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Imagem de células vivas de cérebros de larvas de terceiro ínstar de Drosophila melanogaster
Imagem de células vivas de cérebros de larvas de terceiro ínstar de Drosophila melanogaster
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Live-Cell Imaging of Drosophila melanogaster Third Instar Larval Brains

Imagem de células vivas de cérebros de larvas de terceiro ínstar de Drosophila melanogaster

Full Text
4,078 Views
07:06 min
June 23, 2023

DOI: 10.3791/65538-v

Roberto Carlos Segura1, Clemens Cabernard1

1Department of Biology,University of Washington

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui, discutimos um fluxo de trabalho para preparar, dissecar, montar e obter imagens de cérebros de explantes vivos de larvas de terceiro ínstar de Drosophila melanogaster para observar a dinâmica celular e subcelular sob condições fisiológicas.

Nossa pesquisa concentra-se no estudo do impacto da divisão celular assimétrica, ou DCA, na proliferação e diferenciação de células-tronco. Empregamos células-tronco neurais ou neuroblastos de Drosophila como modelo para entender os mecanismos, regulações e impactos da divisão celular assimétrica no desenvolvimento e neurogênese. Os recentes desenvolvimentos em inteligência artificial têm feito grandes avanços na quantificação e análise de imagens, o que tem avançado significativamente o campo da imagem de células de vida.

Manter a qualidade da amostra para um filme de longo prazo é um desafio de longa data. Embora seja perspicaz observar uma amostra por oito a 10 horas, restrições logísticas, como os requisitos de imagem da amostra e as ferramentas de imagem disponíveis, dificultam isso. Nosso protocolo aborda isso demonstrando imagens de longo prazo sem afetar a qualidade da amostra.

Nossa técnica poderia ser facilmente adotada e aplicada em campo por recém-chegados. Com algum tempo e prática, pode-se gerar filmes de curto e longo prazo, que têm o potencial de produzir dados perspicazes e significativos.

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