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DOI: 10.3791/64943-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Uma construção de carrinho simples, construída para realizar ecocardiografia de pesquisa em miniporcos acordados em pé, é descrita, juntamente com considerações de construção, técnicas de treinamento e imagens de ultrassom representativas.
O protocolo é significativo, pois permite a monitorização funcional cardíaca de alta fidelidade em modelos animais de grande porte para a avaliação pré-clínica da terapêutica cardiovascular. A principal vantagem da técnica é possibilitar a realização de procedimentos como o registro de ecocardiogramas em porcos acordados sem o uso de anestésicos. Quem demonstrará o procedimento serão Greg Brown, co-designer, Pia Balmaceda, bolsista de pós-doutorado, e Thuy Ha, especialista do Nora Eccles Harrison Cardiovascular Research and Training Institute.
Comece com o carrinho utilitário pesado pré-fabricado de três prateleiras com rodas de travamento. Viu a frente e a traseira do carrinho. Em seguida, substitua-os por tubos de PVC de 1,25 polegadas e portões de elo de corrente.
Reforce o carrinho com barras metálicas na parte inferior para manter a integridade do carrinho. Faça um orifício na parte superior do carrinho grande o suficiente para acomodar uma mão segurando uma sonda de ultrassom. Coloque uma tampa plástica encaixada na abertura.
Crie uma rampa metálica reforçada para montagem e desmontagem usando estoque de alumínio. Adicione estofamento de borracha removível para aderência usando parafusos e grommets. Insira pinos de 12 polegadas de comprimento e 3/8 polegadas nos mecanismos de dobradiça de PVC do lado esquerdo e direito Entalhe nos trilhos laterais para permitir configurações de largura para os portões laterais para melhorar a contenção e evitar que o animal se vire.
Para treinar os porcos a comer do cocho, encha-o com guloseimas congeladas e prolongue o tempo de pé dos porcos. Use combinações de alimentos como suco, bebida substituta de refeição, iogurte com cereais e ração padrão, biscoitos e barras de frutas. As refeições normais podem ser suspensas e alimentadas no cocho durante o período de ecocardiografia.
Antes de comer da engenhoca, introduziu os porcos a cochos congelados no chão para incentivar o reconhecimento do cocho como um provedor de tratamento de alto valor. Para treinar os porcos a aceitar ecocardiogramas em pé, comece introduzindo o porco na carroça, cercando a carroça com guloseimas de alto valor por um a dois dias. Introduza o porco na rampa colocando guloseimas ao longo da rampa por alguns dias.
Forneça recompensas adicionais quando um porco subir a rampa. Forneça os cochos congelados no portão da frente por dois a três dias. Permita que o porco fique em pé na carroça sem acionar seus freios laterais ou portões.
Em alguns dias, coloque a sonda de ultrassom com gel no porco para ajudá-lo a se acostumar com o contato com a sonda. Para obter imagens de ecocardiograma, obtenha imagens dos planos paraesternais das laterais do carrinho para as axilas direita e esquerda. As imagens de visão apical, modo B e modo M podem ser obtidas sondando através do assoalho do carrinho até a região subxifóide.
Imagens em eixo curto, transversal e modo-M foram obtidas pelos lados da carreta para análise do diâmetro interno do ventrículo esquerdo em sístole e diástole e posterior cálculo do volume de ejeção. A fração de ejeção gerada pelas sessões de eco sedado foi menor do que pelas sessões conscientes. Imagens modo-B em eixo longo paraesternal foram utilizadas para calcular os volumes de ejeção pelo método área/comprimento.
As frações de ejeção nas sessões sedada e consciente foram semelhantes. Uma coisa importante a lembrar é que o carrinho deve ser construído com o tamanho crescente dos animais em mente. A individualização da mistura de alimentos pode ajudar a melhorar a aclimatação.
O carrinho pode facilitar outros procedimentos, incluindo sangue coletado de cateteres de veia auricular implantados, gravação de eletrocardiograma e outros monitoramentos baseados em ultrassom, como ultrassom abdominal. Esta técnica oferece aos pesquisadores a oportunidade de obter dados fisiológicos chave de alta fidelidade de porcos acordados usados para estudos de várias doenças humanas.
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