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Dissecção, processamento histológico e análise da expressão gênica do tecido adiposo marrom supra...
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JoVE Journal Biology
Dissection, Histological Processing, and Gene Expression Analysis of Murine Supraclavicular Brown Adipose Tissue

Dissecção, processamento histológico e análise da expressão gênica do tecido adiposo marrom supraclavicular murino

Full Text
3,255 Views
06:50 min
March 29, 2024

DOI: 10.3791/66475-v

Mark G Waterstraat1,2, ZiYi Wang1, Mari Kogiso1, Rommel Caballero-Juarez1,2, Miao-Hsueh Chen1

1Children's Nutrition Research Center, Department of Pediatrics,Baylor College of Medicine, 2Department of BioSciences,Rice University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study provides a detailed protocol for the dissection of supraclavicular brown adipose tissue (scBAT) from mice, which is deemed a valuable model for analyzing brown fat due to its anatomical similarities to human brown adipose tissue. The focus is on improving accessibility to scBAT research through precise dissection and subsequent histological and gene expression analyses.

Key Study Components

Research Area

  • Supraclavicular brown adipose tissue (scBAT)
  • Gene expression analysis
  • Histological techniques

Background

  • scBAT is recognized for its potential importance in metabolic research.
  • The anatomical proximity to major veins poses challenges in dissection.
  • A need for accessible and accurate extraction methods has been identified.

Methods Used

  • Dissection using a microscope for precision.
  • Gene expression analysis following tissue homogenization.
  • Hematoxylin and eosin staining for histological assessment.

Main Results

  • The protocol described improves extraction efficiency and the quality of gene expression data.
  • scBAT displays characteristic tissue structures found in brown adipose tissue.
  • The study lays groundwork for understanding scBAT's genetic lineage and physiological roles.

Conclusions

  • This protocol enables more effective research into the roles of scBAT in metabolism.
  • The findings contribute to the broader field of adipose tissue biology.

Frequently Asked Questions

What is supraclavicular brown adipose tissue (scBAT)?
scBAT is a specific type of brown fat located near the clavicles, significant for its metabolic functions.
Why is scBAT important for research?
Due to its anatomical similarities to human brown adipose tissue, scBAT serves as an excellent model for studying metabolic processes.
What challenges exist when dissecting scBAT?
The small size and its location near major veins can complicate the dissection process.
How does the protocol increase extraction efficiency?
It employs a dissecting microscope for enhanced precision and utilizes tissue homogenization to improve RNA yield.
What are the key techniques used in the study?
The study uses dissection, histological staining, and gene expression analysis techniques.
What are the main findings regarding scBAT's cellular structure?
Hematoxylin and eosin staining confirmed the presence of typical brown adipose tissue characteristics in scBAT samples.
What future research directions does this study suggest?
The study suggests defining the genetic lineage and physiological functions of scBAT, as well as developing ex-vivo models for further research.

Aqui, fornecemos um procedimento prático para dissecar e realizar análises histológicas e de expressão gênica do tecido adiposo marrom supraclavicular murino.

1 Nosso laboratório está focado em estabelecer2 tecido adiposo marrom supraclavicular 3 ou SCBAT como um depósito valioso 4 para análise de gordura marrom devido às suas semelhanças anatômicas 5 com o tecido adiposo marrom humano. 6 Este protocolo visa aumentar a acessibilidade7 da pesquisa SCBAT. 8 Este depósito pode ser intimidante devido ao seu pequeno tamanho 9 e proximidade de grandes veias no pescoço, 10 portanto, é imperativo fornecer 11 um método simples de extração e processamento de SCBAT.

12 Nossa metodologia se destaca13 em primeiro lugar pelo uso de um microscópio de dissecação 14 ao extrair SCBAT. 15 Isso aumenta a precisão 16 e a eficiência de extração, 17 que são críticas ao trabalhar 18 com um depósito de tecido tão pequeno. 19 Em segundo lugar, homogeneizamos as amostras congeladas de SCBAT 20 antes de fazer a análise da expressão gênica 21 para aumentar o rendimento de RNA para compensar 22 por uma quantidade tão baixa de tecido disponível.

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