Name: Isolamento, Identificação Comportamental e Avaliação de Patogenicidade de Fungos Entomopatogênicos de uma Broca da Madeira Florestal (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-29T12:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 58 s
Description: Aprenda a isolar e identificar fungos entomopatogênicos de Monochamus alternatus usando PCR e análise filogenética. Este protocolo avalia atividades entomopatogênicas para aplicações de biocontrole em pragas florestais.

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<meta charset="utf8"></head><body>Explorando recursos de fungos entomopatogênicos de brocas de madeira florestal

<table><tbody><tr><td>Tubos de centrífuga de 1,5 mL, 2 mL</td><td>Biosharp</td><td>BS-15-M</td><td></td></tr><tr><td>10 &micro; Pontas de pipeta L</td><td>Sangon Biotech</td><td>F601216</td><td></td></tr><tr><td>10 &micro; L, 20 &micro; L, 100 &micro; L, 200 &micro; L, 1.000 &micro; L pipetas</td><td>Rainin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1.000 &micro; Pontas de pipeta L</td><td>Sangon Biotech</td><td>F630102</td><td></td></tr><tr><td>2 mL frascos criogênicos</td><td>Corning</td><td>430659</td><td></td></tr><tr><td>20x PBS buffer</td><td>Sangon Biotech</td><td>B548117-0500</td><td></td></tr><tr><td>200 &micro; Pontas de pipeta L</td><td>Sangon Biotech</td><td>F601227</td><td></td></tr><tr><td>fabricante de 2.000 pb</td><td>TaKaRar</td><td>SD0531</td><td></td></tr><tr><td>Tubos de 50 mL</td><td>Nest</td><td>602052</td><td></td></tr><tr><td>solução de glutaraldeído a 50%</td><td>Sangon Biotech</td><td>G916054</td><td></td></tr><tr><td>tampão TAE 50x</td><td>Sangon Biotech</td><td>B548101</td><td></td></tr><tr><td>tampão de carga 6x</td><td>TaKaRar</td><td>SD0503</td><td></td></tr><tr><td>Armário</td> de cultivo de <td>bioquímica</td> de <td>A610013</td><td></td></tr><tr><td>de etanol anidro</td><td>Jkchemical</td><td>LB10V37</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td> Sangon Biotech <td>Shanghaiyiheng</td><td>LRH-250F</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>Juhua</td><td>61553</td><td></td></tr><tr><td>Armadilhas comerciais para besouros</td><td>FEIMENGDI</td><td>BF-8</td><td>www.yinyouji.com</td></tr><tr><td>Gerador de imagens em gel</td><td>Bio-Rad</td><td>GelDoc XR+</td><td></td></tr><tr><td>Glicerol</td><td>Sangon Biotech</td><td>A600232</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga refrigerada de alta velocidade</td><td>Sigma</td><td>D-37520</td><td></td></tr><tr><td>Pote de esterilização a vapor de alta pressão</td><td>Mettler Toledo</td><td>JA5003</td><td></td></tr><tr><td>Álcool isopropílico</td><td>Reagente geral</td><td>G75885B</td><td></td></tr><tr><td>Corante de ácido nucleico</td><td>Sangon Biotech</td><td>A616696</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio óptico, OM</td><td>Leica</td><td>DM2000</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td></td><td>Parafilm PM996</td><td></td></tr><tr><td>Medidor de PCR</td><td>Heal Force</td><td>Trident960</td><td></td>Penicilina</tr><tr><td>G</td><td>Marklin</td><td>GB15743</td><td></td></tr><tr><td>Ágar dextrose de batata, PDA</td><td>Oxoid</td><td>CM0139</td><td></td></tr><tr><td>Caldo de dextrose de batata, PDB</td><td>Solarbio</td><td>P9240</td><td></td></tr><tr><td>Primers</td><td>Sangon Biotech</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Primers Taq</td><td>TaKaRar</td><td>RR902A</td><td></td></tr><tr><td>Kit de isolamento de DNA genômico de fungos rápidos</td><td>Sangon Biotech</td><td>B518229</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio eletrônico de varredura, SEM</td><td>Hitachi</td><td>S-3400N</td><td></td></tr><tr><td>Estreptomicina</td><td>Marklin</td><td>S6153</td><td></td></tr><tr><td>Tetraciclina</td><td>Marklin</td><td>T829835</td><td></td></tr><tr><td>Tween-80</td><td>Marklin</td><td>T6336</td><td></td></tr><tr><td>Secador de congelamento a vácuo</td><td>Yamato</td><td>DC801</td><td></td></tr><tr><td>Agitador de vórtice</td><td>HLD</td><td>WH-861</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Mercaptoetanol</td><td>Marklin</td><td>M6230</td><td></td></tr></tbody></table>

isolamento, identificação comportamental e avaliação de patogenicidade de fungos entomopatogênicos de uma broca da madeira florestal

Isolation, Behavioral Identification, and Pathogenicity Assessment of Entomopathogenic Fungi from a Forest Wood Borer

Isolamento e identificação de isolados fúngicos de M. alternatus Com a ajuda de armadilhas atrativas, um grande número (aproximadamente 500 besouros no total) de M. alternatus foram coletados em cinco regiões geográficas. Cadáveres de besouros com sintomas típicos de infecção por fungos entomopatogênicos foram colhidos; Em seguida, os tegumentos corporais de cada besouro foram dissecados em várias posições, conforme descrito na etapa 1.3 do protocolo. Como resultad...

Isolamento, Identificação Comportamental e Avaliação de Patogenicidade de Fungos Entomopatogênicos de uma Broca da Madeira Florestal

Forest wood borers (FWB) cause severe tree damage and economic losses worldwide. The release of entomopathogenic fungi (EPF) during the FWB emergence ...

isolation-behavioral-identification-pathogenicity-assessment

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Aqui apresentamos um protocolo baseado no sistema de isca mealworm (Tenebrio molitor)-isca que foi utilizado para isolar e selecionar fungos entomopatômicos (EPF) a partir de amostras de solo. Uma fórmula eficaz de número de conidia (ECN) é usada para selecionar EPF tolerante ao alto estresse com base em características fisiológicas para controle microbiano de pragas no campo.

Isolamento e Seleção de Fungos Entomopatômicos de Amostras de Solo e Avaliação da Virulência Fúngica contra Pragas de Insetos

Colônias fúngicas entomopatômicas são isoladas de amostras de solo tropical usando isca tenebrio , isca de Galleria , bem como meio artificial seletivo, ou seja, ágar de dextrose de batata enriquecido com extrato de levedura suplementado com clorofenicol, tiaabzolendae e ciclohexmida (meio CTC).

Comparação de métodos para isolar fungos entomopatômicos de amostras de solo

Neste vídeo vamos descrever um método para avaliar a reação psicofisiológica pessoa ao estresse usando biofeedback. Nós também irá apresentar as diretrizes gerais para o planejamento de tratamento.

Avaliação do estresse psicofisiológico Usando Biofeedback

Vampiric Isolamento de fluido extracelular a partir de<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Neste relatório, nós descrevemos um protocolo para o isolamento de populações altamente purificados de leucócitos que infiltram tumores. Este protocolo é adaptado a partir do Biotech Miltenyi protocolo para aumentar o rendimento e grau de pureza para o isolamento de células a partir de tecido de tumor complexo.

Isolamento de células imunes de tumores primários

Nós descrevemos um método para medir diretamente a força muscular, a força muscular, a cinética contráteis e fatigabilidade de músculos esqueléticos isolados em...

Avaliação ex vivo de Fatigabilidade Contratilidade e Alternans em músculos esqueléticos isolados

A comparação do potencial da membrana mitocondrial entre as amostras produz informações valiosas sobre o status celular. São descritas etapas detalhadas para isolar mitocôndrias e avaliar a resposta a inibidores e desacopladores usando fluorescência. O método e a utilidade deste protocolo são ilustrados pelo uso de uma cultura de células e modelo animal de estresse celular.

Isolamento e Análise Funcional de mitocôndrias de células cultivadas e mouse Tissue

Fungos entomopatômicos ganharam importância como agentes de controle biológico de pragas de insetos agrícolas. Neste estudo, a produção em massa de um número suficiente de propagules infecciosos resilientes de isolados sul-africanos tanto de Metarhizium robertsii quanto de M. pinghaense para aplicação comercial contra pragas de insetos foi realizada com sucesso utilizando produtos agrícolas de grãos.

Produção em massa de Fungos Entomopatômicos, Metarhizium robertsii e Metarhizium pinghaense, para Aplicação Comercial Contra Pragas de Insetos

Aqui, apresentamos um protocolo de triagem da biodiversidade do solo para procurar cepas fúngicas envolvidas na degradação de materiais recalcitrantes. Primeiro, as cepas fúngicas capazes de crescer em ácidos húlicos ou lignocelulose são isoladas. Sua atividade é então testada tanto em ensaios enzimáticos quanto em poluentes como hidrocarbonetos e plásticos.

Isolamento e Triagem da Biodiversidade do Solo para Fungos Envolvidos na Degradação de Materiais Recalcitrantes

Este protocolo detalha um método para a dissecção de depósitos adiposos de camundongos e o isolamento e digestão das respectivas artérias para liberar e, em seguida, identificar a população de células endoteliais. Células recém-isoladas usadas em aplicações a jusante avançarão na compreensão da biologia celular vascular e dos mecanismos de disfunção vascular.

Isolamento e Identificação de Células Endoteliais Vasculares de Depósitos Adiposos Distintos para Aplicações a Jusante

Aprenda a isolar e identificar fungos entomopatogênicos de Monochamus alternatus usando PCR e análise filogenética. Este protocolo avalia atividades entomopatogênicas para aplicações de biocontrole em pragas florestais.

Isolamento, Identificação Comportamental e Avaliação de Patogenicidade de Fungos Entomopatogênicos de uma Broca da Madeira Florestal (Vídeo) | JoVE Journal

Isolamento, Identificação Comportamental e Avaliação de Patogenicidade de Fungos Entomopatogênicos de uma Broca da Madeira Florestal

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