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DOI: 10.3791/65538-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui, discutimos um fluxo de trabalho para preparar, dissecar, montar e obter imagens de cérebros de explantes vivos de larvas de terceiro ínstar de Drosophila melanogaster para observar a dinâmica celular e subcelular sob condições fisiológicas.
Nossa pesquisa concentra-se no estudo do impacto da divisão celular assimétrica, ou DCA, na proliferação e diferenciação de células-tronco. Empregamos células-tronco neurais ou neuroblastos de Drosophila como modelo para entender os mecanismos, regulações e impactos da divisão celular assimétrica no desenvolvimento e neurogênese. Os recentes desenvolvimentos em inteligência artificial têm feito grandes avanços na quantificação e análise de imagens, o que tem avançado significativamente o campo da imagem de células de vida.
Manter a qualidade da amostra para um filme de longo prazo é um desafio de longa data. Embora seja perspicaz observar uma amostra por oito a 10 horas, restrições logísticas, como os requisitos de imagem da amostra e as ferramentas de imagem disponíveis, dificultam isso. Nosso protocolo aborda isso demonstrando imagens de longo prazo sem afetar a qualidade da amostra.
Nossa técnica poderia ser facilmente adotada e aplicada em campo por recém-chegados. Com algum tempo e prática, pode-se gerar filmes de curto e longo prazo, que têm o potencial de produzir dados perspicazes e significativos.
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