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Visualizando proteínas de reparo de danos ao DNA em organoides de câncer de ovário derivados do p...
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Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
Visualizing DNA Damage Repair Proteins in Patient-Derived Ovarian Cancer Organoids via Immunofluorescence Assays

Visualizando proteínas de reparo de danos ao DNA em organoides de câncer de ovário derivados do paciente por meio de ensaios de imunofluorescência

Full Text
2,278 Views
04:07 min
February 24, 2023

DOI: 10.3791/64881-v

Lillian van Biljon1, Bisiayo Fashemi1, Jeimmy Rodriguez1, Olivia Graham1, Amanda Compadre1, Katherine Fuh1,2, Dineo Khabele1, Mary Mullen1

1Washington University in St. Louis, 2University of California San Francisco

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

O presente protocolo descreve métodos para avaliar proteínas de reparo de danos ao DNA em organoides de câncer de ovário derivados de pacientes. Aqui estão incluídos métodos abrangentes de chapeamento e coloração, bem como procedimentos de quantificação detalhados e objetivos.

O estudo da resposta a danos no DNA é necessário para entender a fisiopatologia dos potenciais biomarcadores do câncer de ovário em novas terapias-alvo. Esta técnica permite que a amostra permaneça intacta e permite o exame de antígenos em seu local de ação. Este protocolo é rápido e pode ser adaptado a qualquer antígeno passível de imunofluorescência.

Este método fornece informações sobre o câncer de ovário e os processos de reparo de danos ao DNA envolvidos na resistência quimioterápica e inibidora de PARP. Esses métodos podem ser aplicados a outras áreas de estudo que envolvem o uso de culturas 3D e organoides. Para começar, aspirar o meio dos organoides irradiados e incubados sem interromper a matriz 3D.

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