Name: Perfusão hepática isolada normotérmica suína (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-09T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Aprenda a perfusão hepática isolada normotérmica em modelo suíno para preservação de enxertos de alto risco. Este método permite avaliar viabilidade e reduzir lesão hepatocelular antes do transplante.

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<meta charset="utf8"></head><body>Desenvolvimento e validação de um modelo de perfusão hepática isolada ex situ porcina

<ol><li>Dunson, J. R., Bakhtiyar, S. S., Joshi, M., Goss, J. A., Rana, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intent-to-treat+survival+in+liver+transplantation+has+not+improved+in+3+decades+due+to+donor+shortage+relative+to+waitlist+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Intent-to-treat survival in liver transplantation has not improved in 3 decades due to donor shortage relative to waitlist growth.</a> Clinical Transplantation. 35 (10), e14433(2021).</li>
<li>Monbaliu, D., Pirenne, J., Talbot, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+using+donation+after+cardiac+death+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation using donation after cardiac death donors.</a> Journal of Hepatology. 56 (2), 474-485 (2012).</li>
<li>Croome, K. P., Taner, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+landscapes+in+DCD+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Transplantation+Reports%22%5BJournal%5D)">The changing landscapes in DCD liver transplantation.</a> Current Transplantation Reports. 7 (3), 194-204 (2020).</li>
<li>Coffey, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+functional+warm+ischemia+time+on+DCD+liver+transplant+recipients%27+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The influence of functional warm ischemia time on DCD liver transplant recipients' outcomes.</a> Clinical Transplantation. 31 (10), (2017).</li>
<li>Meurisse, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcomes+of+liver+transplantations+using+donations+after+circulatory+death%3A+A+single-center+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Outcomes of liver transplantations using donations after circulatory death: A single-center experience.</a> Transplantation Proceedings. 44 (9), 2868-2873 (2012).</li>
<li>Ruck, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+trends+in+utilization+and+outcomes+of+DCD+livers+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Temporal trends in utilization and outcomes of DCD livers in the United States.</a> Transplantation. 106 (3), 543-551 (2022).</li>
<li>Nasralla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized+trial+of+normothermic+preservation+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A randomized trial of normothermic preservation in liver transplantation.</a> Nature. 557 (7703), 50-56 (2018).</li>
<li>Blondeel, J., Monbaliu, D., Gilbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+liver+preservation%3A+Are+we+still+missing+pieces+of+the+puzzle%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">Dynamic liver preservation: Are we still missing pieces of the puzzle.</a> Artificial Organs. 47 (2), 248-259 (2022).</li>
<li>Gilbo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+liver+normothermic+machine+perfusion%3A+Methodological+framework+and+potential+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Direct%22%5BJournal%5D)">Porcine liver normothermic machine perfusion: Methodological framework and potential pitfalls.</a> Transplantation Direct. 8 (1), e1276(2021).</li>
<li>Maione, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+isolated+liver+perfusion+for+the+study+of+ischemia+reperfusion+injury%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Porcine isolated liver perfusion for the study of ischemia reperfusion injury: A systematic review.</a> Transplantation. 102 (7), 1039-1049 (2018).</li>
<li>Gilbo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coagulation+factors+accumulate+during+normothermic+liver+machine+perfusion+regardless+of+donor+type+and+severity+of+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Coagulation factors accumulate during normothermic liver machine perfusion regardless of donor type and severity of ischemic injury.</a> Transplantation. 106 (3), 510-518 (2021).</li>
<li>Butler, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+extracorporeal+porcine+liver+perfusion+for+72+hr%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Successful extracorporeal porcine liver perfusion for 72 hr.</a> Transplantation. 73 (8), 1212-1218 (2002).</li>
<li>Eshmuminov, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+perfusion+machine+preserves+injured+human+livers+for+1+week%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">An integrated perfusion machine preserves injured human livers for 1 week.</a> Nature Biotechnology. 38 (2), 189-198 (2020).</li>
<li>Xu, J., Buchwald, J. E., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+current+machine+perfusion+therapeutics+for+organ+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Review of current machine perfusion therapeutics for organ preservation.</a> Transplantation. 104 (9), 1792-1803 (2020).</li>
<li>Martins, P. N., Turco, S. D., Gilbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+therapeutics+during+ex-situ+dynamic+preservation.+a+look+into+the+future%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Organ therapeutics during ex-situ dynamic preservation. a look into the future.</a> European Journal of Transplantation. 1, 63-78 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Bomba de seringa Alaris GH Plus</td><td>BD Care Fusion</td><td>80023 ONU 01-G</td><td></td></tr><tr><td>Aparelho de anestesia</td><td>Dr&auml; Ger</td><td>Tito</td><td></td></tr><tr><td>Cateter arterial Cavafix Certo</td><td>Braun, Melsungen, Alemanha</td><td>BRAU4152557</td><td></td></tr><tr><td>Analisador de gases sanguíneos</td><td>Radiometer</td><td>ABL815</td><td></td></tr><tr><td>Gluconato de cálcio 10%</td><td>Braun, Melsungen, Alemanha</td><td>570/13596667/1214</td><td></td></tr><tr><td>Capnógrafo</td><td>Dr&auml; Ger</td><td>Scio</td><td></td></tr><tr><td>Economia de células</td><td>Medtronic</td><td>AutoLog</td><td></td></tr><tr><td>Bomba centrífuga Biomedicus</td><td>Medtronic</td><td>85315 REV 3.0</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga Rotina 420R Hettich</td><td>VWR</td><td>521-1156</td><td></td></tr><tr><td>Circuito de perfusão feito sob medida</td><td>Medtronic</td><td>M323901C</td><td></td></tr><tr><td>Protetor de célula de conjunto descartável</td><td>Medtronic</td><td>ATLS24</td><td></td></tr><tr><td>DLP Cânula venosa de estágio único, reta 20F</td><td>Medtronic</td><td>66120</td><td></td></tr><tr><td>Epoprostenol</td><td>GlaxoSmithKline Bélgica, Wavre, Bélgica</td><td>Flolan</td><td></td></tr><tr><td>Fentanil-Janssen 0,05 mg/mL</td><td>Janssen</td><td>HK-08700</td><td></td></tr><tr><td>Sensor de fluxo BioPro TT</td><td>Em-Tec</td><td>12271</td><td></td></tr><tr><td>Formaldeído 4%</td><td>VWR</td><td>VWRK4078.9005</td><td></td></tr><tr><td>Congelador -80 &deg; C</td><td>Científico de New Brunswick</td><td>U570-86</td><td></td></tr><tr><td>Geladeira</td><td>Liebherr</td><td>COPO 3513</td><td></td></tr><tr><td>Geloplasma</td><td>Fresenius-Kabi, Bad Homburg, Alemanha</td><td>Flex livre</td><td></td></tr><tr><td>Resfriador de aquecedor</td><td>St&ouml; ckert-Shiley, grupo de Sorin</td><td>16-02-1950</td><td></td></tr><tr><td>Heparina 5000 IE/mL</td><td>Leo Pharma, Ballerup, Dinamarca</td><td>HeparinLeo</td><td></td></tr><tr><td>Cânula da artéria hepática</td><td>Medtronic</td><td>BIO-MEDICUS 12F</td><td></td></tr><tr><td>Solução de preservação de órgãos IGL-1</td><td>Instituto Georges Lopez</td><td>IGL-1/1000/D</td><td></td></tr><tr><td>Analisador de gases sanguíneos em linha</td><td>TERUMO</td><td>Calibrador 3MCDI 540/CDI 500</td><td></td></tr><tr><td>Insulina 200 UI Actrapid</td><td>Novo Nordisk, Dagsvaerd, Dinamarca</td><td>MEDI-00018</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano 1000 mg/g Vapor por inalação</td><td>Chanelle Pharma</td><td>Iso-Vet</td><td></td></tr><tr><td>cateter intravenoso BD Insyte-W 20 G</td><td>BD</td><td>381334</td><td></td></tr><tr><td>Tanque de nitrogênio líquido</td><td>Isoterma KGW</td><td>S22</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 250CM M3 USP2 / 0 ligapak não agulhado</td><td>JNJ médico</td><td>F4503</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 250CM M3.5 USP0 ligapak não agulhado</td><td>JNJ médico</td><td>Rolamento F4504</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 5X70CM M3.5 USP0 não agulhado</td><td>JNJ médico</td><td>EH6935H</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 6X45CM M3 USP2/0 não agulhado</td><td>JNJ médico</td><td>EH6734H</td><td></td></tr><tr><td>Micro pipetas 1000 &micro; L</td><td>Socorex</td><td>82,51,000</td><td></td></tr><tr><td>Monitorização</td><td>Siemens</td><td>SC 8000</td><td></td></tr><tr><td>Plasmalyte Viaflo</td><td>Baxter</td><td>Plasmalyte Viaflo</td><td></td></tr><tr><td>Cânula da veia porta</td><td>LABORATÓRIOS CALMOS</td><td>18F RV-40018</td><td></td></tr><tr><td>Sensor de pressão</td><td>St&ouml; ckert-Shiley, grupo de Sorin</td><td>22-06-2000</td><td></td></tr><tr><td>Servorregulador de pressão</td><td>Medtronic</td><td>BM 9505-2</td><td></td></tr><tr><td>Prolene 4-0</td><td>JNJ médico</td><td>EH7151H</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de rolos</td><td>Cobe Century EUA</td><td>468048-000 REV C</td><td></td></tr><tr><td>Bicarbonato de sódio 8,4%</td><td>Braun, Melsungen, Alemanha</td><td>362 2339</td><td></td></tr><tr><td>Taurocolato de sódio</td><td>Sigma Aldrich, Burlington, EUA</td><td>86339</td><td></td></tr><tr><td>Bisturi cirúrgico nº 24</td><td>Swann Morton</td><td>0211</td><td></td></tr><tr><td>Cateter venoso, 3 lúmens; 12FR</td><td>FLECHA</td><td>AK-12123-F</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl Vio 250CM M2 USP3 / 0 gigapak não agulhado</td><td>JNJ médico</td><td>V1205G</td><td></td></tr><tr><td>Xilazina 2%</td><td>VMD Pecuária farmacêutica</td><td>XYL-M 2%</td><td></td></tr><tr><td>Zinacef Cefuroxima 750 mg</td><td>GlaxoSmithKline Bélgica, Wavre, Bélgica</td><td>NDC 0173-0353-32</td><td></td></tr><tr><td>Zoletil 100</td><td>Virbac</td><td>Zoletil 100</td><td></td></tr></tbody></table>

perfusão hepática isolada normotérmica suína

Porcine Normothermic Isolated Liver Perfusion

O protocolo de perfusão apresentado utiliza a autorregulação do fluxo sanguíneo hepático para atingir condições hemodinâmicas estáveis por até 24 h e simular a distribuição fisiológica do fluxo sanguíneo na veia porta e na artéria hepática. A Figura 1 representa uma visão geral esquemática do circuito de perfusão. A Figura 2A mostra uma distribuição consistente do fluxo sanguíneo, com a veia porta e a artéria hepática contribuindo com aproximadamente 75% e 25% d...

Perfusão hepática isolada normotérmica suína

Porcine models of liver ex situ normothermic machine perfusion (NMP) are increasingly being used in transplant research. Contrary to rodents, porcine ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Uma técnica para o isolamento de fibroblastos portal a partir de fígado de rato é descrito. Os fígados são perfundidos e...

Isolamento de fibroblastos de rato por Portal<em&gt; In situ</em&gt; Perfusão de fígado

O estudo da fisiologia dos órgãos animais pode ser realizado através da realização de um sistema experimental de perfusão ex vivo. A adição de um rim suíno, como órgão homeostático ao nosso modelo de perfusão hepática ex vivo desenvolvido anteriormente, pode ser um passo fundamental para alcançar um melhor ambiente fisiológico.

Etapas para o experimento autólogo ex vivo perfundido de fígado-rim suíno

Enxertos marginais, tais como fígado gorduroso, enxertos de doadores mais velhos, ou fígados recuperados após a morte cardíaca (DCD) tolerar estática de armazenagem convencional, o frio só mal. Foi desenvolvido um novo modelo de subnormothermic ex vivo de perfusão hepática para a preservação, avaliação e reparo de enxertos de fígado marginais antes do transplante.

Técnica de Subnormothermic<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Fígado de Perfusão para o armazenamento, Avaliação e Reparação de enxertos de fígado Marginal

Descreve-se um método de perfusão ex vivo máquina de enxertos de fígado humano à temperatura subnormothermic (21 ° C).

Fígado Preservação Human Funcional e cobrança através de Subnormothermic Máquina de Perfusão

Há uma escassez de doadores de fígado significativo, e expandiram-se critérios para doadores de fígado. Normotérmica ex vivo fígado perfusão (NEVLP) foi desenvolvido para avaliar e modificar a função do órgão. Este estudo demonstra um modelo do rato de NEVLP e testa a capacidade do peguilado-catalase, para atenuar a lesão hepática de preservação.

Um pequeno modelo Animal de perfusão de fígado normotérmica Ex Vivo

Este protocolo detalha o uso de um cateter intravenoso especial, tubos descartáveis estéreis padronizados, controle de temperatura complementado por monitoramento em tempo real e um sistema de alarme para procedimento de perfusão de colagem em duas etapas para melhorar a consistência na viabilidade, rendimento e funcionalidade de hepatócitos primários isolados.

Isolamento de Hepatócitos Primários de Ratos com Controle de Perfusão Multiparâmetro

Neste protocolo, descreve-se um modelo de transplante hepático ortotópico suíno após armazenamento a frio estático de órgãos doadores por 20 h sem o uso de bypass venovenoso durante o enxerto. A abordagem utiliza uma técnica cirúrgica simplificada com minimização da fase anhepática e manejo sofisticado do volume e vasopressor.

Transplante de fígado suíno sem bypass venovenoso como um modelo de doador de critérios estendidos

Um sistema normotérmico ex vivo de perfusão hepática (NEVLP) foi criado para fígados de camundongos. Este sistema requer experiência em microcirurgia, mas permite resultados reprodutíveis de perfusão. A capacidade de utilizar fígados de camundongos facilita a investigação de vias moleculares para identificar novos aditivos de perfusato e permite a execução de experimentos focados no reparo de órgãos.

Perfusão de máquina hepática normotérmica ex vivo em camundongos

Este protocolo descreve a metodologia de estabelecimento de um modelo suíno utilizando Perfusão de Máquina (MP) com temperatura controlada variável para a preservação do fígado do doador, seguido de transplante hepático ortotópico (OLTx). Tem como objetivo promover a taxa de sucesso do OLTx usando doação de doador após morte circulatória (DCD) hepática e estabelecer um modelo estável.

Preservação da Doação de Suínos após Morte Circulatória (DCD) Hepática por Perfusão e Transplante Hepático Ortotópico

Aqui, apresentamos um protocolo para um sistema de perfusão ex vivo normotérmico modificável e de código aberto, projetado para superar o alto custo e a flexibilidade limitada das plataformas existentes, permitindo um uso mais acessível, econômico e iterativo na pesquisa biomédica pré-clínica.

Um sistema de perfusão normotérmica de código aberto projetado para cientistas pesquisadores

Aprenda a perfusão hepática isolada normotérmica em modelo suíno para preservação de enxertos de alto risco. Este método permite avaliar viabilidade e reduzir lesão hepatocelular antes do transplante.

Perfusão hepática isolada normotérmica suína

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