodais. As nanopartículas têm um design de núcleo-casca onde os íons de gadolínio ou manganês dentro do núcleo da nanopartícula geram contraste de ressonância magnética. O invólucro biofuncional contém fluoróforos para imagens de fluorescência e ligantes de direcionamento para direcionamento molecular.

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O acúmulo intratumoral heterogêneo de lipossomas tem sido associado a um microambiente tumoral anormal. Aqui são apresentados métodos para medir a microcirculação tumoral por imagem de perfusão e pressão elevada do fluido intersticial (IFP) usando um sistema robótico guiado por imagem. As medições são comparadas ao acúmulo intratumoral de lipossomas, determinado por meio de microtomografia computadorizada volumétrica.

Medidas espaciais de Perfusão, intersticial pressão do produto e lipossomas Acumulação em tumores sólidos

A má compreensão do desempenho in vivo dos nanomedicamentos impede sua tradução clínica. Procedimentos para avaliar o comportamento in vivo de nanomedicamentos contra o câncer em níveis sistêmicos, teciduais, unicelulares e subcelulares em camundongos imunocompetentes portadores de tumor são descritos aqui. Essa abordagem pode ajudar os pesquisadores a identificar nanomedicamentos promissores contra o câncer para tradução clínica.

Um método completo para avaliar o<em&gt; In Vivo</em&gt; Performance of Cancer Nanomedicinas

É descrito um protocolo para a estimativa de tempo de início de curso em um modelo do rato do curso explorando parâmetros quantitativos a ressonância magnética (qMRI). O procedimento explora MRI de difusão para a delimitação da lesão vascular cerebral agudo e quantitativos T1 e T2 (qT1 e qT2) tempos de relaxamento para o sincronismo de AVC.

Um protocolo de ressonância magnética para estimativa de tempo de início curso em situações de isquemia Cerebral permanente

Descreveremos um protocolo para pré-clínicos em vivo rastreamento de metástases. É baseado em um repórter de radionuclídeos-fluorescência combinando o symporter de iodeto de sódio, detectado pelo não-invasiva [18F] tetrafluoroborate-animal de estimação e uma proteína fluorescente para confirmação simplificada ex vivo . O método é aplicável para pré-clínicos na vivo celular rastreamento além da biologia do tumor.

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Para melhorar os testes diagnósticos sorológicos para antígenos de tuberculose mycobacterium, desenvolvemos nanoprobes de óxido de ferro superparamagnético para detectar tuberculose extrapulmonar.

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Aqui, apresentamos um protocolo para obter68Ga núcleo dopado com óxido de ferro nanopartículas através de rápido orientado para o microondas síntese. A metodologia processa PET/nanopartículas de MRI (T1) com eficiência superior a 90% e a pureza radioquímica de 99% em uma síntese de 20 min de radioativos.

Síntese de nanopartículas de núcleo dopado com óxido de ferro Ga 68para tomografia por emissão de pósitrons Dual/imagem latente de ressonância magnética de (T1)

Aqui, descrevemos o protocolo para entrega in vivo de nanopartículas magnéticas de óxido de ferro carregando oligômeros de RNA para câncer de mama metastático em modelos animais, fornecendo uma abordagem clinicamente viável para o silenciamento terapêutico de ácidos nucléicos oncogênicos.

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Este artigo descreve a radiossíntese, formulação, controle de qualidade de uma nova sonda radiomarcada (ou seja, nanocorpo NM-02 marcado com 68Ga) e seu uso para imagens de PET/CT de pequenos animais em um modelo de xenoenxerto.

Radiossíntese, controle de qualidade e imagens de tomografia por emissão de pósitrons de pequenos animais de 68nanomoléculas marcadas com Ga

Mapas quantitativos de oxigênio 3D de tumores murinos foram fotografados de forma não invasiva usando ressonância paramagnética eletrônica de pulso. Ultrassom modo B e Power Doppler foram usados para anatomia e estrutura vascular. As imagens de ambas as modalidades foram sobrepostas, permitindo a análise multiparamétrica do tumor.

Avaliação da hipóxia tumoral: imagens de oxigênio 3D in vivo por ressonância paramagnética eletrônica 

Aprenda a medir tempos de relaxamento T2* tumorais usando nanopartículas de óxido de ferro e software OsiriX. Este protocolo padronizado melhora a garantia de qualidade em imagens de ressonância magnética sem exigir conhecimentos de programação.

Medição dos Tempos de Relaxamento T2* Tumorais após Administração de Nanopartículas de Óxido de Ferro

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