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Preparação de sementes de palma dura para análise por espectrometria de massa assistida por desso...
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JoVE Journal Biochemistry
Preparation of Hard Palm Seeds for Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Imaging Mass Spectrometry Analysis

Preparação de sementes de palma dura para análise por espectrometria de massa assistida por dessorção/ionização assistida por matriz

Full Text
1,494 Views
07:55 min
June 30, 2023

DOI: 10.3791/65650-v

Gabriel R. Martins*1,2, Felipe L. Brum*1,2,3, Davi Marconi Miranda Carvalho da Silva*1,2, Livia C. Barbosa3, Ronaldo Mohana-Borges3, Ayla Sant'Ana da Silva1,2

1Laboratório de Biocatálise (LABIC),Instituto Nacional de Tecnologia, 2Departamento de Bioquímica, Instituto de Química,Universidade Federal do Rio de Janeiro, 3Centro de Espectrometria de Massas de Biomoléculas, Instituto de Biofísica Carlos Chagas Filho,Universidade Federal do Rio de Janeiro

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo teve como objetivo descrever orientações detalhadas sobre a preparação de seções de amostras de sementes duras com baixo teor de água para análise de MALDI-IMS, mantendo a distribuição e abundância originais dos analitos e fornecendo sinal de alta qualidade e resolução espacial.

Nossa pesquisa tem como foco a valorização da biomassa vegetal proveniente da biodiversidade tropical. Para isso, é muito importante caracterizar bem esses materiais para que possamos dar o melhor valor a eles e propor os melhores destinos. Para isso, neste trabalho, empregamos a análise por espectrometria de massa com imagem MALDI como técnica caracterizadora, pois é um método muito preciso que pode nos fornecer uma imagem molecular-específica do tecido biológico.

Com os resultados, podemos ter uma visão geral dos principais componentes dessa biomassa vegetal e também sua localização, e isso pode nortear nossa exploração de novos produtos e processos a partir desse material. No entanto, para ter uma análise de espectrometria de massa de imagem MALDI muito boa, é muito importante ter um bom método de preparação de amostras, e é exatamente isso que descrevemos neste trabalho. Os avanços na tecnologia levaram a muitos desafios na análise por espectrometria de massa.

Os tecidos vegetais, em particular, representam um desafio complexo devido aos seus órgãos especializados. É crucial para esta técnica, esta preparação da amostra, se a preparação da amostra for feita de forma inadequada, os sinais não serão detectados ou artefatos aparecerão, levando a resultados imprecisos. Esses protocolos nos permitem a preparação de fatias finas de sementes de palmeiras resistentes ao intestino, servindo como prova de um conceito para mapeamento molecular dentro de um tecido vivo de sementes.

Portanto, essa técnica oferece informações valiosas sobre oligossacarídeos presentes nessas sementes. Portanto, esperamos que a técnica seja útil para os pesquisadores com obstáculos semelhantes. Essa técnica pode auxiliar no estudo de outras sementes duras ou qualquer outro material biológico que imponha um desafio a ser cortado em fatias de nadadeiras.

Por exemplo, este protocolo pode ser uma ferramenta no estudo do desenvolvimento e germinação de sementes se se estiver estudando uma semente dura.

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