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DOI: 10.3791/65184-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a series of assays designed to measure mitochondrial function in mammalian cells, particularly under hypoxic conditions. The methods developed allow researchers to assess mitochondrial activity without relying solely on oxygen consumption.
Aqui, apresentamos uma compilação de ensaios para medir diretamente a função mitocondrial em células de mamíferos, independentemente de sua capacidade de consumir oxigênio molecular.
Nossa pesquisa se concentra em como as mitocôndrias sentem e se adaptam aos estressores metabólicos. Um dos principais estressores metabólicos é a hipóxia, que ocorre quando as células estão carentes de oxigênio. Estamos desenvolvendo melhores ensaios para estudar a função mitocondrial em ambientes com baixo teor de oxigênio.
Espectrometria de massa de maior resolução foi empregada para estudar os níveis de metabólitos celulares e teciduais. Usamos estudos de rastreamento de isótopos estáveis para rastrear o destino de metabólitos específicos e descobrir novas vias metabólicas relevantes para a fisiologia de mamíferos saudáveis e doentes. Grupo descobriu que mitocôndrias de mamíferos podem sustentar funções críticas em ambientes com baixo teor de oxigênio.
Mecanisticamente, eles empregam fumarato como um cetro eletrônico alternativo para a cadeia de transporte de elétrons. Este protocolo compila vários ensaios que os pesquisadores podem usar para avaliar melhor a função mitocondrial em células de mamíferos. É importante ressaltar que esses protocolos podem ser usados para estudar a função mitocondrial na hipóxia, já que os experimentos clássicos de respirometria não serão suficientes.
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