O escopo de nossa pesquisa é tentar descobrir mecanismos que promovem a disseminação de células de glioblastoma no tecido cerebral. Questões específicas giram em torno de diferenças nos tipos ou estados celulares de glioblastoma e mecanismos moleculares que promovem essas células a serem altamente invasivas. Por exemplo, como a expressão L1CAM promove invasividade?
Tanto os modelos in vitro quanto os in vivo são insuficientes para analisar com precisão o comportamento celular do glioblastoma. Modelos in vitro quase certamente modificam e simplificam demais o comportamento celular in vivo. Enquanto os modelos in vivo não permitem a observação fácil dos comportamentos à medida que ocorrem, em vez disso, permitem análises após os comportamentos terem ocorrido.
Nós mostramos que o cérebro do embrião de pintinho é um bom modelo para estudar o comportamento de células cancerosas cerebrais humanas tanto em culturas de fatias in vivo quanto em culturas de fatias ex-vivo. Também estabelecemos que a expressão de L1CAM por células de glioblastoma pode ter efeitos profundos na proliferação, invasão e arranjo celular dentro do tumor. Além de várias vantagens do uso de embriões de pintinhos, nosso protocolo esferoide ex-vivo introduz células em fatias vivas sem danos adicionais, enquanto outros métodos de introdução celular envolvem perfuração do tecido e implantação de células.
Além disso, o protocolo permite imagens em tempo real que as técnicas in vivo não permitem. Nossos resultados sugerem que o embrião de pintinho é um bom modelo para a pesquisa do câncer, particularmente o câncer cerebral, e é extremamente benéfico para a comunidade científica, pois está muito mais prontamente disponível para aqueles que podem não ter os fundos, instalações ou experiência para modelos de roedores. Continuaremos a nos concentrar em mecanismos moleculares que controlam a invasividade celular de glioblastoma no tecido cerebral, particularmente ao longo dos vasos sanguíneos.
Outra questão crucial é se as células-tronco de glioblastoma são um fenótipo distinto e estável ou um estado funcional que pode ser adotado quando necessário. Isso tem enormes implicações para os tratamentos.
Pastorino, N. G., Tomatsu, S., Lin, A., Doerr, J., Waterman, Z., Sershen, K., Ray, P., Rodriguez, A., Galileo, D. S. Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior. J. Vis. Exp. (195), e65199, doi:10.3791/65199 (2023).