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Desenvolvimento e aplicação de ensaios biofísicos para avaliação da formação de complexos ternári...
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JoVE Journal Biochemistry
The Development and Application of Biophysical Assays for Evaluating Ternary Complex Formation Induced by Proteolysis Targeting Chimeras (PROTACS)

Desenvolvimento e aplicação de ensaios biofísicos para avaliação da formação de complexos ternários induzidos por proteólise visando quimeras (PROTACS)

Full Text
4,393 Views
07:22 min
January 12, 2024

DOI: 10.3791/65718-v

Wei Jiang1, Holly Soutter1

1Center for the Development of Therapeutics,The Broad Institute of MIT and Harvard

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Descrevemos protocolos para a caracterização biofísica da formação de complexos ternários induzidos por proteólise visando quimeras (PROTACS) que envolvem os ligases ubiquitina Von Hippel-Lindau E3 ligase (BVS) e Cereblon (CRBN). Os métodos biofísicos aqui ilustrados incluem ressonância plasmônica de superfície (SPR), interferometria de biocamada (BLI) e calorimetria de titulação isotérmica (ITC).

Nossa pesquisa se concentra em replicar sistemas modelo estabelecidos, validá-los por meio de ensaios adicionais e adaptar essas metodologias para se adequar ao nosso contexto específico de pesquisa. Nosso objetivo é demonstrar uma abordagem versátil que pode ser aplicada a vários projetos. O desafio experimental atual, o licenciamento seleciona estrategicamente o formato e as condições apropriadas do ensaio com base nos requisitos específicos do projeto e nas lacunas de conhecimento existentes.

Isso é essencial para alcançar respostas eficientes e precisas em nossos experimentos. Nosso protocolo fornece uma abordagem simplificada para uma adaptação perfeita a vários sistemas ProTech. Além disso, realizamos uma avaliação criteriosa de cada método, destacando seus respectivos prós e contras.

Oferecemos instruções informadas sobre a escolha do formato mais adequado com base em condições específicas.

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