Isolamento sem etiquetas em duas etapas de mitocôndrias para melhor descoberta e quantificação de proteínas

Nosso laboratório estuda as mudanças nas mitocôndrias e no metabolismo energético e como elas afetam processos saudáveis e patológicos, como ativação imunológica, câncer ou distúrbios metabólicos. Nosso objetivo é ajudar a desenvolver novos tratamentos para uma ampla variedade de doenças, proporcionando uma melhor compreensão da função mitocondrial e do metabolismo energético. Ferramentas como proteômica baseada em espectrometria de massa, metabolômica e triagem genética CRISPR-Cas9 estão se tornando mais populares para identificar mecanismos moleculares na função mitocondrial e no metabolismo energético em tipos e ambientes celulares específicos.

Em contraste com outros métodos, nosso protocolo emprega duas etapas de purificação, centrifugação diferencial e captura imune para isolamento mitocondrial. Isso oferece várias vantagens, como melhor remoção de contaminantes, e também é uma ferramenta poderosa para identificar novas proteínas mitocondriais. Nosso protocolo fornece informações sobre a composição e, portanto, a função mitocondrial em diferentes tipos celulares e ambientes.

Isso pode nos ajudar a entender melhor processos normais, como a ativação imunológica, mas também processos patológicos, como o câncer. Vamos nos concentrar em macrófagos mitocondriais. Vamos testar como a composição das mitocôndrias muda durante a resposta imune para entender melhor sua função.

Nossos achados poderiam levar ao desenvolvimento de drogas com, por exemplo, efeitos anti-inflamatórios.