Fibras musculares esqueléticas curtas, intermediárias e longas intactas obtidas por dissociação enzimática de seis músculos dos membros posteriores de camundongos: além do flexor curto dos dedos

Descrevemos um protocolo para obtenção de fibras enzimaticamente dissociadas de diferentes comprimentos e tipos de seis músculos de camundongos adultos: três deles já descritos (flexor curto dos dedos, extensor longo dos dedos, sóleo) e três deles dissociados com sucesso pela primeira vez (extensor longo do hálux, fibular longo, fibular dos dígitos).

Neste estudo, descrevemos um método para isolar fibras de diferentes comprimentos e tipos de seis músculos de membros posteriores de camundongos. Além disso, testamos a adequação das fibras para experimentos fisiológicos que tratam do estudo do mecanismo de acoplamento excitação-contração. Durante anos, a obtenção de fibras musculares longas foi um desafio, limitando o escopo de muitos estudos na área.

Agora mostramos que é possível obter fibras magras com flexores, extensores e evertores de camundongos com comprimentos de até seis milímetros. Como exemplo, a obtenção de fibras de seis músculos diferentes nos permitiu mostrar que a cinética transitória de cálcio, conhecida como morfologia tipo II, pode ser generalizada para os tipos IIB e IIX, independentemente da localização ou função de sua fonte muscular. Acreditamos que o modelo de fibras isoladas enzimaticamente é adequado para uma variedade de abordagens experimentais com diferentes tipos de tecnologias que nos permitem responder a questões mecanicistas dentro da gama de bioquímica, fisiologia, biofísica, biologia celular e biologia molecular.