Name: Coletando Parasitas de Peixes Isópodes Gnatiídeos Marinhos com Armadilhas de Luz (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-25T14:35:00.000+00:00
Duration: 6 min 43 s
Description: Aprenda a coletar isópodes gnatiídeos parasitas de peixes em recifes de coral usando armadilhas de luz submersas. Este método eficiente permite estudar a dinâmica populacional desses organismos noturnos em ecossistemas marinhos tropicais.

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O financiamento foi fornecido pela Fundação Nacional de Ciência dos EUA (NSF OCE 2023420 e DEB 2231250, P. Sikkel PI). Agradecemos ao município de Dumaguete City, Negros Oriental, Filipinas, pela permissão para realizar este estudo. Também agradecemos aos muitos voluntários por sua assistência de campo e à equipe e nossos colegas do Instituto de Ciências Ambientais e Marinhas da Universidade Silliman por seu apoio.

A coleta de amostras foi permitida pelo Department of Agriculture-Bureau of Fisheries and Aquatic Resources (0154-18 DA-BFAR) de acordo com as leis e regulamentos filipinos (RA 9147; FAO 233) e aprovado pelo comitê de ética animal da Silliman University (SU).
1. Armadilhas de Luz
<ol><li>Construção<ol><li>Construa armadilhas de luz a partir de tubos comerciais de cloreto de polivinila (PVC) originalmente projetados para encanamento. Utilizar PVC cortado de 10 a 15 cm de diâmetro até 30 a 40 cm de comprimento (Figura 1).</li>
		<li>Em ambas as extremidades dos tubos, adicionar "tampas" de PVC com funil de acrílico transparente inserido no centro da abertura e colar no local com cola epóxi transparente (Figura 1). Deixe secar.</li>
		<li>Certifique-se de que uma extremidade do tubo tenha uma tampa rosqueada ou removível e que ambas as extremidades sejam estanques, quando a armadilha estiver "fechada" (por exemplo, com a adição de um anel O).</li>
	</ol></li>
	<li>Luz<ol><li>Antes da implantação, acenda uma luz/tocha subaquática (ver Tabela de Materiais) e coloque-a no tubo, de frente para um dos funis transparentes, de modo que a luz da tocha subaquática ilumine a área à frente de um lado do tubo. Se necessário, bastões de brilho químicos podem ser usados no lugar de tochas subaquáticas, embora sua intensidade de luz seja menor. NOTA: A luz atrai uma variedade de pequenos organismos noturnos31, incluindo gnatiídeos, e os leva a nadar para dentro do tubo através do funil transparente. Uma vez que eles entraram no tubo, eles são incapazes de escapar devido à geometria do coletor de luz (pequena abertura do funil) e à presença contínua de uma fonte de luz.</li>
	</ol></li>
	<li>Colocação<ol><li>Quando estiver na água no local de implantação, encha armadilhas de luz, com a luz acesa, com água do mar, e proteja as duas extremidades. Para garantir que a tocha não esteja abaixo ou bloqueando a ponta do funil, incline a "frente" do tubo para cima para permitir que a tocha deslize para longe do funil.</li>
		<li>Coloque armadilhas no fundo do mar, na areia ou nos escombros, ao lado de cabeças de corais ou outras estruturas complexas conhecidas por atrair peixes. Focalize o cone de luz "para dentro", em direção às áreas onde os peixes se agregam. NOTA: Em águas rasas, as armadilhas podem ser colocadas por mergulho em apneia. Uma implantação mais profunda requer mergulho.</li>
	</ol></li>
	<li>Recuperação<ol><li>Imediatamente antes de recuperar a armadilha, sele as aberturas de ambos os funis (em cada extremidade do tubo) com um pedaço de argila modeladora ou borracha de vedação, mantendo toda a água do mar e os organismos contidos dentro. NOTA: Os organismos permanecerão na armadilha assim que as baterias das luzes expirarem e a luz não estiver mais acesa. Isso proporciona flexibilidade quando as armadilhas são recuperadas ("tempo de imersão"). Os fatores a serem considerados ao decidir sobre o tempo de imersão são apresentados a seguir (ver Discussão).</li>
	</ol></li>
	<li>Transporte<ol><li>Uma vez que as armadilhas tenham sido recuperadas do fundo, leve-as para um barco ou nade em terra.</li>
		<li>Mantenha as armadilhas próximas à temperatura ambiente da água do mar depois de removidas do oceano.</li>
		<li>Transporte-os para o laboratório para processamento o mais rápido possível, uma vez que nenhuma troca de gás ou água ocorrerá uma vez removido do oceano.</li>
	</ol></li>
</ol>2 Processamento laboratorial
<ol><li>Armazenamento e filtragem das amostras<ol><li>Uma vez que as armadilhas de luz são removidas do oceano e trazidas de volta ao laboratório, esvazie seu conteúdo em baldes com água doce do mar.</li>
		<li>Adicione aeração para manter os organismos vivos até a filtragem.</li>
		<li>Filtre o conteúdo do balde despejando através de um funil forrado com malha de plâncton de 50-100 μm e, em seguida, esvazie o conteúdo em um recipiente de 100 mL de água doce do mar.</li>
		<li>Use uma pipeta para extrair deste recipiente menor para colocar alíquotas da amostra em uma placa de Petri para microscopia. Repita até que toda a amostra tenha sido processada.</li>
	</ol></li>
	<li>Identificação e criação de isópodos gnatiídeos<ol><li>Como as amostras de armadilhas de luz atraem várias espécies de pequenos invertebrados, faça uma triagem cuidadosa das amostras para identificar e remover os isópodes gnatiídeos. O aumento de 10 a 20x é o melhor para essa tarefa (Figura 2). NOTA: A identificação de gnatiídeos a nível familiar não requer espécimes vivos. No entanto, os gnatiídeos adultos, que raramente são capturados em armadilhas luminosas, são necessários para a identificação morfológica das espécies e reprodução (ver referência 1,3,9 para uma metodologia de reprodução e criação de gnatiídeos em cativeiro).</li>
		<li>Nos casos em que os gnatiídeos precisam ser mantidos vivos para criação, remova-os suavemente com uma pipeta e coloque-os em pequenos recipientes plásticos de água doce do mar.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Sikkel, P. C., Welicky, R. L. The ecological significance of parasitic crustaceans. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSikkel%2C+PC+%22Parasitic+Crustacea%22">Parasitic Crustacea</a>. 17 (17), Springer. Cham. 421-477 (2019).</li>
<li>Svavarsson, J., Bruce, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+gnathiid+isopod+crustaceans+%28Cymothoida%29+from+Heron+Island+and+Wistari+Reef%2C+southern+Great+Barrier+Reef%5BTitle%5D)+AND+%22Zootaxa%22%5BJournal%5D)">New gnathiid isopod crustaceans (Cymothoida) from Heron Island and Wistari Reef, southern Great Barrier Reef.</a> Zootaxa. 4609 (1), 4609(2019).</li>
<li>Shodipo, M. O., Sikkel, P. C., Smit, N. J., Hadfield, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+record+and+molecular+characterisation+of+two+Gnathia+species+%28Crustacea%2C+Isopoda%2C+Gnathiidae%29+from+Philippine+coral+reefs%2C+including+a+summary+of+all+Central-Indo+Pacific+Gnathia+species%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+for+Parasitology%3A+Parasites+and+Wildlife%22%5BJournal%5D)">First record and molecular characterisation of two Gnathia species (Crustacea, Isopoda, Gnathiidae) from Philippine coral reefs, including a summary of all Central-Indo Pacific Gnathia species.</a> International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife. 14, 355-367 (2021).</li>
<li>Losey, G. S. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cleaning+symbiosis+in+Puerto+Rico+with+comparison+to+the+tropical+Pacific%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Cleaning symbiosis in Puerto Rico with comparison to the tropical Pacific.</a> 4 (4), 960-970 (1974).</li>
<li>Grutter, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parasite+infestation+increases+on+coral+reefs+without+cleaner+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Coral+Reefs%22%5BJournal%5D)">Parasite infestation increases on coral reefs without cleaner fish.</a> Coral Reefs. 37, 15-24 (2018).</li>
<li>Smit, N. J., Davies, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+curious+life-style+of+the+parasitic+stages+of+gnathiid+isopods%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Parasitology.+58%22%5BJournal%5D)">The curious life-style of the parasitic stages of gnathiid isopods.</a> Advances in Parasitology. 58. , 289-391 (2004).</li>
<li>Tanaka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life+history+of+gnathiid+isopods-current+knowledge+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Plankton+and+Benthos+Research%22%5BJournal%5D)">Life history of gnathiid isopods-current knowledge and future directions.</a> Plankton and Benthos Research. 2 (1), 1-11 (2007).</li>
<li>Sikkel, P. C., Schaumburg, C. S., Mathenia, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diel+infestation+dynamics+of+gnathiid+isopod+larvae+parasitic+on+Caribbean+reef+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Coral+Reefs%22%5BJournal%5D)">Diel infestation dynamics of gnathiid isopod larvae parasitic on Caribbean reef fish.</a> Coral Reefs. 25, 683-689 (2006).</li>
<li>Santos, T. R. N., Sikkel, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Habitat+associations+of+fish-parasitic+gnathiid+isopods+in+a+shallow+reef+system+in+the+central+Philippines%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Biodiversity%22%5BJournal%5D)">Habitat associations of fish-parasitic gnathiid isopods in a shallow reef system in the central Philippines.</a> Marine Biodiversity. 4, 83-96 (2019).</li>
<li>Nagel, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vision+in+host-finding+behaviour+of+the+ectoparasite+Gnathia+falcipenis+%28Crustacea%29%5BTitle%5D)+AND+%22Isopoda%29.+Marine+and+Freshwater+Behaviour+and+Physiology%22%5BJournal%5D)">The role of vision in host-finding behaviour of the ectoparasite Gnathia falcipenis (Crustacea).</a> Isopoda). Marine and Freshwater Behaviour and Physiology. 42 (1), 31-42 (2009).</li>
<li>Sikkel, P. C., Sears, W. T., Weldon, B., Tuttle, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+field+test+of+host-finding+mechanisms+in+a+Caribbean+gnathiid+isopod%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Biology%22%5BJournal%5D)">An experimental field test of host-finding mechanisms in a Caribbean gnathiid isopod.</a> Marine Biology. 158, 1075-1083 (2011).</li>
<li>Vondriska, C., Dixson, D. L., Packard, A. J., Sikkel, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentially+susceptible+host+fishes+exhibit+similar+chemo-attractiveness+to+a+common+coral+reef+ectoparasite%5BTitle%5D)+AND+%22Symbiosis%22%5BJournal%5D)">Differentially susceptible host fishes exhibit similar chemo-attractiveness to a common coral reef ectoparasite.</a> Symbiosis. 81 (3), 247-253 (2020).</li>
<li>Grutter, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parasite+infection+rather+than+tactile+stimulation+is+the+proximate+cause+of+cleaning+behaviour+in+reef+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+of+London.+Series+B%3A+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Parasite infection rather than tactile stimulation is the proximate cause of cleaning behaviour in reef fish.</a> Proceedings of the Royal Society of London. Series B: Biological Sciences. 268 (1474), 1361-1365 (2001).</li>
<li>Sikkel, P. C., Cheney, K. L., Côté, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+evidence+for+ectoparasites+as+a+proximate+cause+of+cleaning+interactions+in+reef+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">In situ evidence for ectoparasites as a proximate cause of cleaning interactions in reef fish.</a> Animal Behaviour. 68 (2), 241-247 (2004).</li>
<li>Sikkel, P. C., Herzlieb, S. E., Kramer, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compensatory+cleaner-seeking+behavior+following+spawning+in+female+yellowtail+damselfish%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Ecology+Progress+Series%22%5BJournal%5D)">Compensatory cleaner-seeking behavior following spawning in female yellowtail damselfish.</a> Marine Ecology Progress Series. , 1-11 (2005).</li>
<li>Triki, Z., Grutter, A. S., Bshary, R., Ros, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+short-term+exposure+to+ectoparasites+on+fish+cortisol+and+hematocrit+levels%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Biology%22%5BJournal%5D)">Effects of short-term exposure to ectoparasites on fish cortisol and hematocrit levels.</a> Marine Biology. 163, 1-6 (2016).</li>
<li>Hayes, P. M., Smit, N. J., Grutter, A. S., Davies, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unexpected+response+of+a+captive+blackeye+thicklip%2C+Hemigymnus+melapterus+%28Bloch%29%2C+from+Lizard+Island%2C+Australia%2C+exposed+to+juvenile+isopods+Gnathia+aureamaculosa+Ferreira+%26+Smit%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Diseases%22%5BJournal%5D)">Unexpected response of a captive blackeye thicklip, Hemigymnus melapterus (Bloch), from Lizard Island, Australia, exposed to juvenile isopods Gnathia aureamaculosa Ferreira & Smit.</a> Journal of Fish Diseases. 34 (7), 563-566 (2011).</li>
<li>Grutter, A. S., Pickering, J. L., McCallum, H., McCormick, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+micropredatory+gnathiid+isopods+on+young+coral+reef+fishes%5BTitle%5D)+AND+%22Coral+Reefs%22%5BJournal%5D)">Impact of micropredatory gnathiid isopods on young coral reef fishes.</a> Coral Reefs. 27 (3), 655-661 (2008).</li>
<li>Artim, J. M., Sellers, J. C., Sikkel, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropredation+by+gnathiid+isopods+on+settlement-stage+reef+fish+in+the+eastern+Caribbean+Sea%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+Marine+Science%22%5BJournal%5D)">Micropredation by gnathiid isopods on settlement-stage reef fish in the eastern Caribbean Sea.</a> Bulletin of Marine Science. 91 (4), 479-487 (2015).</li>
<li>Sellers, J. C., Holstein, D. M., Botha, T. L., Sikkel, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lethal+and+sublethal+impacts+of+a+micropredator+on+post-settlement+Caribbean+reef+fishes%5BTitle%5D)+AND+%22Oecologia%22%5BJournal%5D)">Lethal and sublethal impacts of a micropredator on post-settlement Caribbean reef fishes.</a> Oecologia. 189, 293-305 (2019).</li>
<li>Allan, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parasite+infection+directly+impacts+escape+response+and+stress+levels+in+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Parasite infection directly impacts escape response and stress levels in fish.</a> Journal of Experimental Biology. 223 (16), (2020).</li>
<li>Spitzer, C. A., Anderson, T. W., Sikkel, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Habitat+associations+and+impacts+on+a+juvenile+fish+host+by+a+temperate+gnathiid+isopod%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+for+Parasitology%3A+Parasites+and+Wildlife%22%5BJournal%5D)">Habitat associations and impacts on a juvenile fish host by a temperate gnathiid isopod.</a> International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife. 17, 65-73 (2022).</li>
<li>Sikkel, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nocturnal+migration+reduces+exposure+to+micropredation+in+a+coral+reef+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+Marine+Science%22%5BJournal%5D)">Nocturnal migration reduces exposure to micropredation in a coral reef fish.</a> Bulletin of Marine Science. 93 (2), 475-489 (2017).</li>
<li>Artim, J. M., Hook, A., Grippo, R. S., Sikkel, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predation+on+parasitic+gnathiid+isopods+on+coral+reefs%3A+a+comparison+of+Caribbean+cleaning+gobies+with+non-cleaning+microcarnivores%5BTitle%5D)+AND+%22Coral+Reefs%22%5BJournal%5D)">Predation on parasitic gnathiid isopods on coral reefs: a comparison of Caribbean cleaning gobies with non-cleaning microcarnivores.</a> Coral Reefs. 36, 1213-1223 (2017).</li>
<li>Artim, J. M., Sikkel, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+coral+repels+a+common+reef+fish+ectoparasite%5BTitle%5D)+AND+%22Coral+Reefs%22%5BJournal%5D)">Live coral repels a common reef fish ectoparasite.</a> Coral Reefs. 32, 487-494 (2013).</li>
<li>Paula, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+corals+on+the+abundance+of+a+fish+ectoparasite+in+the+Great+Barrier+Reef%5BTitle%5D)+AND+%22Coral+Reefs%22%5BJournal%5D)">The role of corals on the abundance of a fish ectoparasite in the Great Barrier Reef.</a> Coral Reefs. 40, 535-542 (2021).</li>
<li>Sikkel, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+abundance+of+fish-parasitic+gnathiid+isopods+associated+with+warm-water+bleaching+events+on+the+northern+Great+Barrier+Reef%5BTitle%5D)+AND+%22Coral+Reefs%22%5BJournal%5D)">Changes in abundance of fish-parasitic gnathiid isopods associated with warm-water bleaching events on the northern Great Barrier Reef.</a> Coral Reefs. 38 (4), 721-730 (2019).</li>
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<li>Artim, J. M., Nicholson, M. D., Hendrick, G. C., Brandt, M., Smith, T. B., Sikkel, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abundance+of+a+cryptic+generalist+parasite+reflects+degradation+of+an+ecosystem%5BTitle%5D)+AND+%22Ecosphere%22%5BJournal%5D)">Abundance of a cryptic generalist parasite reflects degradation of an ecosystem.</a> Ecosphere. 11 (10), (2020).</li>
<li>Richardson, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+continuous+plankton+recorder+data%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Oceanography%22%5BJournal%5D)">Using continuous plankton recorder data.</a> Progress in Oceanography. 68 (1), 27-74 (2006).</li>
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</ol>

Os autores declaram não fazer divulgações.

As armadilhas luminosas tradicionais, como as utilizadas para coleta de larvas de peixes, são grandes e estão suspensas na coluna d'água34. Em contraste, as armadilhas de luz descritas aqui são pequenas e implantadas no fundo do mar. Essas armadilhas podem ser facilmente transportadas e rapidamente implantadas. Eles podem ser colocados por apneia (livre) - mergulho em locais rasos (como neste estudo) ou em mergulho em locais mais profundos, e atrair tanto alimentados quanto não alimentados está...

Crustáceos parasitas são importantes na ecologia e história de vida de peixes recifais. A biomassa e a energia que removem de seus hospedeiros são consideráveis e influenciam o comportamento, a fisiologia e a sobrevivência1. Os crustáceos isópodos gnatiídeos representam o grupo mais proeminente de parasitos de peixes em sistemas recifais tropicais e subtropicais, onde são abundantes e diversos2,3 e são o principal item alimentar de peixes mais limpos 4,5. Os gnatiídeos têm geralmente 1-3 mm de tamanho. Possuem histórias de vida incomuns, nas quais apenas os três estágios juvenis se alimentam do sangue e fluidos corporais dos peixes 6,7. Eles são mais ativos à noite8,9 e, enquanto a visão parece desempenhar algum papel, o achado do hospedeiro 10 depende fortemente de pistas olfativas para encontrar hospedeiros11,12. Cada um dos três estágios alimentares juvenis alimenta-se de um único peixe hospedeiro, com cada alimento separado por uma fase de muda. Após a alimentação final, as larvas de terceiro estágio se metamorfoseiam em adultos não alimentados, que se reproduzem e morrem. Dado que a alimentação requer apenas uma breve associação com o hospedeiro, enquanto cada intervalo entre alimentação dura dias, os gnatiídeos passam a maior parte de sua vida vivendo livremente nos bentos.
Os gnatiídeos afetam os hospedeiros de várias maneiras1. Além de seu papel como indutores de interações entre peixes mais limpos e clientes 13,14,15, os gnatiídeos podem aumentar os níveis de cortisol e diminuir o hematócrito em hospedeiros adultos16 e, em grande número, podem até causar a morte 17. Para peixes juvenis, mesmo um único gnatídeo pode ser fatal18,19,20, e mesmo que o peixe sobreviva, sua capacidade de competir pelo espaço e escapar de predadores fica comprometida 20,21,22. Evitar os gnatiídeos pode até constituir um dos benefícios da migração noturna em alguns peixes recifais23.
Além de peixes mais limpos, as populações de gnatiídeos podem ser impactadas por outros microcarnívoros24, bem como por corais25,26. O aquecimento dos oceanos e a perda associada de corais vivos parecem ter impactos opostos sobre os gnatiídeos27,28,29.
Dada a sua clara importância ecológica e a provável influência das mudanças ambientais antropogênicas em suas populações, há razões convincentes para incluí-los em estudos ecológicos de recifes de coral. No entanto, sua história de vida única e o pequeno número de pesquisadores que os estudam criam uma barreira para o desenvolvimento, implementação e disseminação de métodos de amostragem confiáveis e reprodutíveis para coletá-los para pesquisa.
Armadilhas luminosas têm sido usadas há muito tempo para coletar pequenos organismos marinhos à noite30,31. Eles se aproveitam e se baseiam no fato de que muitos organismos noturnos ativos, incluindo artrópodes, são atraídos pela luz. Tradicionalmente eles têm sido usados para coletar organismos planctônicos na coluna de água30. No entanto, os princípios básicos podem ser aplicados à coleta de organismos de natação livre que estão ativos perto dos bentos. Aqui apresentamos um método de captura de luz adaptado para coletar estágios de vida livre de isópodes gnatiídeos perto do fundo do oceano em ambientes remotos de recifes de coral, como as Filipinas. Para a coleta em áreas remotas, essas armadilhas luminosas (Figura 1) oferecem algumas vantagens em relação a outros métodos desenvolvidos para a coleta desses organismos32. São altamente portáteis e duráveis, necessitando de apenas três peças, de fácil obtenção e de baixo custo. Eles também são negativamente flutuantes, pois quando implantados, eles são completamente preenchidos com água do mar. Por dependerem da luz para atração, só são eficazes à noite para a coleta de espécies noturnamente ativas. Eles também atraem mais do que as espécies-alvo, exigindo a triagem das amostras sob um escopo de dissecação para obter os organismos-alvo. Três métodos têm sido utilizados até o momento por nossa equipe e colaboradores para coletar gnatiídeos em sistemas recifais de coral em todo o mundo32. Estes incluem armadilhas de emergência, armadilhas com iscas de peixes vivos e armadilhas leves, cada uma com vantagens e limitações.

<table><tbody><tr><td>Baldes, pequenos recipientes</td><td></td> de amostra <td>loja</td><td></td></tr><tr><td>de ferragens Funis</td><td>Fornecedor nº 2209-03</td><td>Funis: AMERICAN SCIENTIFIC LLC SE&nbsp;-&nbsp; 75 mm (3")&nbsp;</td><td>https://us.vwr.com/store/product/8884369/plastic-funnels</td></tr><tr><td>Corpo principal de armadilhas de luz (feitas de tubos de PVC sanitários disponíveis comercialmente)</td> <td>(SKU 145640)&nbsp;</td><td>Tubos de PVC Sanitários Alasco Série 1000 107mm/4'&nbsp;</td><td>https://alascopvcpipes.com/product/alasco-standard-sanitary-upvc-pipe-series-1000/.&nbsp; Esta marca pode ser encontrada nas Filipinas. Outras marcas simular também podem ser usadas</td></tr><tr><td>Argila de modelar&nbsp;</td><td></td><td>Pode ser encontrado em lojas de brinquedos de suprimentos de arte e crianças</td><td>Para selar o funil após a recuperação</td></tr> da <tr><td>malha de plâncton (50-100 &micro; m)</td><td></td> <td>qualquer marca e fonte respeitável</td><td>https://www.adkinstruments.in/products/plankton-nets-in-various-mesh-size-1633936883</td></tr><tr><td>Tampas de rosca para a armadilha</td><td></td> de luz <td>Alasco&nbsp; Sanitário &nbsp; Limpeza&nbsp; 4 "</td><td>https://alascopvcpipes.com/product/alasco-standard-sanitary-upvc-clean-out/. Esta marca pode ser encontrada nas Filipinas. Outras marcas simular também podem ser usadas</td></tr><tr>Equipamento <td></td><td>de mergulho/snorkel</td><td>qualquer marca e fonte</td><td></td>respeitável</tr><tr><td>Stereo-microscópios</td><td></td><td>Fornecedores</td><td></td>científicos</tr><tr><td>Toques</td><td></td> subaquáticos <td>Princeton Tec Ecoflare ou&nbsp; Fantasea Nanospotter 6023</td><td></td></tr></tbody></table>

coletando parasitas de peixes isópodes gnatiídeos marinhos com armadilhas de luz

Collecting Marine Gnathiid Isopod Fish Parasites with Light Traps

Um método para coletar parasitas de peixes isópodos gnatiídeos marinhos com o uso de armadilhas luminosas é apresentado. Os isópodes gnatiídeos são um dos principais grupos de parasitas de peixes marinhos que se alimentam de sangue e fluido de peixes hospedeiros, principalmente à noite. Como carrapatos e mosquitos em terra, eles se associam apenas temporariamente com seu hospedeiro e passam a maior parte de sua vida livre nos bentos. Dada a sua alta mobilidade e associação transitória e predominantemente noturna com hospedeiros, eles não podem ser facilmente coletados capturando hospedeiros de vida livre. No entanto, eles são prontamente atraídos por fontes de luz subaquáticas, criando a oportunidade de coletá-los em armadilhas de luz. Aqui são descritos o projeto e as etapas individuais envolvidas na implantação e processamento de armadilhas luminosas especialmente adaptadas para a coleta de estágios de vida livre de isópodes gnatiídeos. Resultados amostrais e possíveis modificações do protocolo básico para uma variedade de diferentes necessidades de amostragem são apresentados e discutidos.

Para a amostragem nas Filipinas centrais, foi utilizado o delineamento de armadilhas (Figura 1). Quando 36 armadilhas foram colocadas durante a noite (em um local), 1 a 1343 gnatiídeos por armadilha (275 ± 54) foram coletados. Estes incluíram os estágios juvenis alimentados e não alimentados (Figura 2; Tabela 1, 2). Estes resultados demonstram a eficácia de armadilhas luminosas na coleta de isópodos gnatiídeos nas condições de estudo. <strong cl...

Apresentamos um método para coletar parasitas de peixes isópodes gnatiídeos marinhos usando armadilhas luminosas colocadas em locais de campo através de mergulho em apneia ou mergulho.

Coletando Parasitas de Peixes Isópodes Gnatiídeos Marinhos com Armadilhas de Luz

A method to collect marine gnathiid isopod fish parasites with the use of light traps is presented. Gnathiid isopods are a major group of marine fish ...

Crustáceos parasitas são fatores importantes na ecologia e história de vida de peixes recifais. Com a biomassa e energia que eles removeram de seus hospedeiros sendo considerável e influenciando o comportamento, fisiologia, e sobrevivência. Os crustáceos isópodes gnatiídeos representam o grupo mais proeminente de parasitas de peixes em sistemas recifais tropicais e subtropicais, onde são abundantes e diversificados e são o principal item alimentar de peixes mais limpos.Os gnatiídeos têm histórias de vida incomuns em que apenas os três estágios juvenis se alimentam de sangue e fluidos corporais de peixes, enquanto na fase adulta, eles não se alimentam mais. Dado que a alimentação requer apenas uma breve associação com o hospedeiro, enquanto cada intervalo de interalimentação dura dias, os gnatiídeos passam a maior parte de sua vida livre nos bentos. Dadas as muitas maneiras pelas quais os gnathiidae impactam seus hospedeiros, há razões convincentes para incluí-los em estudos ecológicos de recifes de coral.No entanto, sua história de vida única e o pequeno número de pesquisadores que os estudam criam uma barreira para o desenvolvimento, implementação e disseminação de métodos confiáveis de amostragem reprodutível para coletá-los para pesquisa. Armadilhas de luz têm sido usadas há muito tempo para coletar pequenos organismos marinhos à noite. Eles se aproveitam e se baseiam no fato de que muitos organismos noturnos ativos, incluindo artrópodes, são atraídos pela luz.Tradicionalmente, eles têm sido usados para coletar organismos planctônicos na coluna de água. No entanto, os princípios básicos podem ser aplicados à coleta de organismos nadadores livres que são ativos perto dos bentos. Aqui apresentamos um método de captura de luz adaptado para coletar estágios de vida livre de isópodes Gnathiid perto do fundo do oceano em ambientes remotos de recifes de coral, como as Filipinas.Na coleta de áreas remotas, essas armadilhas oferecem algumas vantagens sobre outros métodos que foram desenvolvidos para coletar esses organismos. Eles são altamente portáteis e duráveis e exigem apenas três peças, que são facilmente obtidas. Eles também estão negativamente aquecidos.Por dependerem da luz para a atração, só são eficazes à noite para a coleta de espécies noturnamente ativas. Eles também atraem mais do que as espécies-alvo, exigindo a triagem das amostras sob um microscópio dissecante para obter os organismos-alvo. Armadilhas luminosas. Construção.As armadilhas de luz são melhor construídas a partir de tubos de PVC comerciais originalmente projetados para fins de encanamento. Use PVC de 20 a 25 centímetros de diâmetro cortado de 30 a 40 centímetros de comprimento. Para ambas as extremidades do tubo, adicione tampas de PVC com funis de acrílico transparente inseridos no centro da abertura e cole no lugar com cola epóxi transparente.Certifique-se de que uma extremidade do tubo tenha um parafuso na tampa removível e que ambas as extremidades sejam estanques, quando a armadilha estiver fechada. Luz. Antes da implantação, uma tocha subaquática, como uma Fantasea nano spotter 6023, deve ser ligada e colocada no tubo voltado para o funil transparente, de modo que a luz da tocha subaquática ilumine o exterior na frente de um lado do tubo.A luz atrai uma variedade de pequenos organismos noturnos, incluindo gnathiids, e os leva a nadar no tubo com o funil claro. Uma vez que eles entraram no tubo, eles são incapazes de escapar devido à geometria da armadilha de luz e à presença contínua de uma fonte de luz. Colocação. Encha as armadilhas de luz com a luz acesa e com água do mar e prenda ambas as extremidades.Coloque armadilhas no fundo do mar na areia ou escombros ao lado de cabeças de corais ou outras estruturas complexas conhecidas por atrair peixes. Focalize o cone de luz para dentro em direção às áreas onde os peixes se agregam. Em águas rasas, as armadilhas podem ser colocadas por mergulho em apneia.Uma implantação mais profunda requer mergulho. Recuperação. Os organismos permanecerão na armadilha quando as baterias das luzes expirarem e a luz não estiver mais iluminada. Isso proporciona flexibilidade no tempo em que as armadilhas são recuperadas.Imediatamente antes de recuperar a armadilha, sele as aberturas de ambos os funis em cada extremidade do tubo com um pedaço de argila ou borracha de vedação, mantendo toda a água do mar e os organismos contidos dentro. Transporte. Uma vez que as armadilhas tenham sido recuperadas do fundo, elas podem ser transportadas por mergulhadores para um barco ou nadadas em terra. No entanto, é melhor manter as armadilhas o mais próximo possível da temperatura ambiente da água do mar, uma vez que tenham sido removidas do oceano.Transporte-os para o laboratório para processamento o mais rápido possível, uma vez que nenhuma troca de gás ou água ocorrerá uma vez removido do oceano. Processamento laboratorial. Armazenamento e filtragem de amostras.Uma vez que uma armadilha de luz é removida do oceano e trazida de volta ao laboratório, esvazie seu conteúdo em baldes com água doce do mar. Adicione aeração para manter os organismos vivos até a filtragem. Filtre o conteúdo da caçamba despejando através de um funil forrado com malha de plâncton de 50 a 100 UM.Em seguida, esvazie o conteúdo para um recipiente de cem mililitros de água do mar doce. Use uma pipeta para extrair deste pequeno recipiente para colocar alíquotas da amostra em uma placa de Petri para microscopia. Repita até que toda a amostra tenha sido processada.Identificação e criação de isópodos gnatiídeos. Como as amostras de armadilhas de luz atrairão várias espécies de pequenos invertebrados, as amostras devem ser cuidadosamente selecionadas para identificar e remover os isópodes Gnathiids. A ampliação de 10 a 20 vezes é a melhor para essa tarefa.A identificação de gnatiídeos em nível familiar não requer espécimes vivos. No entanto, gnatiídeos adultos, que raramente são capturados em armadilhas luminosas, são necessários para a identificação morfológica da espécie e para a reprodução. Assim, nos casos em que os gnathiidae precisam ser mantidos vivos de criação, retire-os suavemente com uma pipeta e coloque-os em pequenos recipientes plásticos de água doce do mar.Resultados representativos. Na amostragem central das Filipinas, o desenho de armadilhas delineadas foi usado quando as armadilhas foram colocadas durante a noite. Foram coletados de um a 1 343 gnatiídeos por armadilha.Estes incluíram estágios juvenis alimentados e não alimentados. Estes resultados demonstram claramente a eficácia de armadilhas luminosas na coleta de isópodos Gnathiidae nas condições de estudo. Este método para a coleta de Gnathiid é eficaz e suficientemente flexível para uma variedade de locais de campo e questões científicas.Por exemplo, em um estudo de Artim et al em 2020 no Caribe, onde eles usaram armadilhas de luz para quantificar a cobertura de corais e a biomassa de peixes na abundância de gnatídeos. Conclusão. Enquanto outras técnicas foram desenvolvidas e usadas para coletar gnathiids, esta técnica é particularmente eficiente. Embora as armadilhas luminosas aqui descritas atraiam uma ampla gama de pequenos invertebrados móveis, a composição desta captura acessória é altamente variável.No entanto, quando colocados em habitat que inclui escombros e peixes, os gnatiídeos são capturados de forma consistente. Embora este estudo de demonstração tenha se concentrado em locais nas Filipinas, armadilhas de design semelhante também foram usadas com sucesso para estudos em locais na região do Caribe e na Grande Barreira de Corais.

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Os ensaios comportamentais fornecem ferramentas poderosas para a compreensão da função neuronal. Aqui apresentamos vários protocolos para quantificar o comportamento alimentar predatório encontrado no nematóide modelo Pristionchus pacificus e seus parentes. Além disso, fornecemos métodos para analisar adaptações alimentares predatórias, incluindo estruturas bucais e dentes.

Ensaiar comportamentos alimentares predadores em<em&gt; Pristionchus</em&gt; E outros nematóides

Plâncton e partículas em suspensão desempenham um papel importante nos ciclos biogeoquímicos no oceano. Aqui, nós fornecemos um método ultra-limpo, baixo stress para a recolha de vários tamanhos de partículas e plâncton no mar com a capacidade de lidar com grandes volumes de água do mar.

Um aparelho ultra limpo Multicamado para coleta de plâncton marinho tamanho fracionado e partículas em suspensão

A abordagem de marcador trófica de ácido graxo, ou seja, a assimilação dos ácidos graxos como molécula inteira e transferência em tecido de consumidor com n ou menor modificação, é dificultado por lacunas de conhecimento no metabolismo de ácidos graxos de invertebrados de solo pequeno. Isotopólogo de criação de perfil é fornecida como uma valiosa ferramenta de desvencilhar interações tróficas.

Ácido graxo 13C Isotopólogo de criação de perfil fornece insights sobre transferência de carbono trófica e metabolismo lipídico dos consumidores invertebrados

O barnacle improvisus Balanus (Amphibalanus) é um modelo para o estudo de osmoregulação e anti-incrustantes. No entanto, desova sazonal natural produz um imprevisível suprimento de larvas cyprid. Aqui, um protocolo para o cultivo de todo o ano de b. improvisus é descrito, incluindo a produção de larvas. O uso de cracas cultivadas em estudos de expressão do gene é ilustrado.

A craca Balanus improvisus como modelo Marine - cultivo e expressão gênica

Peixe-zebra (Danio rerio) estão se tornando vertebrado modelo animal utilizado para colonização microbiana e patogénese. Este protocolo descreve o uso do protozoário Paramecium caudatum como um veículo para a infecção de origem alimentar em larvas de peixe-zebra. P. caudatum prontamente internaliza as bactérias e obter retomadas por larval zebrafish através de comportamento predando natural.

Usando o protozoário Paramecium caudatum como um veículo para infecções de origem alimentar em larvas de Zebrafish

O protocolo centra-se na coleta de amostras de tartarugas marinhas, descrevendo todos os passos da recuperação animal e necropsia para a classificação e quantificação do lixo marinho ingerido. Além disso, os resultados representativos mostram como usar os dados coletados para elaborar os possíveis limiares para o bom estado ambiental.

Coleta de dados sobre a ingestão de lixo marinho em tartarugas marinhas e limiares para bom estado ambiental

Aqui apresentamos um protocolo para uma única célula, técnica baseada em microscopia de epifluorescência para quantificar as taxas de pastejo em eucariontes predatórios aquáticos com alta precisão e resolução taxonômica.

Bactérias rotuladas fluorescently como um Tracer para revelar novas vias de fluxo de carbono orgânico em ecossistemas aquáticos

Este é um protocolo para modelar o espectro de tamanho (relação de dimensionamento entre massa individual e densidade populacional) para os dados combinados de peixes e invertebrados de córregos e rios wadable. Os métodos incluem: técnicas de campo para coletar amostras quantitativas de peixes e invertebrados; métodos de laboratório para padronizar os dados de campo; e análise estatística dos dados.

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Oikopleura dioica é um organismo modelo tunicate em vários campos da biologia. Descrevemos métodos de amostragem, identificação de espécies, configuração de cultivo e protocolos de cultivo para os animais e alimentação de algas. Destacamos fatores-chave que ajudaram a fortalecer o sistema cultural e discutir os possíveis problemas e resoluções.

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Levantamentos de arrasto óptico de peixes de baixo: Um levantamento de vídeo de arrasto do bacalhau atlântico do Golfo do Maine Ocidental (Gadus morhua)

Aprenda a coletar isópodes gnatiídeos parasitas de peixes em recifes de coral usando armadilhas de luz submersas. Este método eficiente permite estudar a dinâmica populacional desses organismos noturnos em ecossistemas marinhos tropicais.

Coletando Parasitas de Peixes Isópodes Gnatiídeos Marinhos com Armadilhas de Luz

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