Name: Protocolo de exercícios de natação e métodos de cuidados para ratas grávidas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-05T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 17 s
Description: Aprenda métodos de criação de ratas, treinamento de natação pré-natal e protocolos de cuidados pós-parto para estudar os efeitos do exercício materno na saúde da prole.

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<meta charset="utf8"></head><body>Explorando o exercício materno para o bem-estar da prole de ratos

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<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+during+pregnancy+enhances+vascular+function+via+epigenetic+repression+of+ca%28v%291.2+channel+in+offspring+of+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Exercise during pregnancy enhances vascular function via epigenetic repression of ca(v)1.2 channel in offspring of hypertensive rats.</a> Life Sci. 231, 116576(2019).</li>
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<li>Barnes, M. D., Heaton, T. L., Goates, M. C., Packer, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intersystem+implications+of+the+developmental+origins+of+health+and+disease%3A+Advancing+health+promotion+in+the+21st+century%5BTitle%5D)+AND+%22Healthcare%22%5BJournal%5D)">Intersystem implications of the developmental origins of health and disease: Advancing health promotion in the 21st century.</a> Healthcare. 4 (3), 45(2016).</li>
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<li>Ferrari, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+during+pregnancy+and+its+impact+on+mothers+and+offspring+in+humans+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dev+Orig+Health+Dis%22%5BJournal%5D)">Exercise during pregnancy and its impact on mothers and offspring in humans and mice.</a> J Dev Orig Health Dis. 9 (1), 63-76 (2018).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Paquímetro</td><td>Mitutoyo Measuring Instruments (Shanghai) Co., Ltd</td><td>530-101 N15</td><td>Dissecar feto</td></tr><tr><td>Balde de água circular</td><td>Naliya</td><td>N/A</td><td>Natação de rato</td></tr><tr><td>Instrumento cirúrgico experimental&nbsp;</td><td>Shenzhen RWD Life Technology Co., LTD</td><td>SP0001-G</td><td>Feto dissecar</td></tr><tr><td>lâminas de microscópio de vidro</td><td>Jiangsu Shitai experimental equipment Co., LTD</td><td>80312-3161</td><td>Esfregaço vaginal</td></tr><tr><td>Placa de Petri de vidro</td><td>Merck Life Technologies</td><td>BR455751-10EA</td><td>Criação de filhos</td></tr><tr><td>Secador de cabelo</td><td>Panasonic</td><td>EH-WNE5H</td><td>Cartão de informações sobre cuidados pós-natação</td></tr><tr><td></td><td>Zhongke Life Science</td><td>SS3</td><td>Acasalamento de rato</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Shenzhen RWD Life Technology Co., LTD</td><td>R510-22-10</td><td>Microscópio</td></tr><tr><td>de luz</td><td>Olympus</td><td>IX71-F22PH</td><td>Esfregaço vaginal</td></tr><tr><td>Gaiola de acasalamento</td><td>Zhongke Life Science</td><td>SS3</td><td>Acasalamento de rato</td></tr><tr><td>Algodão absorvente médico</td><td>Hongxiang Sanitary Materials Co., LTD</td><td>N / A</td><td>Os ratos grávidas são antecipando o parto</td></tr><tr><td>Máquina de anestesia de roedores, anestesia a gás</td><td>Shenzhen RWD Life Technology Co., LTD</td><td>R500IE</td><td>Feto dissecar</td></tr><tr><td>ração de reprodução de roedores</td><td>Pequim Huafukang Biotechnology Co., LTD</td><td>1032</td><td>Rato grávida alimentando</td></tr><tr><td>ração de manutenção de roedores</td><td>Pequim Huafukang Biotechnology Co., LTD</td><td>1022</td><td>Criação de descendentes</td></tr><tr><td>Sementes de girassol de roedores</td><td>Jolly</td><td>JP241</td><td>Suplemento nutricional</td></tr><tr><td>Algodão à prova de som</td><td>Kufu Medical Instrument</td><td>N / A</td><td>As ratas grávidas estão antecipando o parto</td></tr><tr><td>Cotonete de algodão estéril (2 mm de diâmetro)</td> <td>Kufu Medical Instrument</td><td>N / A</td><td>Esfregaço vaginal</td></tr><tr><td>Gaze estéril</td><td>Kufu Medical Instrument</td><td>N / A</td><td>Feto dissecar</td></tr><tr><td>Solução salina fisiológica para acidente vascular cerebral (0,9% NaCl)</td><td>Shandong Hualu Pharmaceutical Co., LTD</td><td>N / A</td><td>Esfregaço Vaginal</td></tr><tr><td>Termômetro</td><td>Beekman organismo</td><td>N / A</td><td>O monitoramento de ratos de natação Toalhas</td></tr><tr><td></td><td>Grace</td><td>N / A</td><td>Cuidados pós-natação</td></tr><tr><td>Recipiente de plástico transparente</td><td>Naliya</td><td>N / A</td><td>Treinamento adaptativo de natação</td></tr><tr><td>Luz ultravioleta</td><td>Merck Life Technologies</td><td>Z169633-1EA</td><td>Cuidados pós-natação</td></tr><tr><td>Aquecedor de água</td><td>Haier</td><td>EC6001-Q6S</td><td>Balança de natação de ratos</td></tr><tr><td></td><td>Electronlc Acale</td><td>JM. A10001</td><td>Medição do peso corporal</td></tr><tr><td>Wistar Rats</td><td>Vital river Laboratory Animal Technology Co., LTD</td><td>N / A</td><td>Experimento</td></tr></tbody></table>

protocolo de exercícios de natação e métodos de cuidados para ratas grávidas

Swimming Exercise Protocol and Care Methods for Pregnant Rats

Na seção de métodos de reprodução de ratos (Figura 1), determinamos o ciclo estral de ratos fêmeas fazendo lâminas de secreção vaginal para aumentar a taxa de sucesso da reprodução. O ciclo estral dos ratos dura de 4 a 5 dias, incluindo proestro, estro, metestro e diestro. Ratos fêmeas em metaestro ou diestro exibem comportamentos como distanciar-se dos machos. Ao mesmo tempo, aqueles em estro estão dispostos a acasalar, e a ovulação em ratos fêmeas ocorre principalmente no final do estro. Durante o proestro, as amostras de esfregaço vaginal contêm principalmente células epiteliais nucleadas com células queratinizadas ocasionais. No estro, o esfregaço vaginal consiste predominantemente em células epiteliais escamosas queratinizadas agrupadas em pilhas, com o desaparecimento dos núcleos aumentados das células epiteliais observados no metaestro. No metaestro, o esfregaço vaginal contém principalmente glóbulos brancos com algumas células epiteliais queratinizadas. O estágio de diestro é caracterizado por predomínio de leucócitos, com ocasionais células epiteliais nucleadas e queratinizadas (Figura 1A).
O tampão copulatório é uma substância semelhante a um gel composta de secreções vaginais e seminais. A rata forma um tampão copulatório para evitar que outros ratos machos se acasalem novamente, ao mesmo tempo em que bloqueia a vagina da rata para evitar que o esperma do rato macho flua para fora. A presença do tampão copulatório não indica necessariamente uma reprodução bem-sucedida, mas apenas a ocorrência de comportamento de acasalamento. Portanto, é necessário realizar lâminas de esfregaço vaginal na rata novamente pela manhã após o acasalamento. A presença de espermatozóides no esfregaço vaginal indica reprodução bem-sucedida. É importante monitorar o peso das ratas após este dia para observar se ele aumenta gradualmente, o que é um sinal de gravidez bem-sucedida. Se não houver formação de tampão copulatório dentro de dois dias após o acasalamento, ou se um tampão copulatório se formar, mas nenhum espermatozóide for observado no esfregaço, recomenda-se substituir o rato macho e tentar a reprodução novamente. Ao examinar as lâminas de secreção vaginal ao microscópio, determinamos o estágio do ciclo estral em ratas e usamos aquelas em proestro e estro para reprodução. As ratas prenhes foram aleatoriamente designadas para um grupo sedentário (SED) ou exercício (EX), com treinamento de natação realizado de GD1 a GD20 (Figura 1B). Para observar os plugues copulatórios formados após o acasalamento de ratos, usamos uma gaiola de acoplamento especialmente projetada para o acasalamento de ratos. A gaiola de acoplamento consiste em uma bandeja de base, um fundo de malha de arame, uma estrutura de gaiola sem fundo e uma tampa de gaiola de arame (Figura 1C).
Antes de dar à luz, as ratas grávidas podem exibir comportamento de nidificação (Figura 1E), utilizando materiais em seu ambiente para construir um ninho aconchegante e quente para seus filhotes. Recomenda-se colocar uma quantidade de algodão desengordurado na gaiola correspondente ao tamanho da rata prenhe sempre que a transferir para uma nova gaiola limpa no GD20. Para estudar ratos jovens, eles devem ser criados até uma certa idade. Os ratos são desmamados cerca de 21 dias após o nascimento. Portanto, no 21º dia após o nascimento, os ratos bebês são separados por sexo (Figura 1F) para criação individual. O método de identificação do sexo dos ratos envolve a observação da distância entre a genitália e o ânus. Nos machos, a distância é maior e eles têm pêlo entre a genitália e o ânus. A genitália masculina é mais proeminente e pronunciada em comparação com as mulheres. As ratas têm mamilos mais visíveis do que os machos.
Recomenda-se a pesagem e o registo diários de GD1 a GD20 durante a gravidez de ratos (Figura 2). O peso dos ratos deve aumentar gradualmente durante a gravidez (Figura 2A), e os pesos diários devem ser comparados com o peso do dia anterior. Isso é crucial porque os ratos tendem a consumir seus embriões após um aborto espontâneo, dificultando a detecção apenas por meio da observação. Além disso, monitorar o peso do rato pode ajudar a identificar exercícios excessivos. Se o peso do rato diminuir em mais de 3 g, reduza a duração do treinamento físico para esse dia em 50%. No GD20.5, ratas prenhes são dissecadas para obtenção de fetos e placentas, e a relação entre o peso fetal e o peso placentário é definida como eficiência placentária (Figura 2B). Meça o comprimento do feto da ponta da cabeça até a parte inferior da garupa em posição lateral usando uma régua para obter o comprimento do corpo fetal (Figura 1G e 2C).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66577/66577fig01.jpg"> Figura 1: Modelo de gravidez de ratos. (A) Os resultados do esfregaço vaginal em diferentes períodos de estro, imagens do tampão copulatório dos ratos e presença de espermatozóides em esfregaços vaginais no segundo dia após o acasalamento. (B) Esquema ilustrando o programa de treinamento de natação pré-natal. (C) Vistas gerais da gaiola de acasalamento para os ratos. (D) Uma foto do treinamento de natação para ratos prenhes demonstrando o diâmetro do balde de água usado. (E) O comportamento de construção de ninhos de ratos. (F) As diferentes aparências de órgãos reprodutivos em ratos machos e fêmeas aos 21 dias de idade. (G) A aparência de fetos e placentas e uma representação esquemática do método para medir o comprimento do corpo do feto. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66577/66577fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66577/66577fig02.jpg"> Figura 2: Peso corporal das ratas prenhes e características físicas dos fetos. (A) As mudanças de peso das ratas prenhes de GD1 para GD20 nos grupos SED e EX (n = 9 cada). (B) A diferença na eficiência placentária entre os dois grupos. (C) A variação no comprimento corporal dos fetos entre os grupos SED e EX. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66577/66577fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66577/66577fig03.jpg"> Figura 3: Comparação de diferentes métodos de exercício para ratas grávidas. As vantagens e desvantagens de diferentes métodos de exercício para ratas grávidas: corrida voluntária (VWR), esteira motorizada (MT) e natação. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66577/66577fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66577/66577fig04v2.jpg"> Figura 4: Programa de exercícios de natação. (A) O processo completo de acasalamento, gravidez, exercício de natação, parto e lactação descrito nas etapas do protocolo 1.1-1.10 usando ratos Wistar fêmeas. (B) O processo de treinamento de natação durante a gravidez descrito nas etapas 2.1-2.6 do protocolo, incluindo treinamento de adaptação e treinamento formal. A temperatura da água é mantida durante todo o processo a 34 ± 1 °C. Durante o treinamento de adaptação, a profundidade da água é de 10 cm, enquanto durante o treinamento formal, é de 10 cm para o SED e 40 cm para o EX. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66577/66577fig04largev2.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Tabela 1: Possíveis problemas no exercício de natação e cuidados pós-parto para ratas prenhes e suas soluções. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66577/Table%201.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
Tabela 2: Uma análise comparativa dos programas de exercícios em ratos ou camundongos fêmeas e machos prenhes. MT: esteira motorizada; VWR: funcionamento voluntário das rodas; MLC: ensaio de capacidade máxima de carga. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66577/Table%202.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>

Protocolo de exercícios de natação e métodos de cuidados para ratas grávidas

The developmental origins of health and disease concept highlights the impact of early environments on chronic non-communicable diseases like diabetes, ...

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Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologia do Desenvolvimento

Instruções detalhadas são fornecidas sobre como treinar ratos para mergulhar voluntariamente debaixo d'água através de um labirinto de acrílico de 5 m de comprimento. Como os cérebros dos ratos foram muito bem caracterizados, os ratos que mergulham voluntariamente podem ajudar a elucidar as vias centrais da resposta ao mergulho dos mamíferos.

Ratos treinamento para Voluntariamente Dive Underwater: Investigações da Resposta Mergulho dos Mamíferos

Hormônios gonadais, como o estrogênio, modulam a formação da memória em vários paradigmas experimentais, incluindo a memória de extinção do medo. Este protocolo descreve um conjunto de métodos para investigar a influência dos hormônios gonadais especificamente durante a extinção em fêmeas que circulam naturalmente, incluindo monitoramento do ciclo estral e administração de estrogênio exógeno.

Protocolo de Estudos de Extinção do medo condicionado em Naturally Ciclismo ratas

O objetivo do protocolo aqui apresentado é descrever procedimentos para expor ratos a níveis moderados de álcool durante o desenvolvimento cerebral pré-natal e quantificar as alterações resultantes no comportamento social durante a idade adulta.

Moderado pré-natal álcool Exposição e quantificação do comportamento social em ratos adultos

Este protocolo descreve o teste de nado forçado, que é usado para o estudo do comportamento depressivo em roedores. Este procedimento envolve colocar um animal em um recipiente cheio de água que eventualmente levará à exibição de comportamento de imobilidade, que é considerado um reflexo do desespero comportamental.

O Teste de Natação Forçada como um modelo de Depressive-like Comportamento

testes de comportamento é o padrão ouro para determinar os resultados após lesão cerebral, e pode identificar a presença de deficiências de desenvolvimento em lactentes e crianças. reflexos do desenvolvimento neurológico são um indicador precoce destas anormalidades. Uma série de testes de reflexo de desenvolvimento facilmente realizados em roedores neonatais foram desenvolvidos e descritos aqui.

Desenvolvimento neurológico Reflex Teste em Neonatais rato filhotes de cachorro

Este manuscrito descreve a utilidade do ultra-som realizado em ratos fêmeas para projetar modelos experimentais para investigação ginecológica e reprodutiva. Uma explicação passo a passo de como realizar a avaliação ultra-sonográfico é mostrada.

Ultrasonografia em investigações de reprodução Experimental em ratos

Este estudo ilustra o efeito da manipulação seletiva da coluna vertebral no crescimento e desenvolvimento de ratos infantis com paralisia cerebral, enfatizando o procedimento específico e o protocolo padronizado. Para avaliar o protocolo, foram realizadas medidas de peso corporal, teste Rotarod, escore de falha no pé, outros testes comportamentais e detecção de hormônio do crescimento.

Melhorando o desenvolvimento e o crescimento de ratos infantis com paralisia cerebral usando manipulações seletivas da coluna vertebral

Aqui, apresentamos um protocolo conciso para a criação de um modelo de rato prematuro, facilitando a pesquisa sobre o manejo precoce da dor pós-parto. O método envolve a realização de uma cesariana três dias antes do nascimento esperado, a extração de filhotes de ratos prematuros por meio de histerectomia e a integração deles com a prole biológica de uma mãe de aluguel.

Um modelo de rato prematuro para estudos da dor

O aparelho de exercícios projetado para peixes menos afortunados facilita a implementação de diversos protocolos de exercícios com intensidades variadas, manipulando a velocidade do fluxo de água, alcançável por meio da reotaxia.

Um aparelho de exercícios de peixe-zebra induzido por natação para abordagens de treinamento versáteis

A hidrocefalia pós-hemorrágica da prematuridade (PHHP) pode ser modelada em ratos neonatais combinando corioamnionite e hemorragia intraventricular. A combinação desses eventos pré-natais e pós-natais recapitula com precisão as características clínicas da PHHP, incluindo macrocefalia, ventriculomegalia e pressão intracraniana elevada, ao longo da vida.

Modelagem da hidrocefalia pós-hemorrágica da prematuridade em ratos

Aprenda métodos de criação de ratas, treinamento de natação pré-natal e protocolos de cuidados pós-parto para estudar os efeitos do exercício materno na saúde da prole.

Protocolo de exercícios de natação e métodos de cuidados para ratas grávidas

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