Name: Monitoramento da glicose no sangue na prole de camundongos após injeção intracitoplasmática de espermatozóides (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-17T13:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 11 s
Description: Aprenda a monitorar a glicose no sangue em camundongos após injeção intracitoplasmática de espermatozóides. Este protocolo ICSI-ET investiga alterações metabólicas relacionadas à idade na prole.

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<meta charset="utf8"></head><body>Modelo de camundongo ICSI-ET para estudar impactos de longo prazo no metabolismo da glicose

<ol><li>Palermo, G., Joris, H., Devroey, P., Van Steirteghem, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancies+after+intracytoplasmic+injection+of+single+spermatozoon+into+an+oocyte%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte.</a> Lancet. 340 (8810), 17-18 (1992).</li>
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<li>Goldsmith, S., Mcintyre, S., Badawi, N., Hansen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+palsy+after+assisted+reproductive+technology%3A+A+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Cerebral palsy after assisted reproductive technology: A cohort study.</a> Dev Med Child Neurol. 60 (1), 73-80 (2018).</li>
<li>Hansen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intellectual+disability+in+children+conceived+using+assisted+reproductive+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Intellectual disability in children conceived using assisted reproductive technology.</a> Pediatrics. 142 (6), e20181269(2018).</li>
<li>Chang, R. C., Wang, H., Bedi, Y., Golding, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconception+paternal+alcohol+exposure+exerts+sex-specific+effects+on+offspring+growth+and+long-term+metabolic+programming%5BTitle%5D)+AND+%22Epigenetics+Chromatin%22%5BJournal%5D)">Preconception paternal alcohol exposure exerts sex-specific effects on offspring growth and long-term metabolic programming.</a> Epigenetics Chromatin. 12 (1), 9(2019).</li>
<li>Grasemann, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parental+diabetes%3A+The+akita+mouse+as+a+model+of+the+effects+of+maternal+and+paternal+hyperglycemia+in+wildtype+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Parental diabetes: The akita mouse as a model of the effects of maternal and paternal hyperglycemia in wildtype offspring.</a> PLoS One. 7 (11), e50210(2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,25% de avertin (2,2,2-tribromoetanol)</td><td>Nanjing Aibei</td><td>M2960</td><td>para anestesia</td></tr><tr><td>Placas de Petri bacteriológicas estilo 35 x 10 mm com tampa estanque, poliestireno virgem de grau cristalino, estéril</td><td>BD</td><td>353001</td><td></td></tr><tr><td>Placas de Petri Bacteriológicas estilo 50 x 9 mm com tampa hermética, poliestireno virgem de grau cristalino, estéril</td><td>BD</td><td>351006</td><td></td></tr><tr><td>Armário de Biossegurança</td><td>ESCO</td><td>class <img alt="Equação 1" src="/files/ftp_upload/66212/66212eq01.jpg" style="margin: auto; "> BSC</td><td>Operações assépticas, fabricação de pratos de cultura, alíquotas de reagentes, etc.</td></tr><tr><td>Incubadora de CO2</td><td>Thermo</td><td>8000DH</td><td>Microscópio</td></tr> de <tr><td>Dissecção de Cultura de Embriões</td><td>Olympus</td><td>SZX16</td><td>Uso na transferência de embriões de camundongos</td></tr><tr><td>Fluorinert Fc-770</td><td>SIGMA</td><td>F3556</td><td>Fluorinert FC-770 é um líquido totalmente fluorado termicamente estável com alta rigidez dielétrica e resistividade, usado como glicosímetro portátil de fluido operacional</td></tr><tr><td></td><td>Roche</td><td>AccuChek performa</td><td>Blood medição de glicose</td></tr><tr><td>HTF</td><td>Merck</td><td>MR-070-D</td><td>O Fluido Tubário Humano EmbryoMax (HTF) (1x), líquido projetado para uso com fertilização in vitro de camundongo, está disponível em um formato de 50 mL e foi otimizado e validado para cultura de embriões.</td></tr><tr><td>Microinjetor Hidráulico</td><td>Eppendorf</td><td>CellTram 4r Óleo, 5196000030</td><td>Para injeção de esperma</td></tr><tr><td>Microscópio Invertido</td><td>Nikon</td><td>TI2-U</td><td>Host de observação de micromanipulação</td></tr><tr><td>KSOM</td><td>Merck</td><td>MR-020P-D</td><td>(1x), Pó, sem Vermelho de Fenol, 5 x 10 mL</td></tr><tr><td>M2</td><td>Merck</td><td>MR-015-D</td><td>EmbryoMax M2 Médio (1x), Líquido, com Micromanipulador de Vermelho de Fenol</td></tr><tr><td></td><td>NARISHIGE</td><td>NTX-N4</td><td>Óleo mineral para braço de micromanipulação</td></tr><tr><td></td>O óleo mineral <td>SIGMA</td><td>M8410</td><td>é adequado para uso como camada de cobertura para controlar a evaporação e a contaminação cruzada em várias aplicações de biologia molecular.</td></tr><tr><td>Cortador de agulhas</td><td>Nanjing Aibei</td><td>Sutter MF-800</td><td>Uso para fabricação de agulhas de micromanipulação</td></tr><tr><td>Extrator de agulhas</td><td>Nanjing Aibei</td><td>Sutter modelo p-100</td><td>Uso para fazer agulhas de micromanipulação</td></tr><tr><td>Piezo Drill Trip Mouce ICSI</td><td>Eppendorf</td><td>5195000.087</td><td>Aplicação da agulha de injeção ICSI.</td></tr><tr><td>Micromanipulador piezoelétrico (quebrador de membrana)</td><td>Eppendorf</td><td>Eppendorf PiezoXpert</td><td>Uso de micropulsos para quebrar a zona pelúcida e o oolema do oócito</td></tr><tr><td>Microinjetor pneumático</td><td>Eppendorf</td><td>CellTram 4r Air, 5196000013</td><td>Para fixar o oócito</td></tr><tr><td>Gonadotrofina Coriônica Humana (Hcg)</td><td>Nanjing Aibei</td><td>M2520</td><td>Reagente de esterilização, injeção intraperitoneal. 50 UI/mL</td></tr><tr><td>Gonadotrofina sérica de égua grávida pronta para uso (PMSG)</td><td>Nanjing Aibei</td><td>M2620</td><td>Reagente de esterilização, injeção intraperitoneal. 50 UI/mL</td></tr><tr><td>Estereomicroscópio</td><td>Olympus</td><td>SZX7</td><td>Recuperação de oócitos e observação do desenvolvimento embrionário</td></tr></tbody></table>

monitoramento da glicose no sangue na prole de camundongos após injeção intracitoplasmática de espermatozóides

Monitoring Blood Glucose in Mouse Offspring After Intracytoplasmic Sperm Injection

Em nosso laboratório, alcançamos uma taxa de fertilização de 89,57% e uma taxa de 2 células de 87,38% usando ICSI com espermatozóides caudais epididimais em camundongos. A taxa de natalidade da prole após o TE é de aproximadamente 42,50%. Notavelmente, todas as taxas de fertilização, taxas de 2 células e taxas de natalidade da prole são comparáveis aos níveis alcançados na TARV humana, permitindo uma simulação abrangente de diferentes estágios das técnicas de TARV humana em camundongos. Mais detalhes são fornecidos na Tabela 1 e na Tabela 2. Não houve flutuação significativa nos níveis aleatórios de glicose no sangue entre camundongos nascidos naturalmente e camundongos ICSI durante o processo de crescimento e desenvolvimento (Figura 2). No entanto, camundongos ICSI machos mostraram níveis continuamente altos de glicose no sangue em jejum durante todo o experimento (Figura 3), indicando comprometimento da homeostase da glicose no sangue em jejum. Curiosamente, camundongos ICSI fêmeas não mostraram alterações em comparação com o grupo controle. No GTT, o nível de glicose no sangue mostrou mudança significativa entre camundongos ICSI machos e o grupo controle (Figura 4), e não houve essa diferença em camundongos fêmeas. Esses resultados sugeriram que a prole obtida usando a tecnologia ICSI pode sofrer de diabetes, e o resultado foi relacionado ao sexo. Embora os camundongos fêmeas não apresentassem o fenótipo de diabetes, o fenótipo de sobrepeso de camundongos ICSI machos e fêmeas foi consistente (Figura 5).
Usando o protocolo de injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) descrito aqui, alcançamos altas taxas de fertilização e desenvolvimento embrionário em camundongos. Em um experimento representativo, 89,57% dos oócitos foram fertilizados após ICSI, como evidenciado pela formação de dois pronúcleos. Às 24 h após a ICSI, 87,38% dos zigotos se desenvolveram para o estágio embrionário de 2 células. Após a transferência de embriões para fêmeas receptoras, a taxa de natalidade de filhotes vivos foi de 42,50% (resultados positivos). Usando o protocolo otimizado de injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) descrito aqui, geramos com eficiência descendentes de oócitos e espermatozoides de camundongos. É importante ressaltar que uma caracterização completa de animais derivados de ICSI revelou perturbações metabólicas na ausência de defeitos grosseiros de desenvolvimento.
Em comparação com os controles criados naturalmente, camundongos ICSI machos, mas não fêmeas, apresentaram homeostase de glicose prejudicada, evidenciada por glicose no sangue em jejum elevada (Figura 3) e tolerância à glicose reduzida em testes de tolerância à glicose intraperitoneal (Figura 4). Essas alterações podem resultar de deficiências de reprogramação durante a fertilização mediada por ICSI ou anormalidades genéticas / epigenéticas sutis incorridas durante a manipulação de espermatozoides.
Além disso, camundongos ICSI machos e fêmeas apresentaram aumento do peso corporal em comparação com os controles (Figura 5), sugerindo uma propensão à obesidade. Embora a técnica ICSI de camundongos modele de forma confiável os resultados de ICSI humanos, os fenótipos metabólicos observados ressaltam a necessidade de interpretar cautelosamente os resultados dos modelos animais de ICSI. A avaliação abrangente do crescimento, saúde e comportamento é fundamental para determinar a adequação dos camundongos ICSI para aplicações a jusante.
Em conjunto, esses dados ilustram a utilidade do protocolo ICSI de camundongos para gerar descendentes de forma eficiente para estudos, ao mesmo tempo em que destacam a importância de avaliar minuciosamente os resultados fenotípicos em animais derivados de ICSI. As anormalidades metabólicas específicas do sexo observadas neste exemplo ressaltam a necessidade de interpretação cuidadosa dos resultados dos modelos de camundongos ICSI.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig01.jpg"> Figura 1: Diagrama da preparação da placa para injeção intracitoplasmática de espermatozóides em camundongos. A tampa da placa de cultura de células foi dividida em metades superior e inferior. A metade superior continha gotículas de solução de polivinilpirrolidona a 10% para colocação de espermatozoides. A metade inferior continha gotículas de meio M2 para a realização do procedimento de ICSI. Todas as gotículas foram cobertas com óleo mineral para evitar a evaporação. Essa configuração de placa permitiu a transferência sequencial de espermatozoides e oócitos entre gotículas de PVP e M2 para permitir o processo de ICSI. As áreas separadas impediram a mistura de meios durante o procedimento. Abreviaturas: ICSI = injeção intracitoplasmática de espermatozoides; PVP = polivinilpirrolidona. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig02.jpg"> Figura 2: Níveis aleatórios semanais de glicose no sangue em camundongos controle (n = 5) e ICSI (n = 5) criados naturalmente durante o desenvolvimento pós-natal. Os níveis de glicose no sangue foram medidos semanalmente após jejum noturno da veia caudal de camundongos controle e ICSI usando um glicosímetro. Os dados são apresentados como média ± EPM. A significância estatística foi avaliada por meio de uma ANOVA de duas vias, ns, P &gt; 0,05. Abreviaturas: SEM = Erro Padrão da Média; ICSI = injeção intracitoplasmática de espermatozoides; ns = não significativo; NM = acasalamento natural. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig03.jpg"> Figura 3: Níveis semanais de glicose no sangue em jejum no controle criado naturalmente (n = 7 para machos, n = 7 para fêmeas) e camundongos tratados com ICSI (n = 7 para machos, n = 7 para fêmeas) durante o desenvolvimento pós-natal. Após o jejum noturno, os níveis de glicose no sangue foram medidos semanalmente a partir da veia da cauda de camundongos controlados em jejum e tratados com ICSI usando um glicosímetro. Observou-se que camundongos machos tratados com ICSI, mas não fêmeas, exibiram níveis significativamente elevados de glicose no sangue em jejum em comparação com seus controles pareados por sexo a partir de 8 semanas de idade. Os dados são apresentados como média ± EPM. A significância estatística foi avaliada por meio de uma ANOVA de duas vias, ns, P &gt; 0,05, *** P &lt; 0,001, **** P &lt; 0,0001). Abreviaturas: SEM = Erro Padrão da Média; ICSI = injeção intracitoplasmática de espermatozoides; ns = não significativo; NM = acasalamento natural. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig04.jpg"> Figura 4: Teste de tolerância à glicose intraperitoneal em camundongos machos criados naturalmente (n = 5) e tratados com ICSI (n = 5) às 16 semanas de idade. Após um jejum noturno, os camundongos receberam uma injeção intraperitoneal de glicose (2 g / kg de peso corporal). Os níveis de glicose no sangue foram então medidos 0, 30, 60 e 120 minutos após a injeção. Camundongos machos tratados com ICSI exibiram níveis significativamente mais altos de glicose no sangue em 30, 60 e 120 minutos durante o IPGTT em comparação com o controle criado naturalmente. Os dados são apresentados como média ± EPM. As análises foram realizadas por meio de ANOVA de duas vias. ns, P &gt; 0,05. *P &lt; 0,05. Abreviaturas: IPGTT = Teste de tolerância à glicose intraperitoneal; EPM = Erro Padrão da Média; ICSI = injeção intracitoplasmática de espermatozoides; ns = não significativo; NM = acasalamento natural. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig05.jpg"> Figura 5: Rastreamento do peso corporal de controles criados naturalmente (n = 5 machos, n = 5 fêmeas) e camundongos tratados com ICSI (n = 5 machos, n = 5 fêmeas) de 4 a 20 semanas de idade. Medições semanais revelaram que camundongos machos e fêmeas tratados com ICSI exibiram peso corporal significativamente aumentado em comparação com seus controles pareados por gênero, começando com 8 semanas de idade. Os dados são apresentados como média ± EPM. As análises foram realizadas por meio de ANOVA de duas vias. P &lt; 0,001. P &lt; 0,0001. Abreviaturas: SEM = Erro Padrão da Média; ICSI = injeção intracitoplasmática de espermatozoides; ns = não significativo; NM = acasalamento natural. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig05large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<table border="1" fo:font-size="8px" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td style="min-width: 60px;"></td>
			<td style="min-width: 60px;">Ovócitos</td>
			<td style="min-width: 60px;">Zigotos</td>
			<td style="min-width: 60px;">Taxa de fertilização (%)</td>
			<td style="min-width: 60px;">de 2 células</td>
			<td style="min-width: 60px;">Taxa de 2 células (%)</td>
			<td style="min-width: 60px;">4-8 células</td>
			<td style="min-width: 60px;">Taxa de 4-8 células (%)</td>
			<td style="min-width: 60px;">Mórula</td>
			<td style="min-width: 60px;">Taxa de Morula</td>
			<td style="min-width: 60px;">Blastocistos</td>
			<td style="min-width: 60px;">Taxa de blastocistos</td>
		</tr><tr><td style="min-width: 60px;">Cauda espermatozoides ICSI1</td>
			<td style="min-width: 60px;">90</td>
			<td style="min-width: 60px;">84</td>
			<td style="min-width: 60px;">93.33</td>
			<td style="min-width: 60px;">76</td>
			<td style="min-width: 60px;">90.48</td>
			<td style="min-width: 60px;">72</td>
			<td style="min-width: 60px;">85.71</td>
			<td style="min-width: 60px;">69</td>
			<td style="min-width: 60px;">82.14</td>
			<td style="min-width: 60px;">64</td>
			<td style="min-width: 60px;">76.19</td>
		</tr><tr><td style="min-width: 60px;">Cauda espermatozóide ICSI2</td>
			<td style="min-width: 60px;">80</td>
			<td style="min-width: 60px;">72</td>
			<td style="min-width: 60px;">90</td>
			<td style="min-width: 60px;">62</td>
			<td style="min-width: 60px;">86.11</td>
			<td style="min-width: 60px;">59</td>
			<td style="min-width: 60px;">81.94</td>
			<td style="min-width: 60px;">53</td>
			<td style="min-width: 60px;">73.61</td>
			<td style="min-width: 60px;">46</td>
			<td style="min-width: 60px;">63.89</td>
		</tr><tr><td style="min-width: 60px;">Cauda esperma ICSI3</td>
			<td style="min-width: 60px;">60</td>
			<td style="min-width: 60px;">50</td>
			<td style="min-width: 60px;">83.33</td>
			<td style="min-width: 60px;">42</td>
			<td style="min-width: 60px;">84</td>
			<td style="min-width: 60px;">37</td>
			<td style="min-width: 60px;">74</td>
			<td style="min-width: 60px;">32</td>
			<td style="min-width: 60px;">64</td>
			<td style="min-width: 60px;">28</td>
			<td style="min-width: 60px;">56</td>
		</tr><tr><td style="min-width: 60px;">Total</td>
			<td style="min-width: 60px;">230</td>
			<td style="min-width: 60px;">206</td>
			<td style="min-width: 60px;">89.57</td>
			<td style="min-width: 60px;">180</td>
			<td style="min-width: 60px;">87.38</td>
			<td style="min-width: 60px;">168</td>
			<td style="min-width: 60px;">81.55</td>
			<td style="min-width: 60px;">154</td>
			<td style="min-width: 60px;">74.76</td>
			<td style="min-width: 60px;">138</td>
			<td style="min-width: 60px;">66.99</td>
		</tr></tbody></table>Tabela 1: Resultados de desenvolvimento após ICSI em camundongos. Abreviatura: ICSI = injeção intracitoplasmática de espermatozoides.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Não.</td>
			<td>Não. de embriões transferidos</td>
			<td>Não. de nascimento (%)</td>
			<td>Macho</td>
			<td>Fêmea</td>
			<td>Taxa de natalidade (%)</td>
		</tr><tr><td>1</td>
			<td>6</td>
			<td>3</td>
			<td>3</td>
			<td>0</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>2</td>
			<td>6</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>0</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>3</td>
			<td>5</td>
			<td>2</td>
			<td>0</td>
			<td>2</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>4</td>
			<td>8</td>
			<td>4</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>5</td>
			<td>8</td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>6</td>
			<td>7</td>
			<td>5</td>
			<td>3</td>
			<td>2</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Total</td>
			<td>40</td>
			<td>17</td>
			<td>10</td>
			<td>7</td>
			<td>42.5</td>
		</tr></tbody></table>Tabela 2: Resultados do nascimento após transplante uterino de embriões de camundongos ICSI. Abreviatura: ICSI = injeção intracitoplasmática de espermatozoides.

Monitoramento da glicose no sangue na prole de camundongos após injeção intracitoplasmática de espermatozóides

Human lifespan is considerably long, while mouse models can simulate the entire human lifespan in a relatively short period, with one year of mouse life ...

monitoring-blood-glucose-mouse-offspring-after-intracytoplasmic-sperm

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologia do Desenvolvimento

Este vídeo demonstra o efeito da infusão contínua de drogas no cérebro do camundongo nos níveis de glicose no sangue. O metabolismo da glicose é avaliado coletando sangue da cauda de um camundongo em jejum e medindo os níveis de glicose antes e depois da administração oral de glicose. A tolerância à insulina é avaliada pela injeção de insulina no camundongo, com níveis de glicose registrados em intervalos específicos.

Avaliando o efeito da infusão contínua de drogas no cérebro de camundongos nos níveis periféricos de glicose

Este protocolo estuda o papel do ligante de chemokine (C-C motif) 5 (CCL5) no hipotálamo, entregando um antagonista, MetCCL5, dentro do cérebro de rato usando um sistema de infusão de cérebro de bomba micro-osmótica. Esta inibição transitória de CCL5 atividade interrompida hipotalâmica insulina sinalização, levando à intolerância à glicose e a sensibilidade periférica à insulina sistêmica.

Estudando o sinal de insulina hipotalâmico a intolerância de glicose periférica com um sistema de infusão contínua de drogas dentro do cérebro de rato

Neste estudo, descrevemos um sistema no ovo como uma ferramenta promissora para testar compostos insulino-mimética em um organismo vivo. As principais vantagens incluem taxas de transferência adequada e a custos aceitáveis, que permitam a identificação de fitoquímicos com propriedades insulino-mimética.

Um modelo em Ovo para testar compostos insulino-mimética

Aqui descrevemos um novo método de detecção de estabelecimento bem sucedido de circulação sanguínea compartilhada de dois parabiontes através de uma injeção de veia caudal de glicose, o que causa danos mínimos e não é fatal para os parabiontes.

Detectando estabelecimento de suprimento de sangue compartilhado em camundongos parabióticos por injeção de glicose em veia caudal

Este estudo descreve a medição direta da produção de glicose hepática em um modelo de rato com síndrome do ovário policístico usando um rastreador de glicose isotópico estável via veia da cauda em estados ricos em jejum e glicose em conjunto.

Avaliação da Produção de Glicose Hepática em um Modelo de Rato da Síndrome do Ovário Policístico

A infecção materna é um fator de risco para distúrbios do neurodesenvolvimento. Modelos de camundongos de ativação imune materna (MIA) podem elucidar o impacto da infecção no desenvolvimento e função cerebral. Aqui, diretrizes gerais e um procedimento são fornecidos para produzir descendentes confiáveis e suscetíveis expostos ao MIA.

Gerando um Modelo Reprodutível de Ativação Imune Materna de Gestações Médias usando Poly(I:C) para Estudo de Suscetibilidade e Resiliência em Descendentes

Este artigo descreve um protocolo detalhado para aumentar a concentração de glicose no líquido cefalorraquidiano (LCR) de camundongos. Esta abordagem pode ser útil para estudar os efeitos da glicose elevada no LCR sobre a neurodegeneração, cognição e metabolismo periférico da glicose em camundongos.

Implante de Minibomba Osmótica para Aumento da Concentração de Glicose no Líquido Cefalor de Camundongos

Aqui, apresentamos um método para realizar a injeção redonda de espermátides (ROSI) em camundongos, uma técnica com aplicações clínicas promissoras e utilidade para investigar os mecanismos subjacentes ao desenvolvimento embrionário.

Injeção de espermátide redonda em camundongo

Este protocolo descreve o método para reduzir a ingestão dietética de ácido fólico ou colina em camundongos fêmeas antes da gravidez com o objetivo de investigar o impacto da dieta materna nos resultados de saúde da prole.

Modificando os níveis de ácido fólico ou colina na dieta materna para estudar o impacto das deficiências nos resultados de saúde da prole

O artigo fornece um protocolo abrangente para gerar um modelo de camundongos de ativação imunológica materna (MIA) para estudar os efeitos da inflamação gestacional precoce no neurodesenvolvimento, incluindo métricas-chave para garantir confiabilidade e reprodutibilidade.

Geração do modelo de camundongo de ativação imunológica materna gestacional precoce para avaliar a inflamação pré-natal no neurodesenvolvimento

Aprenda a monitorar a glicose no sangue em camundongos após injeção intracitoplasmática de espermatozóides. Este protocolo ICSI-ET investiga alterações metabólicas relacionadas à idade na prole.

Monitoramento da glicose no sangue na prole de camundongos após injeção intracitoplasmática de espermatozóides

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