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DOI: 10.3791/66566-v
Yun Zhu Bai1, Yuriko Terada1, Katsutaka Mineura1, Yuhei Yokoyama1, Ruben G. Nava1, Alexander S. Krupnick2, Andrew E. Gelman1, Mark J. Miller3, Daniel Kreisel1, Wenjun Li1
1Division of Cardiothoracic Surgery,Washington University in St. Louis, 2Division of Thoracic Surgery,University of Maryland, 3Division of Infectious Diseases,Washington University in St. Louis
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui, apresentamos um protocolo para obter imagens intravitais do pulmão esquerdo de camundongo transplantado usando microscopia de dois fótons. Isso representa uma ferramenta valiosa para estudar a dinâmica e as interações celulares em tempo real após o transplante de pulmão murino.
O objetivo de nossa pesquisa é entender os mecanismos imunológicos subjacentes à lesão de isquemia e reperfusão e as respostas inflamatórias e tolerogênicas após o transplante pulmonar. Queremos estudar as interações dinâmicas entre as células doadoras e receptoras. Atualmente fazemos uso de várias técnicas cirúrgicas e de imagem no estudo da imunologia do transplante de pulmão em camundongos.
Isso inclui transplante e retransplante ortotópico de pulmão esquerdo, pinçamento hilar pulmonar esquerdo, tomografia não invasiva por emissão de pósitrons e imagem intravital de dois fótons. Nossa pesquisa revela respostas imunes únicas em pulmões transplantados. Usando técnicas avançadas de imagem, descobrimos que os monócitos receptores promovem a infiltração de neutrófilos em aloenxertos pulmonares via IL-1 beta.
Também descobrimos que as células T reguladoras do FOXP3 se agrupam dentro desses aloenxertos e protegem contra a rejeição mediada por anticorpos. Nossa técnica é fácil de configurar, com materiais facilmente encontrados em um laboratório de microscopia, como cola de tecido e vidros de cobertura. Além disso, fornece um campo de visão maior em comparação com outras técnicas.
Nosso laboratório está interessado em entender os mecanismos que induzem e mantêm a tolerância ao aloenxerto pulmonar. A imagem intravital nos permitirá visualizar as interações entre as células imunes durante a rejeição e a tolerância.
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