Name: Um método modificado para cateterismo intratecal em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 15 s
Description: Aprenda um método modificado de cateterismo intratecal em ratos para administração repetitiva de fármacos em pesquisa de dor neuropática. Esta técnica simples e confiável supera limitações dos métodos tradicionais.

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<ol><li>Kong, G., Huang, Z., Zhu, Q., Wan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+two+modified+methods+of+intrathecal+catheterization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Anim%22%5BJournal%5D)">Comparison of two modified methods of intrathecal catheterization in rats.</a> Exp Anim. 69 (2), 219-223 (2020).</li>
<li>Xu, C. S., Sun, P., Lin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((a+new+design+puncture+needle+and+a+device+of+microcatheter+protection+for+lumbar+intrathecal+catheterization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Ying+Yong+Sheng+Li+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">a new design puncture needle and a device of microcatheter protection for lumbar intrathecal catheterization in rats.</a> Zhongguo Ying Yong Sheng Li Xue Za Zhi. 36 (3), 283-288 (2020).</li>
<li>Yamamoto, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurosteroid+dehydroepiandrosterone+sulphate+enhances+pain+transmission+in+rat+spinal+cord+dorsal+horn%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">Neurosteroid dehydroepiandrosterone sulphate enhances pain transmission in rat spinal cord dorsal horn.</a> Br J Anaesth. 123 (2), e215-e225 (2019).</li>
<li>Mattioli, T. A., Sutak, M., Milne, B., Jhamandas, K., Cahill, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrathecal+catheterization+influences+tolerance+to+chronic+morphine+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Intrathecal catheterization influences tolerance to chronic morphine in rats.</a> Anesth Analg. 114 (3), 690-693 (2012).</li>
<li>Wang, B. C., Hillman, D. E., Li, D., Turndorf, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+subarachnoid+catheterization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Lumbar subarachnoid catheterization in rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 38 (3), 685-688 (1991).</li>
<li>Yaksh, T. L., Rudy, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+catheterization+of+the+spinal+subarachnoid+space%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Chronic catheterization of the spinal subarachnoid space.</a> Physiol Behav. 17 (6), 1031-1036 (1976).</li>
<li>Martin, H., Kocher, L., Chery-Croze, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+lumbar+intrathecal+catheterization+in+the+rat+with+reduced-length+spinal+compression%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Chronic lumbar intrathecal catheterization in the rat with reduced-length spinal compression.</a> Physiol Behav. 33 (1), 159-161 (1984).</li>
<li>Mazur, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+simple%2C+rapid%2C+and+robust+intrathecal+catheterization+method+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Development of a simple, rapid, and robust intrathecal catheterization method in the rat.</a> J Neurosci Methods. 280, 36-46 (2017).</li>
<li>Zhang, S. X., Huang, F., Gates, M., White, J., Holmberg, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extensive+scarring+induced+by+chronic+intrathecal+tubing+augmented+cord+tissue+damage+and+worsened+functional+recovery+after+rat+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Extensive scarring induced by chronic intrathecal tubing augmented cord tissue damage and worsened functional recovery after rat spinal cord injury.</a> J Neurosci Methods. 191 (2), 201-207 (2010).</li>
<li>Ohara, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+intrathecal+catheterization+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Long-term intrathecal catheterization in the rat.</a> J Neurosci Methods. 110 (1-2), 81-89 (2001).</li>
<li>StØrkson, R. V., KjØrsvik, A., TjØlsen, A., Hole, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+catheterization+of+the+spinal+subarachnoid+space+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Lumbar catheterization of the spinal subarachnoid space in the rat.</a> J Neurosci Methods. 65 (2), 167-172 (1996).</li>
<li>Poon, Y. Y., Chang, A. Y., Ko, S. F., Chan, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+procedure+for+catheterization+of+the+thoracic+spinal+subarachnoid+space+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">An improved procedure for catheterization of the thoracic spinal subarachnoid space in the rat.</a> Anesth Analg. 101 (1), table of contents 155-160 (2005).</li>
<li>Xu, F., Li, T., Zhang, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+for+protecting+and+fixing+the+lumbar+catheters+placed+in+the+spinal+subarachnoid+space+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">An improved method for protecting and fixing the lumbar catheters placed in the spinal subarachnoid space of rats.</a> J Neurosci Methods. 183 (2), 114-118 (2009).</li>
<li>Igawa, Y., Andersson, K. E., Post, C., Uvelius, B., Mattiasson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+for+investigation+of+spinal+mechanisms+in+detrusor+instability+associated+with+infravesical+outflow+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Urol+Res%22%5BJournal%5D)">A rat model for investigation of spinal mechanisms in detrusor instability associated with infravesical outflow obstruction.</a> Urol Res. 21 (4), 239-244 (1993).</li>
<li>Hou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+procedure+for+lumbar+intrathecal+catheterization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Res%22%5BJournal%5D)">A modified procedure for lumbar intrathecal catheterization in rats.</a> Neurol Res. 38 (8), 725-732 (2016).</li>
<li>Farhadi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+open+and+ultrasound-guided+placement+of+central+venous+catheter+in+children+weighing+less+than+five+kilograms%3B+a+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Acad+Radiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of open and ultrasound-guided placement of central venous catheter in children weighing less than five kilograms; a randomized clinical trial.</a> Acad Radiol. 30 (7), 1419-1425 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Seringa</td><td></td> de 1 cc <td>Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd</td><td>1 cc</td></tr><tr><td>22 gauge &times; 1 "agulhas</td><td></td><td>Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd</td><td>22G</td></tr><tr><td>23 gauge &times; 1" agulhas</td><td></td><td>Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd</td><td>23G</td></tr><tr><td>25 &mu; L Seringas</td><td></td> Hamilton <td>Shanghai Bolige Co., Ltd</td><td>0,31 mm 25 &mu; L&nbsp;</td></tr><tr><td>4-O MERSILK SUTURA</td><td></td> NÃO ABSORVÍVEL <td>ETHICON</td><td>SA83G</td></tr><tr><td>50 mL corning tubos de centrífuga 3 cm de diâmetro</td><td>430820</td><td>CORNING</td><td></td></tr><tr><td>Cateter epidural e conector</td><td></td><td>Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd</td><td>tipo regular</td></tr> aparelho de <tr><td>gavagem</td><td></td><td>Shanghai Bolige Co., Ltd</td><td>8 #</td></tr> <tr><td>PE-10 Mirco Medical Tubing</td><td>BB31695-PE / 1</td><td>Scientific Commodities, Inc</td><td></td></tr><tr><td>Cabo de bisturi e lâminas # 10 Jiangsu</td><td></td><td>Songxin Medical Equipment Co., Ltd</td><td>125 mm</td></tr><tr><td>Tesoura</td><td></td><td>Jiangsu Songxin Medical Equipment Co., Ltd</td><td>100 mm</td></tr><tr><td>Sprague-Dawley (SD) ratos</td><td></td><td>Shanghai BK / KY Biotechnology Co., Ltd</td><td></td></tr><tr><td>Fio de aço inoxidável macho 0,2 mm de diâmetro</td><td></td><td>Dongguan Jiazhi Metal Products Technology Co., Ltd.</td><td>0,2 mm&nbsp; &vezes; &nbsp; 1m</td></tr><tr><td>fórceps</td><td></td> dentado <td>Jiangsu Songxin Medical Equipment Co., Ltd</td><td>18 cm</td></tr><tr><td>URGO fita</td><td></td> de seda <td>URGO</td><td>1,25 cm e vezes; 9,1 m</td></tr></tbody></table>

um método modificado para cateterismo intratecal em ratos

A Modified Method for Intrathecal Catheterization in Rats

Para injeção intratecal, a ponta extracorpórea do tubo PE10 foi cortada e o tubo PE10 foi selado com uma tampa de vedação entre duas injeções de drogas. Em nosso estudo piloto, a taxa de sucesso do cateterismo intratecal foi de aproximadamente 95% (19 de 20 ratos); O sucesso foi indicado por um movimento da cauda e/ou liberação de fluido transparente incolor durante o procedimento. Aproximadamente 85% dos tubos permaneceram no lugar 7 dias após a cirurgia e aproximadamente 80% permaneceram no lugar 28 dias após a cirurgia. Os ratos se recuperaram logo após a operação, e nenhuma complicação foi observada dentro de 7 dias após a cirurgia. O movimento diário foi normal e não foi observada anormalidade comportamental. Esses resultados indicam que nosso método é superior aos relatados anteriormente em termos de taxa de sucesso e taxa de permanência longa.
A paralisia completa dos membros inferiores após a injeção de lidocaína por cateteres indica o sucesso do cateterismo intratecal15. A taxa de sucesso do cateterismo intratecal é calculada dividindo-se o número total de ratos pelo número de ratos com cateterismo bem-sucedido. Com nosso método modificado, a taxa de sucesso foi de 95%, maior do que a taxa alcançada com o método relatado por Hou et al. (88%)15. Isso é mostrado na Figura 4.
O tubo intratecal foi monitorado aos 2, 5 e 7 dias após o cateterismo intratecal e a taxa de cateter de demora bem-sucedido foi calculada como número de ratos com cateter de demora bem-sucedido/número total de ratos × 100%. Aos 2, 5 e 7 dias após o cateterismo intratecal, a taxa de sucesso do cateter de demora foi de 94%, 81% e 65%, respectivamente, no estudo de StØrkson et al.11. A taxa de sucesso do cateter de demora aos 2, 5 e 7 dias após o cateterismo intratecal foi de 95%, 90% e 85%, respectivamente, com nossa técnica (Figura 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig1.jpg"> 
Figura 1. Materiais e instrumentos utilizados para cateterismo intratecal. (A) Um tubo PE10 de 15 cm de comprimento foi preparado, e o tubo foi marcado a 2 cm de uma extremidade para indicar a profundidade de inserção. (B) Um fio de aço inoxidável de 20 cm de comprimento com duas extremidades polidas foi inserido no tubo PE10 como suporte. (C) A ponta afiada da agulha 22G foi cortada com uma tesoura e a extremidade distal foi selada com uma pinça. (D) Um cateter peridural (1,0 mm de diâmetro externo) foi cortado em fragmentos de 1 cm, que foram então inseridos na agulha 22G sem ponta afiada. (E) A extremidade distal do cateter peridural foi selada com um par de pinças retas aquecidas; Este aparelho foi chamado de tampa de vedação do tubo. (F) Uma faixa antialérgica de 0,3 cm × 0,5 cm (fita de seda, 1,25 cm × 9,1 m) foi preparada com uma tesoura. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig2.jpg"> 
Figura 2. Preparação de instrumentos para cateterismo intratecal. Os instrumentos (como pinça dentada, tesoura, aparelho de gavagem, cabo de bisturi e lâminas #10) foram esterilizados com etanol por aproximadamente 2 h e depois lavados com soro fisiológico aproximadamente 30 min antes da cirurgia. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig3.jpg"> 
Figura 3. Resultados do experimento de validação da lidocaína após cateterismo intratecal. Após injeção intratecal de 20 μL de lidocaína a 2% seguida de injeção de 10 μL de solução salina normal, o rato ficou temporariamente paralisado: a paralisia dos membros inferiores ocorreu em 30 s e desapareceu 30 min depois, indicando cateterismo intratecal bem-sucedido. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig4.jpg"> 
Figura 4. Comparação da taxa de cateterismo bem-sucedido entre nosso método modificado e um método relatado anteriormente. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig4large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig5.jpg"> 
Figura 5. Comparação da taxa de cateter de longa permanência entre nosso método modificado e um método relatado anteriormente. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig5large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>　</td>
			<td>Método modificado</td>
			<td>Método prévio</td>
			<td>Vantagens do método modificado</td>
			<td>Desvantagens do método anterior</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="4">Método de orientação para inserção</td>
			<td rowspan="4">um fio de aço inoxidável</td>
			<td rowspan="4">Cânula guia (20G 0,9× 38 mm)</td>
			<td>Aumenta a elasticidade do tubo,</td>
			<td>A resistência é difícil de sentir, aumentando a dificuldade de operação</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Melhora a taxa de sucesso do cateterismo intratecal</td>
			<td>Danos nos tecidos devido à punção repetida</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reduz a necessidade de espaço operacional</td>
			<td>Uma extremidade do tubo é esticada para 1,5 vezes o comprimento original, tornando o diâmetro de ambas as extremidades diferentes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minimiza os danos aos tecidos ao redor da coluna lombar</td>
			<td>Suscetibilidade ao vazamento de líquido cefalorraquidiano porque o diâmetro da cânula guia 20G é 2 vezes ou mais que o do tubo PE10 esticado</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Comprimento do tubo PE10</td>
			<td>15 cm</td>
			<td>14 ou 28 cm</td>
			<td>Fácil de determinar o comprimento do tubo PE10, independentemente da duração da permanência do cateter</td>
			<td>A duração da permanência do cateter é menor para o tubo PE10 mais curto; suscetibilidade a cair do corpo para tubo PE10 longo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Método de fixação</td>
			<td>Sutura "8" e 4 vezes</td>
			<td>1 ou 2 contas</td>
			<td>Evita a movimentação e retração do tubo durante as atividades animais</td>
			<td>Diferença no diâmetro do tubo em ambas as extremidades e suscetibilidade ao deslocamento do tubo PE10 durante a fabricação do cordão </td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Método para vedação de tubos</td>
			<td rowspan="2">Boné de fabricação própria</td>
			<td rowspan="2">Não</td>
			<td>Previne o vazamento de líquido cefalorraquidiano </td>
			<td rowspan="2">Exigência de corte repetido do tubo PE10 </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evita o corte repetido do tubo PE10 </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Método de prevenção de retração</td>
			<td>Banda antialérgica</td>
			<td>1 ou 2 contas</td>
			<td>Evita a retração do tubo durante as atividades com animais </td>
			<td>Suscetibilidade à retração</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1. Vantagens e desvantagens do método modificado e de um método relatado anteriormente.

Um método modificado para cateterismo intratecal em ratos

Intrathecal catheterization has been widely applied in animal experiments, especially those on neuropathic pain. However, the traditional methods still ...

a-modified-method-for-intrathecal-catheterization-in-rats

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

O vídeo demonstra um método para gerar um modelo de rato com desmielinização cortical cerebral generalizada. Isso envolve a interrupção da barreira hematoencefálica injetando citocinas pró-inflamatórias em camundongos preparados com proteína recombinante da bainha de mielina. Esse processo facilita a infiltração de células imunológicas, resultando em desmielinização cortical cerebral generalizada.

Gerando a desmielinização cortical cerebral generalizada em um modelo de rato

Fonte: Chen, Y., et al. Entrega intratecal de oligonucleotídeos antisense no sistema nervoso central de ratos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a entrega de um composto de teste no líquido cefalorraquidiano (LCR) por meio de um cateter implantado na coluna vertebral lombar de um modelo de rato. O composto circula ao longo do LCR até o cérebro e a medula espinhal, entra nos neurônios e oferece potencial terapêutico.

Entrega intratecal de um composto de teste ao sistema nervoso central de ratos

Descreve-se um método para alvejar fármacos para o sistema nervoso central por qualquer implante de um cateter ou realizar uma injecção de bolus no ventrículo lateral direito de ratos. Nós nos concentramos especificamente na entrega de oligonucleotídeos antisense. Esta técnica é facilmente adaptável a outros fármacos e a ratos.

Entrega intraventricular direta de medicamentos para o Sistema Nervoso Central Rodent

Acessos vasculares para medir a hemodinâmica, fornecer fluidos e realizar amostras de sangue são importantes para qualquer estudo de modelo de pequenos animais. Apresentamos uma técnica de implante de cateteres na artéria carótida e na veia jugular comum em um rato anestesiado para conexão a um sistema para realização de monitoramento, infusões e amostragem.

Cateterismo da artéria carótida e jugular para executar as medidas hemodinâmicas, infusões e Sangue de amostragem em um Rat Consciente Modelo

O protocolo aqui apresentado permite a reprodução de uma desmielinização de matéria cinzenta generalizada de ambos os hemisférios corticais em ratos agouti machos adultos. O método compreende a implantação intracerebral de um cateter, imunização subclínica contra glicoproteína de oligodendrocyte de mielina e injeção intracerebral de uma mistura de citocinas pró-inflamatórias através do cateter implantado.

Modelo de Rato de Demyelinação Cortical Cerebral Generalizada Induzida por uma injeção intracerebral de citocinas pró-inflamatórias

Aqui, descrevemos um método para entregar drogas ao sistema nervoso central do rato implantando um cateter no espaço intrathecal lombar da espinha. Nós nos concentramos na entrega de oligonucleotídeos antisenso, embora este método seja adequado para a entrega de outras modalidades terapêuticas também.

Entrega intrathecal de oligonucleotides do antisense no sistema nervoso central do rato

A hemorragia subaracnóidea continua a carregar uma alta carga de mortalidade e morbidade no homem. Para facilitar novas pesquisas sobre a condição e sua fisiopatologia, um modelo pré-quiasmático de injeção única é apresentado.

Pré-quiasmática, injeção única de sangue autólogo para induzir hemorragia subaracnóidea experimental em modelo de rato

Um procedimento cirúrgico é descrito para realizar injeções na cisterna lombar do rato juvenil. Essa abordagem tem sido usada para a entrega intratecal de vetores de terapia gênica, mas prevê-se que essa abordagem possa ser usada para uma variedade de terapêuticas, incluindo células e medicamentos.

Entrega de vetor intratecal em ratos juvenis por injeção de cisterna lombar

Uma injeção intratecal lombar representa uma via de administração translacionalmente relevante para administrar terapia gênica ao sistema nervoso central. Este protocolo padronizado abrangente para injeções intratecais lombares em camundongos e ratos neonatais, juvenis e adultos visa orientar os pesquisadores na adoção dessa técnica para estudos pré-clínicos de terapia gênica.

Injeção intratecal lombar de vetores de terapia gênica para direcionamento do sistema nervoso central em camundongos e ratos

Este protocolo cirúrgico é um guia passo a passo para inserir um cateter intratecal no espaço subdural espinhal de um roedor para fornecer tratamento direcionado.

Acessando o espaço subdural da medula espinhal de roedores para administração de tratamento

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Um método modificado para cateterismo intratecal em ratos

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