Name: Avaliação da citotoxicidade de metabólitos de pesticidas triazólicos típicos em plantas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-12-22T14:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Aprenda a avaliar a citotoxicidade integral de metabólitos de pesticidas triazólicos em plantas usando cultura de calo vegetal e linhagens celulares humanas. Este método combina modelos vegetais e humanos para uma avaliação toxicológica mais completa.

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<meta charset="utf8"></head><body>Estimando a citotoxicidade do metabólito integral de pesticidas triazólicos em plantas

<ol><li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+of+halogenated+organic+compounds+%28HOCs%29+into+peanut+and+corn+during+the+whole+life+cycle+grown+in+an+agricultural+field%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Uptake of halogenated organic compounds (HOCs) into peanut and corn during the whole life cycle grown in an agricultural field.</a> Environ Pollut. 263, 114400(2020).</li>
<li>Wu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trace+metals+in+e-waste+lead+to+serious+health+risk+through+consumption+of+rice+growing+near+an+abandoned+e-waste+recycling+site%3A+Comparisons+with+PBDEs+and+AHFRs%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Trace metals in e-waste lead to serious health risk through consumption of rice growing near an abandoned e-waste recycling site: Comparisons with PBDEs and AHFRs.</a> Environ Pollut. 247, 46-54 (2019).</li>
<li>Liu, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tetrabromobisphenol-A%2FS+and+nine+novel+analogs+in+biological+samples+from+the+Chinese+Bohai+Sea%3A+Implications+for+trophic+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Tetrabromobisphenol-A/S and nine novel analogs in biological samples from the Chinese Bohai Sea: Implications for trophic transfer.</a> Environ Sci Technol. 50 (8), 4203-4211 (2016).</li>
<li>Awasthi, A. K., Zeng, X., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+pollution+of+electronic+waste+recycling+in+India%3A+A+critical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Environmental pollution of electronic waste recycling in India: A critical review.</a> Environ Pollut. 211, 259-270 (2016).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant+accumulation+and+transformation+of+brominated+and+organophosphate+flame+retardants%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Plant accumulation and transformation of brominated and organophosphate flame retardants: A review.</a> Environ Pollut. 288, 117742(2021).</li>
<li>Sandermann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+plant+metabolism+of+xenobiotics%3A+the+%27green+liver%27+concept%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogenetics%22%5BJournal%5D)">Higher plant metabolism of xenobiotics: the 'green liver' concept.</a> Pharmacogenetics. 4, 225-241 (1994).</li>
<li>Zhang, J. J., Yang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolism+and+detoxification+of+pesticides+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">Metabolism and detoxification of pesticides in plants.</a> Sci Total Environ. 790, 148034(2021).</li>
<li>Debenest, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecotoxicity+of+a+brominated+flame+retardant+%28tetrabromobisphenol+A%29+and+its+derivatives+to+aquatic+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Biochem+Phys+C%22%5BJournal%5D)">Ecotoxicity of a brominated flame retardant (tetrabromobisphenol A) and its derivatives to aquatic organisms.</a> Comp Biochem Phys C. 152 (4), 407-412 (2010).</li>
<li>McCormick, J. M., Van Es, T., Cooper, K. R., White, L. A., Haggblom, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbially+mediated+O-methylation+of+bisphenol+A+results+in+metabolites+with+increased+toxicity+to+the+developing+zebrafish+%28Danio+rerio%29+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Microbially mediated O-methylation of bisphenol A results in metabolites with increased toxicity to the developing zebrafish (Danio rerio) embryo.</a> Environ Sci Technol. 45 (15), 6567-6574 (2011).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+metabolic+pathways+of+2%2C4%2C6-tribromophenol+in+rice+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Multiple metabolic pathways of 2,4,6-tribromophenol in rice plants.</a> Environ Sci Technol. 53 (13), 7473-7482 (2019).</li>
<li>Hou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycosylation+of+tetrabromobisphenol+A+in+pumpkin%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Glycosylation of tetrabromobisphenol A in pumpkin.</a> Environ Sci Technol. 53 (15), 8805-8812 (2019).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elucidating+the+metabolism+of+2%2C4-Dibromophenol+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Elucidating the metabolism of 2,4-Dibromophenol in plants.</a> J Vis Exp. (192), e65089(2023).</li>
<li>Zucco, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Inter-laboratory+study+to+evaluate+the+effects+of+medium+composition+on+the+differentiation+and+barrier+function+of+Caco-2+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Atla-Altern+Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">An Inter-laboratory study to evaluate the effects of medium composition on the differentiation and barrier function of Caco-2 cell lines.</a> Atla-Altern Lab Anim. 33, 603-618 (2005).</li>
<li>Eisenbrand, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+in+vitro+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Methods of in vitro toxicology.</a> Food Chem Toxicol. 40, 193-236 (2002).</li>
<li>Sambuy, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Caco-2+cell+line+as+a+model+of+the+intestinal+barrier%3A+influence+of+cell+and+culture-related+factors+on+Caco-2+cell+functional+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The Caco-2 cell line as a model of the intestinal barrier: influence of cell and culture-related factors on Caco-2 cell functional characteristics.</a> Cell Biol Toxicol. 21, 1-26 (2005).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake%2C+translocation%2C+and+subcellular+distribution+of+three+triazole+pesticides+in+rice%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Pollut+Res%22%5BJournal%5D)">Uptake, translocation, and subcellular distribution of three triazole pesticides in rice.</a> Environ Sci Pollut Res. 29 (17), 25581-25590 (2022).</li>
<li>Satapute, P., Kamble, M. V., Adhikari, S. S., Jogaiah, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+triazole+pesticides+on+tillage+soil+microbial+populations+and+metabolic+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">Influence of triazole pesticides on tillage soil microbial populations and metabolic changes.</a> Sci Total Environ. 651, 2334-2344 (2019).</li>
<li>Xu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+possible+but+unrecognized+risk+of+acceptable+daily+intake+dose+triazole+pesticides+exposure-bile+acid+disturbance+induced+pharmacokinetic+changes+of+oral+medication%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">A possible but unrecognized risk of acceptable daily intake dose triazole pesticides exposure-bile acid disturbance induced pharmacokinetic changes of oral medication.</a> Chemosphere. 322, 138209(2023).</li>
<li>Louis, K. S., Siegel, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+analysis+using+trypan+blue%3A+manual+and+automated+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods.</a> Methods Mol Biol. 740, 7-12 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Ácido 2,4-diclorofenoxiacético</td><td>WAKO</td><td>1 mg/L</td><td></td></tr><tr><td>20% H2O2</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td><td>10011218-500ML</td><td></td></tr><tr><td>6-benzilaminopurina</td><td>WAKO</td><td>0,5 mg/L</td><td></td></tr><tr><td>75% etanol</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td><td>1269101-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>96 poços placa</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Acetonitrila</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Incubadora de clima artificial</td><td>Ningbo DongNan Lab Equipment Co., Ltd</td><td>RDN-1000A-4</td><td></td></tr><tr><td>Autoclaves</td><td>STIK</td><td>MJ-Series</td><td></td></tr><tr><td>Caco-2 células</td><td>Nuoyang Biotechnology Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Reagentes CCK8</td><td>Nanjing Jiancheng Instituto de Bioengenharia, China</td><td>G021-1-3</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2 incubadora</td><td>Labtrip</td><td>HWJ-3-160</td><td></td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido Solarbio</td><td>Life Sciences</td><td>D8371</td><td></td></tr><tr><td>Diniconazol, 98,7%</td> <td>J& K Scientific</td><td>83657-24-3</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's modified Eagle's medium</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>11965-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>balança eletrônica</td><td>Shanghai Precision Instrument Co., Ltd</td><td>FA1004B</td><td></td></tr><tr><td>Soro bovino fetal</td><td>Cellmax</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Espectrofotômetro de fluorescência</td><td>Tecan</td><td>Infinite M200</td><td></td></tr><tr><td>Flusilazole, 98,5%</td> <td>J& K Scientific</td><td>85509-19-9; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Liofilizador</td><td>SCIENTZ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Moedor de tecidos de alto rendimento</td><td>SCIENTZ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscópio invertido</td><td>Leica Biosystems</td><td>DMi1</td><td></td></tr><tr><td>Sistema Milli-Q</td><td>Millipore</td><td>MS1922801-4L</td><td></td></tr><tr><td>Murashige & Skoog medium</td><td>HOPEBIO</td><td>HB8469-7</td><td></td></tr><tr><td>Concentrador de sopro de nitrogênio</td><td>AOSHENG</td><td>MD200-2</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>P1022-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina-estreptomicina Líquido</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>P1400-100 mL</td><td></td></tr><tr><td>Propiconazol, 100%</td> <td>J& K Scientific</td><td>60207-90-1&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Pesquisa mais</td><td>Eppendorf</td><td>10-1000 &mu; L</td><td></td></tr><tr><td>Sementes de cenoura do dedo mindinho (Daucus carota var. sativus)</td> <td>Shouguang Seed Industry Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>agitando incubadoras</td><td>Shanghai bluepard instruments Co., Ltd.</td><td>THZ-98AB</td><td></td></tr><tr><td>Tebuconazol, 100%</td> <td>J& K Scientific</td><td>107534-96-3</td><td></td></tr><tr><td>Solução de tripsina-EDTA</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>T1300-100 mL</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de ultrassom</td><td>ZKI</td><td>UC-6</td><td></td></tr><tr><td>Bancada super limpa esterilizada por UV</td><td>Instrumento de vórtice AIRTECH</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Wuxi Laipu Instrument Equipment Co., Ltd</td><td>BV-1010</td><td></td></tr></tbody></table>

avaliação da citotoxicidade de metabólitos de pesticidas triazólicos típicos em plantas

Assessing Cytotoxicity of Metabolites of Typical Triazole Pesticides in Plants

A Figura 1 representa o esquema do método proposto para geração, extração e avaliação da citotoxicidade de metabólitos de pesticidas em calos de cenoura. Na Figura 2, as curvas de cinética de absorção e metabolismo dos agrotóxicos testados, a partir das quais podemos constatar que as concentrações de agrotóxicos nos meios de cultura diminuíram exponencialmente, enquanto as dos calos de cenoura começaram a aumentar, atingindo o pico em 4 ou 8 h, seguido por uma d...

Avaliação da citotoxicidade de metabólitos de pesticidas triazólicos típicos em plantas

Various organic pollutants have been released into the environment because of anthropogenic activities. These pollutants can be taken up by crop plants, ...

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Environment

Ambiente

Este manuscrito descreve como as taxas de metabolismo do herbicida podem ser efetivamente quantificadas com folhas excisadas de uma erva daninha dicotiledônea, reduzindo assim a variabilidade e removendo quaisquer possíveis efeitos de confusão da absorção ou translocação do herbicida normalmente observados em ensaios de plantas inteiras.

Medindo Taxas de Herbicida Metabolismo em Dicot Weeds com um ensaio extirpado Folha

Os protocolos são descritos para avaliar a toxicidade de produtos químicos para mosquitos imaturos e adultos para o desenvolvimento como novas classes de larvicidas, adulticides e Endectocidas. Os protocolos permitem o elevado-throughput teste de químicas múltiplas na dose de ponto único e posterior avaliação através do ensaio de resposta de dose para determinar a toxicidade em contato ou ingestão.

Protocolos para testar a toxicidade de romance químicas inseticidas para mosquitos

Este trabalho apresenta um protocolo para o estabelecimento de uma cultura de suspensão celular derivada de folhas de chá (Camellia sinensis L.) que podem ser utilizadas para estudar o metabolismo de compostos externos que podem ser tomados por toda a planta, como inseticidas.

Estudo sobre o metabolismo de seis inseticidas sistêmicas em uma cultura de suspensão celular recém-estabelecida derivada do chá (Camellia sinensis L.) Folhas

Muitas vezes é necessário avaliar a citotoxicidade potencial de um conjunto de compostos em células cultivadas. Aqui, nós descrevemos uma estratégia para tela confiável para compostos tóxicos em um formato 96-well.

Uma estratégia para identificar compostos que afetam o crescimento celular e sobrevivência em células de mamíferos cultivadas em baixa a moderada taxa de transferência

O protocolo descreve um ensaio rápido, de alto rendimento, confiável, barato e imparcial para determinar eficientemente a viabilidade celular. Este ensaio é particularmente útil quando as mitocôndrias das células foram danificadas, o que interfere com outros ensaios. O ensaio utiliza a contagem automatizada de células manchadas com dois corantes nucleares – Hoechst 33342 e iodeto de propidium.

Um ensaio automatizado de coloração nuclear diferencial para determinação precisa da citotoxicidade mitocana

Aqui, descrevemos um bioensaio usando brometo de 3-(4′,5′-dimetiltiazol-2′-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT) para testar oximas espirocíclicos previamente sintetizados.

Síntese Espirocíclica Funcionalizada de Heterociclos e Ensaio de Citotoxicidade

Este protocolo apresenta ensaios de citotoxicidade comumente utilizados (ensaios de Alamar Blue [AB], CFDA-AM, Neutral Red e MTT) adaptados para a avaliação da citotoxicidade em linhagens celulares de embrião de peixe-zebra (ZEM2S) e fígado (ZFL) em placas de 96 poços.

Ensaios de citotoxicidade com linhagens celulares de peixe-zebra

O presente protocolo descreve um método simples e eficiente para a identificação de metabólitos do 2,4-dibromofenol em plantas.

Elucidando o metabolismo do 2,4-dibromofenol em plantas

Os compostos de tiofenesulfonamida são inibidores potentes e específicos dos reguladores de detecção de quorum Vibrio LuxR / HapR que bloqueiam sua atividade in vivo, impedindo assim a transcrição de genes para virulência, motilidade e biofilmes. Este protocolo detalha como esses compostos são sintetizados, modelados in silico e testados in vivo quanto à atividade contra LuxR / HapR.

Síntese e Ensaio de Inibidores de Detecção de Quorum Vibrio

Este protocolo fornece uma estrutura sistemática para avaliar como os fitoquímicos podem potencializar os efeitos bactericidas dos biocidas tradicionais usando modelagem de atividade bactericida e ensaios de interação combinatória, que visam identificar misturas sinérgicas que melhorem o controle microbiano e reduzam o uso geral de biocidas.

In Vitro Avaliação dos Efeitos Potenciadores de Moléculas Derivadas de Plantas sobre Biocidas Convencionais

Aprenda a avaliar a citotoxicidade integral de metabólitos de pesticidas triazólicos em plantas usando cultura de calo vegetal e linhagens celulares humanas. Este método combina modelos vegetais e humanos para uma avaliação toxicológica mais completa.

Avaliação da citotoxicidade de metabólitos de pesticidas triazólicos típicos em plantas

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