Otimização da tecnologia de processamento de óleo de carneiro Epimedii folium e teste de seu efeito no desenvolvimento embrionário do peixe-zebra
March 17th, 2023
Neste protocolo, a tecnologia de processamento de óleo de carneiro de Epimedii folium (EF) foi otimizada pela aplicação de uma metodologia experimental de superfície de resposta e delineamento Box-Behnken, e o efeito da FE bruta e otimizada extraída em água sobre o desenvolvimento embrionário do zebrafish foi preliminarmente investigado.
Neste estudo, adotamos um método de processamento amplamente utilizado e adquirimos uma técnica persistente estável e confiável. O resultado mostrou que a toxicidade do Epimedii processado foi reduzida. O método de superfície de resposta requer menos experimentos e ciclos mais curtos, o que não apenas evita os problemas existentes na estatística matemática tradicional, mas também ajuda os usuários a selecionar as condições ideais.
Este método também pode ser amplamente utilizado na indústria química, engenharia biológica, indústria de alimentos, preparação de medicina chinesa, extração de medicina chinesa, e assim por diante. Depois de preparar a solução e realizar a cromatografia, selecione os parâmetros-chave no processamento de EF, como a quantidade de óleo de carneiro, a temperatura do óleo de carneiro e a temperatura de fritura como fatores influentes. Use as pontuações abrangentes do conteúdo de icariin, EA, EB, EC e BI como índices de avaliação.
Use o software de análise de superfície de resposta para projetar os experimentos de superfície de resposta Box-Behnken, explorar a superfície de resposta quadrática e construir um modelo polinomial de segunda ordem. Selecione o novo design Box-Behnken e defina a opção de fatores numéricos como três. Defina os fatores A, B e C.Clique em continuar, defina a opção de respostas como uma e clique em continuar para concluir o design.
Processe o EF de acordo com os parâmetros específicos, por exemplo, para o número de ordem um, onde o óleo de carneiro refinado como 15% volume por volume, e depois aqueça-o a 50 graus Celsius para derretê-lo. Adicione o EF bruto ao carneiro derretido. Mexa em fogo brando até ficar uniformemente brilhante, depois retire e arrefeça o EF. Preparar as soluções de teste dos produtos processados e analisá-las usando HPLC conforme descrito no manuscrito.
Registre os tempos de retenção e as áreas de pico de cada composição química e calcule os teores de icariin, EA, EB, EC e BI em cada solução de teste em relação a uma curva padrão externa. Calcular os escores abrangentes dos 17 grupos experimentais usando a fórmula de cálculo de pontuação abrangente. Importe os resultados abrangentes da pontuação para os 17 grupos de experimentos para o software de análise de dados para analisar os dados experimentais.
Nos itens de avaliação, selecione a opção de ordem de processo quadrática e a opção de tipo de modelo polinomial. A superfície de resposta da quantidade de óleo de carneiro e da temperatura de fritura foi mais íngreme em comparação com os outros fatores testados, e as curvas de nível tenderam a ser mais elípticas, indicando que a interação entre esses dois fatores foi mais significativa do que as interações entre outros fatores. O cromatograma por HPLC da substância de referência mista, dos produtos processados brutos Epimedii Folium e Epimedii Folium, demonstra que o teor de BI na FE bruta é baixo, enquanto aumenta após o processamento.
O grupo bruto mostra deformidades óbvias da coluna vertebral, curvatura corporal, edema pericárdico e deformação hepática na concentração de 150 microgramas por mililitro da droga, enquanto essas alterações foram raras em peixes juvenis no grupo processado. Todos os peixes-zebra no grupo da droga bruta morreram 24 horas após a administração de 200 microgramas por mililitro da droga, enquanto a mortalidade no grupo processado foi de apenas 6,67%A administração de 200 microgramas por mililitro da FE causou a morte de todos os peixes-zebra no grupo da droga bruta após 72 horas, enquanto no grupo processado, 500 microgramas por mililitro da FE causou a morte de todos os peixes-zebra. A mediana da concentração letal dos dois grupos experimentais 72 horas após a fertilização mostrou que a CL 50 foi de 151,3 microgramas por mililitro no grupo bruto e de 219,8 microgramas por mililitro no grupo processado.
A coisa mais importante no experimento é selecionar fatores do método de superfície de resposta e determinar os parâmetros desses fatores.
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Visão Geral
Este estudo otimizou a tecnologia de processamento de óleo de carneiro do Epimedii folium (EF) usando um design experimental Box-Behnken. Os efeitos de EF extraído em água, tanto cru quanto otimizado, no desenvolvimento embrionário do peixe-zebra foram preliminarmente investigados.
Componentes Principais do Estudo
Área da Ciência
- Neurociência
- Biotecnologia
- Farmacologia
Contexto
- Epimedii folium é tradicionalmente usado na medicina chinesa.
- Métodos de processamento podem influenciar a eficácia e segurança dos extratos de ervas.
- A metodologia de superfície de resposta é uma técnica estatística para otimizar processos.
- Reduzir a toxicidade enquanto mantém propriedades benéficas é crucial para preparações de ervas.
Propósito do Estudo
- Otimizar o processamento de Epimedii folium usando óleo de carneiro.
- Avaliar os efeitos do EF processado no desenvolvimento embrionário do peixe-zebra.
- Estabelecer um método confiável para avaliar a segurança de extratos de ervas.
Métodos Utilizados
- Design experimental Box-Behnken para otimização.
- Avaliação de parâmetros-chave de processamento, como quantidade e temperatura do óleo de carneiro.
- Avaliação da toxicidade do EF processado versus cru.
- Uso de cromatografia para analisar compostos ativos.
Principais Resultados
- O processamento otimizado reduziu a toxicidade do Epimedii folium.
- Parâmetros-chave influenciaram significativamente a qualidade do extrato.
- O método de superfície de resposta provou ser eficiente na otimização das condições.
- Descobertas preliminares sugerem benefícios potenciais para o desenvolvimento embrionário.
Conclusões
- O estudo otimizou com sucesso o processamento de EF com toxicidade reduzida.
- A metodologia de superfície de resposta é uma ferramenta valiosa na otimização de extratos de ervas.
- Pesquisas adicionais são necessárias para entender completamente as implicações para o desenvolvimento.
Perguntas Frequentes
Chapters in this video
0:04
Introduction
0:58
Optimization of the Epimedii Folium (E‐F) Mutton‐Oil Processing Technology Using the Box‐Behnken Design‐Response Surface Methodology
3:33
Results: Analysis of the Processed Mutton Oil and its Effect on the Embryonic Development of Zebrafish
5:35
Conclusion
