Indução de pseudogravidez em camundongos fêmeas sem a necessidade de machos vasectomizados antes da transferência não cirúrgica de embriões ou inseminação artificial
July 7th, 2023
O método de manipulação cervical apresentado pode induzir pseudogestantes em camundongos sem a necessidade de fêmeas reprodutoras com machos vasectomizados. A indução da pseudogravidez é necessária para o sucesso da transferência não cirúrgica de embriões e da inseminação artificial não cirúrgica, ambas também apresentadas.
Nosso foco principal de pesquisa é o desenvolvimento de técnicas de reprodução assistida que proporcionem refinamentos e reduções de acordo com os 3Rs da experimentação animal. Desenvolvemos procedimentos não cirúrgicos de transferência de embriões e inseminação artificial não cirúrgicos para camundongos e um procedimento não cirúrgico de transferência de embriões para ratos. Com a adição do procedimento de manipulação cervical para fornecer fêmeas pseudo grávidas, criamos melhorias de 3Rs e reprodução assistida em roedores.
Os protocolos aqui descritos fornecem métodos simplificados para a recuperação de filhotes usando métodos não cirúrgicos de transferência de embriões e inseminação artificial em camundongos. O protocolo de manipulação cervical proporciona um refinamento dos procedimentos de produção de receptoras pseudogestantes para técnicas de reprodução assistida. Reduz o número de fêmeas necessárias como receptoras pseudogestantes e elimina a necessidade de machos vasectomizados.
Os protocolos aqui descritos podem ser utilizados para o manejo estratégico do biotério. Os protocolos podem ser utilizados com a criopreservação, fertilização in vitro, rederivação, produção de coortes de match de idade e produção de animais geneticamente modificados.
Visão Geral
Este estudo introduz um método de manipulação cervical que induz pseudogestação em camundongos, o que é necessário para a transferência bem-sucedida de embriões não cirúrgicos e inseminação artificial. Este avanço reduz a necessidade de reprodução e melhora o bem-estar animal, aderindo aos princípios dos 3Rs.
Componentes Principais do Estudo
Área de Pesquisa
- Técnicas de reprodução assistida
- Bem-estar animal e os 3Rs
- Modelos de roedores
Fundamentos
- Desafios atuais nos métodos de reprodução para fêmeas pseudográvidas
- Importância de reduzir o número de animais reprodutores
- Necessidade de procedimentos eficientes na transferência de embriões de roedores
Métodos Utilizados
- Manipulação cervical para indução de pseudogestação
- Camundongos (linhagem CD1)
- Técnicas de transferência não cirúrgica de embriões e inseminação artificial
Principais Resultados
- A manipulação cervical cria com sucesso fêmeas pseudográvidas sem a necessidade de machos vasectomizados.
- Protocolos simplificados melhoram a recuperação de filhotes através de técnicas não cirúrgicas.
- Os métodos são valiosos para criopreservação, fertilização in vitro e produção de animais geneticamente modificados.
Conclusões
- O estudo demonstra um método eficaz para produzir fêmeas camundongos pseudográvidas, aprimorando a reprodução assistida.
- Os resultados são significativos para melhorar a eficiência na gestão de vivários e fornecer melhores padrões de bem-estar na pesquisa.
Perguntas Frequentes
Executive Industry Relevance
Efficient induction of pseudopregnancy in female mice is critical for scalable, reproducible assisted reproduction workflows in preclinical research. The standardized cervical manipulation technique eliminates the need for vasectomized males, streamlining vivarium operations and supporting the 3Rs principles. This advancement enhances the reliability and predictability of generating pseudopregnant recipients for embryo transfer and artificial insemination, directly impacting resource allocation and experimental throughput.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables rapid generation of recipient cohorts for genetically modified and age-matched animal models.
- Supports efficient rederivation and cryopreservation workflows by ensuring timely availability of pseudopregnant females.
- Reduces biological variability by standardizing recipient preparation across experiments.
Screening & Assay Development
- Facilitates preparation of validated animal models for downstream phenotypic screening and functional assays.
- Improves reproducibility and scalability of embryo transfer and artificial insemination protocols.
- Enables consistent quantitative outputs for evaluating reproductive and developmental endpoints.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with translational continuity by supporting production of genetically engineered models for disease studies.
- Reduces operational bottlenecks in preclinical model generation and cohort expansion.
- Supports risk-adjusted advancement by minimizing procedural failures and animal use.
Pipeline & Workflow Integration
This cervical manipulation protocol integrates into the assisted reproduction continuum, from early discovery through preclinical model development and cohort management.
- Discovery Biology: Streamlines hypothesis testing and model validation by ensuring reliable recipient preparation.
- Screening: Standardizes animal model readiness for high-throughput reproductive and developmental assays.
- Analytics: Provides quantitative pregnancy and litter size data to inform experimental design and resource planning.
- Translational Research: Enables continuity in generating and maintaining disease-relevant animal models.
- Enterprise Reuse: Offers a reusable, non-surgical capability for multiple assisted reproduction applications across research programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in reproductive outcomes and reduces mechanistic ambiguity in model generation.
- Operational Value: Enhances standardization, reproducibility, and scalability of assisted reproduction workflows.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision-making and capital efficiency by reducing animal use and procedural complexity.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization and advancement of genetically engineered and disease-relevant models.
Implementation Considerations
- Requires technical expertise in estrus synchronization and cervical manipulation procedures.
- Needs access to basic instrumentation such as pipettes, specula, and microscopy for cytological evaluation.
- Demands cross-team standardization to ensure reproducibility and minimize variability.
- Adaptable across mouse strains and potentially other rodent models with protocol optimization.
- Limitations include the need for precise estrus staging and operator training to maximize efficiency.
