Name: Alívio da nefropatia por IgA mediada por dioscina, inibindo a ativação de células B in vivo e diminuindo a produção de IgA1 deficiente em galactose in vitro (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-13T14:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 18 s
Description: Descubra como a dioscina alivia a nefropatia por IgA inibindo células B ativadas em modelos murinos e reduzindo a produção de IgA1 deficiente em galactose em células DAKIKI. Este estudo revela o potencial terapêutico da medicina fitoterápica para doenças renais crônicas.

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<meta charset="utf8"></head><body>Tratamento da Nefropatia por Imunoglobulina A (NIgA) com Dioscina em Modelo Murino

<ol><li>Knoppova, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+and+activities+of+IgA1-containing+immune+complexes+in+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">The origin and activities of IgA1-containing immune complexes in IgA nephropathy.</a> Frontiers in Immunology. 7, 117(2016).</li>
<li>Suzuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+The+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of IgA nephropathy.</a> Journal of The American Society of Nephrology. 22 (10), 1795-1803 (2011).</li>
<li>He, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+double-stranded+RNA+poly%28I%3AC%29+aggravates+IgA+nephropathy+by+triggering+IgA+class+switching+recombination+through+the+TLR3-BAFF+axis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Synthetic double-stranded RNA poly(I:C) aggravates IgA nephropathy by triggering IgA class switching recombination through the TLR3-BAFF axis.</a> American Journal of Nephrology. 42 (3), 185-197 (2015).</li>
<li>Zhao, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+level+of+galactose-deficient+IgA1+in+the+sera+of+patients+with+IgA+nephropathy+is+associated+with+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">The level of galactose-deficient IgA1 in the sera of patients with IgA nephropathy is associated with disease progression.</a> Kidney International. 82 (7), 790-796 (2012).</li>
<li>Xing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C1GALT1+expression+is+associated+with+galactosylation+of+IgA1+in+peripheral+B+lymphocyte+in+immunoglobulin+a+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Nephrology%22%5BJournal%5D)">C1GALT1 expression is associated with galactosylation of IgA1 in peripheral B lymphocyte in immunoglobulin a nephropathy.</a> BMC Nephrology. 21 (1), 18(2020).</li>
<li>Qin, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((External+suppression+causes+the+low+expression+of+the+Cosmc+gene+in+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">External suppression causes the low expression of the Cosmc gene in IgA nephropathy.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 23 (5), 1608-1614 (2008).</li>
<li>Sakai, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactobacillus+gasseri+SBT2055+induces+TGF-%CE%B2+expression+in+dendritic+cells+and+activates+TLR2+signal+to+produce+IgA+in+the+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Lactobacillus gasseri SBT2055 induces TGF-β expression in dendritic cells and activates TLR2 signal to produce IgA in the small intestine.</a> PLoS One. 9 (8), 105370(2014).</li>
<li>Gutzeit, C., Magri, G., Cerutti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+IgA+production+and+its+role+in+host-microbe+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Immunological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Intestinal IgA production and its role in host-microbe interaction.</a> Immunological Reviews. 260 (1), 76-85 (2014).</li>
<li>Serino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+a+retrospective+international+study%2C+circulating+miR-148b+and+let-7b+were+found+to+be+serum+markers+for+detecting+primary+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">In a retrospective international study, circulating miR-148b and let-7b were found to be serum markers for detecting primary IgA nephropathy.</a> Kidney International. 89 (3), 683-692 (2016).</li>
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<li>Wang, W., Xu, L., Zhou, L., Wan, S., Jiang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Network+pharmacology+approach+to+reveal+the+underlying+mechanisms+of+Rhizoma+Dioscoreae+Nipponicae+in+the+treatment+of+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%3A+eCAM%22%5BJournal%5D)">A Network pharmacology approach to reveal the underlying mechanisms of Rhizoma Dioscoreae Nipponicae in the treatment of asthma.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2022, 4749613(2022).</li>
<li>Tian, W. W., Wei, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Professor+TONG+Xiaolin+used+the+experience+of+Dioscoreae+Nipponicae%5BTitle%5D)+AND+%22Jilin+Journal+of+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Professor TONG Xiaolin used the experience of Dioscoreae Nipponicae.</a> Jilin Journal of Chinese Medicine. 40 (05), 589-592 (2020).</li>
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<li>Si, Y., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+data+mining+study+on+the+pattern+of+medication+use+in+the+treatment+of+IgA+nephropathy+by+Professor+Zhang+Yu%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chinese+Physician%22%5BJournal%5D)">A data mining study on the pattern of medication use in the treatment of IgA nephropathy by Professor Zhang Yu.</a> Journal of Chinese Physician. 20 (01), 109-111 (2018).</li>
<li>Jiang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+enzymatic+extraction+technology+of+Diosgenin+from+Dioscorea+nipponica%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Traditional+Patent+Medicine%22%5BJournal%5D)">Optimization of the enzymatic extraction technology of Diosgenin from Dioscorea nipponica.</a> Chinese Traditional Patent Medicine. 39 (03), 621-624 (2017).</li>
<li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dioscin+alleviates+lipopolysaccharide-induced+inflammatory+kidney+injury+via+the+microRNA+let-7i%2FTLR4%2FMyD88+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacological+Research%22%5BJournal%5D)">Dioscin alleviates lipopolysaccharide-induced inflammatory kidney injury via the microRNA let-7i/TLR4/MyD88 signaling pathway.</a> Pharmacological Research. 111, 509-522 (2016).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+pharmacological+activities+of+Dioscin%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the pharmacological activities of Dioscin.</a> BioMed Research International. 2019, 5763602(2019).</li>
<li>Nal Zou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+4+signaling+pathway+in+the+protective+effect+of+Pioglitazone+on+experimental+immunoglobulin+A+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medical+Journal%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor 4 signaling pathway in the protective effect of Pioglitazone on experimental immunoglobulin A nephropathy.</a> Chinese Medical Journal. 130 (8), 906-913 (2017).</li>
<li>Xu, S. Y., Bian, R. L., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+experiments+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Pharmacological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Pharmacological experiments methodology.</a> Chinese Pharmacological Bulletin. 1, 19(1992).</li>
<li>Shen, J. C., Ren, Y., Rao, X. R., You, Y., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network+pharmacology%2C+molecular+docking%2C+and+in+vitro+experiments+to+explore+the+molecular+mechanism+of+Dioscorea+Nipponica+Makion+in+the+treatment+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Integrated+Traditional+and+Western+Medicine%22%5BJournal%5D)">Network pharmacology, molecular docking, and in vitro experiments to explore the molecular mechanism of Dioscorea Nipponica Makion in the treatment of IgA nephropathy.</a> World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 16 (12), 2246-2254 (2021).</li>
<li>Mestecky, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA+nephropathy%3A+molecular+mechanisms+of+the+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">IgA nephropathy: molecular mechanisms of the disease.</a> Annual Review of Pathology. 8, 217-240 (2013).</li>
<li>Novak, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA1-containing+immune+complexes+in+IgA+nephropathy+differentially+affect+proliferation+of+mesangial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">IgA1-containing immune complexes in IgA nephropathy differentially affect proliferation of mesangial cells.</a> Kidney International. 67 (2), 504-513 (2005).</li>
<li>Nihei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+IgA+autoantibodies+targeting+mesangial+cells+redefines+the+pathogenesis+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Identification of IgA autoantibodies targeting mesangial cells redefines the pathogenesis of IgA nephropathy.</a> Science Advances. 9 (12), (2023).</li>
<li>Raska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+CMP-NeuAc%3A+GalNAc-IgA1+alpha2%2C6-sialyltransferase+in+IgA1-producing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of CMP-NeuAc: GalNAc-IgA1 alpha2,6-sialyltransferase in IgA1-producing cells.</a> Journal of Molecular Biology. 369 (1), 69-78 (2007).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anti-CD20/MS4A1 Anti-CD20/MS4A1 Antibody</td><td>Boster Biotechnology Company</td><td>A03780-3</td><td></td></tr><tr><td>Antifade meio de montagem</td><td>Beyotime, Xangai, China</td><td>P0128S Camundongos</td><td></td></tr><tr><td>Balb/c</td><td>Beijing Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd.</td><td></td><td></td>110322220101424000</tr><tr><td>que obstrui o soro</td><td>Solarbio, Pequim, China</td><td>SL038</td><td></td></tr><tr><td>Gamma globulin bovino</td><td>ShangHai YuanYe Biotechnology Company</td><td>S12031</td><td></td></tr><tr><td>C1GALT1 anticorpo policlonal</td><td>Proteintech Group, Inc, EUA</td><td>27569-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Solução de recuperação do antígeno do citrato (50&times;)</td><td>Phygene Biotechnology Company</td><td>PH0422</td><td></td></tr><tr><td>COSMC anticorpo policlonal</td><td>Proteintech Group, Inc, EUA</td><td>19254-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Kit de detecção de citotoxicidade</td><td>Roche Company</td><td>4744926001</td><td></td></tr><tr><td>Dako REAL EnVision sistema de detecção, Peroxidase / DAB +</td> <td>Dako</td><td>K5007</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Dioscina</td><td>Instituto Nacional de Controle de Alimentos e Medicamentos</td><td>111707-201703</td><td></td></tr><tr><td>DIO comprimidos</td><td>Chengdu No 1 Pharmaceutical Co. Ltd.</td><td></td><td></td>H51023866</tr><tr><td>solução de trabalho ECL</td><td>Merck Biotechnology, Inc</td><td>WBKLS0100&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Kit de contagem de células aprimorada-8</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>C0043</td><td></td></tr><tr><td>Remoção em uma etapa do gene cDNA primeira pré-mistura de síntese de</td> fita <td>TIANGEN, Pequim, China</td><td>KR118-02</td><td></td></tr><tr><td>Kit de coloração de ácido periódico de glicogênio Schiff (PAS)</td><td>BaSO Biotechnology Company</td><td>BA4080A</td><td></td></tr><tr><td>IgA-AF488 IgA anti-rato de cabra</td><td>SouthernBiotech</td><td>1040-30</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo IgG anti-coelho de cabra (H + L), HRP conjugado</td><td>BeiJing Bioss Biotechnology Company</td><td>BS-0295G-HRP</td><td></td></tr><tr><td>Kit ELISA Gd-IgA1 humano</td><td>IBL</td><td>27600</td><td></td></tr><tr><td>Kit ELISA de IgA humano</td><td>MultiSciences (LiankeBio)</td> <td>70-EK174-96</td><td></td></tr><tr><td>Kit de ensaio de proteína Pierce BCA</td><td>Thermo Scientific</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>Solução PMSF</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>ST507</td><td></td></tr><tr><td>Proteinase K&nbsp;</td><td>Phygene Biotechnology Company</td><td>PH1521</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo policlonal anti-CXCR5 para coelhos&nbsp;</td><td>BeiJing Bioss Biotechnology Company</td><td>bs-23570R</td><td></td></tr><tr><td>Tampão de lise RIPA</td><td>Beyotime, Xangai, China</td><td>P0013B</td><td></td></tr><tr><td>RNAsimple kit de extração de RNA total simples</td><td>TIANGEN, Pequim, China</td><td>DP419</td><td></td></tr><tr><td>RPMI Medium 1640</td><td>Solarbio, Pequim, China</td><td>31800</td><td></td></tr><tr><td>Kit de ensaio de proteína Super-Bradford</td><td>CWBIO, Pequim, China</td><td>CW0013</td><td></td></tr><tr><td>Tritão&nbsp; X-100</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>ST795</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Actin Rabbit mAb</td><td>Abclonal, Wuhan, China</td><td>AC026</td><td></td></tr></tbody></table>

alívio da nefropatia por iga mediada por dioscina, inibindo a ativação de células b in vivo e diminuindo a produção de iga1 deficiente em galactose in vitro

Dioscin Mediated IgA Nephropathy Alleviation by Inhibiting B Cell Activation In Vivo and Decreasing Galactose-Deficient IgA1 Production In Vitro

Efeito da DIO no tecido renal em modelo de camundongos IgNIa
Em comparação com o grupo controle, o modelo de camundongos IgNI induzido pelo sistema imunológico da mucosa (grupo modelo) teve um aumento significativo na proteinúria (Figura 2 suplementar), a deposição de IgA foi visível na região mesangial, a fluorescência foi uniformemente distribuída em aglomerados por toda a região mesangial (Figura 1A), a coloração PAS do tecido renal mostrou proliferação de células mesangiais e hiperplasia estromal (Figura 1B), que foi reduzida no grupo gavagem DIO (grupo DIO).
Efeito da DIO sobre linfócitos B em adesivo de Peyer
O adesivo de Peyer é o principal local de conversão de linfócitos B em células secretoras de IgA. Tomamos o adesivo de Peyer como objeto de pesquisa para observar o efeito da DIO sobre os linfócitos B, detectando a expressão dos marcadores de células B CD20 e CXCR5. Os resultados imuno-histoquímicos mostraram que a expressão de CD20 e CXCR5 foi significativamente maior no grupo modelo em comparação com o grupo controle. DIO pode inibir a expressão dos marcadores moleculares acima (Figura 2A, B).
A faixa de concentração segura de DIO em células DAKIKI
O LDH é um marcador da integridade da membrana plasmática e um indicador de morte celular, com taxas de liberação de LDH mais altas indicando danos celulares mais graves. O ensaio de liberação de LDH foi usado para determinar a faixa de concentração segura de DIO. A concentração máxima segura de DIO foi determinada por uma taxa de liberação de LDH abaixo de 10%. Os resultados (Figura 3) não mostraram citotoxicidade significativa induzida por DIO nas concentrações de 0,25 a 1,0 μg/mL. Portanto, o estudo a seguir usou 0,25, 0,5 e 1,0 μg / mL DIO como nível de dosagem.
Efeitos do DIO na proliferação de células DAKIKI
Os resultados experimentais (Figura 4) mostraram que, em comparação com o grupo modelo (grupo estimulado por LPS), o DIO inibiu a proliferação de células DAKIKI induzida por LPS de maneira dependente da concentração. DIO nas concentrações de 0,5 e 1,0 μg/mL inibiu significativamente a proliferação de células DAKIKI induzida por LPS (P &lt; 0,01).
Efeitos do DIO na função secretora das células DAKIKI
Os níveis de Gd-IgA1 estão intimamente relacionados ao processo patológico da NIgA, e a IgA total é testada em conjunto como um indicador da função secretora celular. Um ensaio ELISA foi usado para detectar o conteúdo de IgA e Gd-IgA1 no sobrenadante da cultura de células DAKIKI. Os resultados mostraram (Figura 5A,B) que as células DAKIKI estimuladas por LPS secretaram mais IgA em comparação com o grupo controle (P &lt; 0,01). Em comparação, o DIO inibiu significativamente as células DAKIKI de secretar IgA (P &lt; 0,01) de maneira dependente da concentração. Em comparação com o grupo controle, as células DAKIKI estimuladas por LPS secretaram mais Gd-IgA1 com tendência estatística (P &lt; 0,10), e DIO inibiu a secreção de Gd-IgA1 de células DAKIKI estimuladas por LPS de maneira dependente da concentração (P &lt; 0,05 e P &lt; 0,01), entre as quais DIO a 1,0 μg/mL inibiu significativamente a secreção de Gd-IgA1 com a taxa inibida de 25%.
O mecanismo de DIO inibe a secreção de Gd-IgA1 pelas células DAKIKI
Para investigar ainda mais o possível mecanismo de DIO inibindo a secreção excessiva de Gd-IgA1 pelas células DAKIKI, os níveis de C1GALT1 glicosilada transferase e mRNA da proteína chaperona Cosmc em células DAKIKI foram detectados por qRT-PCR, e os resultados mostraram (Figura 6A, B) que a expressão relativa de mRNA de C1GALT1 e Cosmc foi regulada negativamente em células DAKIKI no grupo modelo em comparação com o grupo controle (P &lt; 0,01). DIO regulou positivamente a expressão relativa de mRNA de C1GALT1 e Cosmc em diferentes graus em comparação com o grupo modelo, com DIO 1,0 μg / mL regulou significativamente a expressão relativa de mRNA de C1GALT1 e Cosmc (P &lt; 0,05).
Ao mesmo tempo, o método WB foi usado para detectar o efeito de DIO na expressão proteica de C1GALT1 e Cosmc em células DAKIKI. Em comparação com o grupo controle, a expressão proteica de C1GALT1 e Cosmc em células DAKIKI no grupo modelo diminuiu obviamente (P &lt; 0,05). Em comparação com o grupo modelo, a expressão proteica de C1GALT1 e Cosmc após a intervenção DIO foi regulada positivamente. A expressão proteica de C1GALT1 e Cosmc foi significativamente regulada positivamente por DIO na concentração de 1,0 μg / mL (P &lt; 0,05) ( Figura 7A-C ).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig1.jpg"> Figura 1: Histopatologia dos rins. (A) Microscópio de imunofluorescência. Cortes renais de camundongos em cada grupo foram corados com anti-IgA (verde) e DAPI (azul). A barra de escala da imagem acima = 200 μm. A barra de escala de imagem abaixo = 50 μm. n = 6 por grupo. (B) Imagens representativas da coloração PAS de tecido renal de camundongos nos grupos Controle, Modelo e DIO. Barra de escala = 30 μm. A seta para baixo mostra as células mesangiais e a seta para cima mostra o estroma. Barra de escala = 30 μm. n = 6 por grupo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig2.jpg"> Figura 2: Efeito do DIO nos marcadores de linfócitos B. (A) A expressão de CD20 no adesivo de Peyer. Barra de escala = 200 μm. n = 6 por grupo. (B) A expressão de CXCR5 no adesivo de Peyer. As barras de escala estão no canto inferior direito da imagem. Barra de escala = 200 μm. n = 6 por grupo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig3.jpg"> Figura 3. Triagem da concentração segura de DIO em células DAKIKI. Os valores estatísticos são expressos como a média ± DP de três experimentos independentes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig4.jpg"> Figura 4. Diferentes concentrações de DIO afetam a proliferação de células DAKIKI. Os dados foram expressos em média ±DP. Em comparação com o grupo controle, **P &lt; 0,01; em comparação com o grupo modelo, #P &lt; 0,05' ##P &lt; 0,01; Os resultados de todos os experimentos foram repetidos três vezes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig4large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig5.jpg"> Figura 5. DIO inibe a secreção de IgA e Gd-IgA1 pelas células DAKIKI. (A) O método ELISA detectou a expressão de IgA em cada grupo. (B) O método ELISA detectou a expressão de Gd-IgA1 em cada grupo. Os dados foram expressos como média ± DP. Em comparação com o grupo controle, **P &lt; 0,01; em comparação com o grupo modelo, #P &lt; 0,05, ##P &lt; 0,01; Todos os resultados experimentais foram repetidos três vezes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig5large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig6.jpg"> Figura 6. O mecanismo de DIO inibe a secreção excessiva de Gd-IgA1 pelas células DAKIKI. (A) QRT-PCR detectou a expressão de mRNA de C1GALT1. (B) QRT-PCR detectou a expressão de mRNA de Cosmc. Os dados foram expressos como média ± DP. Em comparação com o grupo controle, **P&lt;0,01; em comparação com o grupo modelo, #P &lt; 0,05, ##P &lt; 0,01; Todos os resultados experimentais foram repetidos três vezes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig6large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig7.jpg"> Figura 7. DIO afeta a expressão proteica de C1GALT1 e Cosmc em células DAKIKI. (A) WB verificou a regulação positiva da expressão proteica de C1GALT1 e Cosmc por DIO. (B) A análise semiquantitativa da expressão de C1GALT1 foi realizada usando a imagem J. (C) Análise semiquantitativa da expressão de Cosmc usando a imagem J. Os dados foram expressos como média ±DP. Em comparação com o grupo controle, *P &lt; 0,05; em comparação com o grupo modelo, #P &lt; 0,05, ##P &lt; 0,01, todos os resultados experimentais foram repetidos três vezes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig7large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Figura suplementar 1. O esquema para o modelo in vivo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/Supplementary_Figure_1.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar esta figura.</a>
Figura suplementar 2. Alterações na proteinúria. Os dados foram expressos como média ± DP; n = 6 por grupo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/Supplementary_Figure_2.jpg" target="_blank">Clique aqui para baixar esta figura.</a>

Alívio da nefropatia por IgA mediada por dioscina, inibindo a ativação de células B in vivo e diminuindo a produção de IgA1 deficiente em galactose in vitro

The increase of circulating galactose-deficient IgA1 (Gd-IgA1) is caused by excessive activation of IgA-positive secretory cells in the process of mucosal ...

dioscin-mediated-iga-nephropathy-alleviation-inhibiting-b-cell

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Aqui, nós descrevemos um método confocal simples da imagem latente para visualizar a localização in situ das pilhas que secretoras a gama do interferon do citocinas em órgãos lymphoid secundários murino. Este protocolo pode ser estendido para a visualização de outras citocinas em diversos tecidos.

Imagem latente da produção in situ da gama do interferon no spleen do rato depois da infecção dos monocytogenes de Listeria

Este protocolo usa peptídeos mistos G6PI para construir modelos de artrite reumatoide que estão mais próximos do da artrite reumatoide humana em células CD4+ T e citocinas. Células T assassinas naturais invariantes de alta pureza (principalmente iNKT2) com fenótipos e funções específicas foram obtidas por indução in vivo e purificação in vitro para imunoterapia adotiva.

Imunoterapia adotiva de células iNKT em Isomerase Isomerase Induzida de Glicose-6-Fosfato (G6PI)-Induzido RaMice

Aqui apresentamos um protocolo para o aumento in vivo da ininvitro-homing indução de células T regulamentares. Neste protocolo, as células dendríticas são projetadas para produzir localmente altas concentrações da vitamina D ativa (1,25-dihidroxivitamina D ou 1,25[OH]2D) e a vitamina A ativa (ácido retinoico ou AR) de novo.

In Vivo Aumento da Indução de CélulaS T Reguladoras de Gut-Homing

microRNAs estão envolvidos na patogênese da nefropatia por IgA. Desenvolvemos um método confiável para detectar os níveis de expressão de microRNA nos rins de um modelo de nefropatia por IgA em camundongos (camundongos HIGA). Este novo método facilitará a verificação do envolvimento de miRNAs na nefropatia por IgA.

Detecção da Expressão de MicroRNA nos Rins de Camundongos Nefropáticos com Imunoglobulina A

A inflamação da superfície ocular prejudica os tecidos da superfície ocular e compromete as funções vitais do olho. O presente protocolo descreve um método para induzir inflamação ocular e coletar tecidos comprometidos em um modelo de camundongo de disfunção da glândula de Meibomian (MGD).

Indução da inflamação da superfície ocular e coleta de tecidos envolvidos

Aqui nós propor métodos simples para testar e avaliar a presença de espécies reativas de oxigênio nas células.

Produção e Detecção de Espécies Reativas de Oxigênio (ROS) em Câncer

Nós descrevemos um protocolo geral para no rastreamento de células in vivo utilizando ressonância magnética em um modelo de rato com ex vivo células marcadas. Um protocolo típico para a marcação de células, o processamento de aquisição de imagem e a quantificação é incluído.

In vivo 19 F MRI para Rastreamento celular

O intestino delgado é freqüentemente expostos a toxinas que podem influenciar o fluxo sanguíneo e impactar negativamente a absorção de nutrientes. Usando uma artéria mesentérica e multimyograph e veia isolados, os compostos de interesse ou toxinas podem ser rastreados para a vasoactividade.

Isolando e com cortes de bovinos artéria e veia mesentérica como Bioassay teste para vasoactividade no intestino delgado

Este manuscrito fornece um protocolo para implantar telémetros no camundongo com o objetivo de medir as pressões intrauterinas durante a gravidez.

Telemetria Intrauterine medir Rato contrátil Pressão<em&gt; In Vivo</em

Ativação da micróglia e microgliose são respostas fundamentais para a neurodegeneração crónica. Aqui, apresentamos métodos para in vivo, visualização de longo prazo de CX3CR1-GFP + células microgliais da retina por oftalmoscopia confocal, e para limiar e análises morfométricas para identificar e quantificar a sua activação. Monitoramos alterações microgliais durante estágios iniciais de glaucoma relacionada com a idade.

In Vivo Dinâmica da Retinal microglia Ativação Durante Neurodegeneration: confocal oftalmoscópico Imagem e morfometria celular no mouse Glaucoma

Descubra como a dioscina alivia a nefropatia por IgA inibindo células B ativadas em modelos murinos e reduzindo a produção de IgA1 deficiente em galactose em células DAKIKI. Este estudo revela o potencial terapêutico da medicina fitoterápica para doenças renais crônicas.

Alívio da nefropatia por IgA mediada por dioscina, inibindo a ativação de células B in vivo e diminuindo a produção de IgA1 deficiente em galactose in vitro (Vídeo) | JoVE Journal

Alívio da nefropatia por IgA mediada por dioscina, inibindo a ativação de células B in vivo e diminuindo a produção de IgA1 deficiente em galactose in vitro

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