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DOI: 10.3791/64881-v
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O presente protocolo descreve métodos para avaliar proteínas de reparo de danos ao DNA em organoides de câncer de ovário derivados de pacientes. Aqui estão incluídos métodos abrangentes de chapeamento e coloração, bem como procedimentos de quantificação detalhados e objetivos.
O estudo da resposta a danos no DNA é necessário para entender a fisiopatologia dos potenciais biomarcadores do câncer de ovário em novas terapias-alvo. Esta técnica permite que a amostra permaneça intacta e permite o exame de antígenos em seu local de ação. Este protocolo é rápido e pode ser adaptado a qualquer antígeno passível de imunofluorescência.
Este método fornece informações sobre o câncer de ovário e os processos de reparo de danos ao DNA envolvidos na resistência quimioterápica e inibidora de PARP. Esses métodos podem ser aplicados a outras áreas de estudo que envolvem o uso de culturas 3D e organoides. Para começar, aspirar o meio dos organoides irradiados e incubados sem interromper a matriz 3D.
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