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DOI: 10.3791/66613-v
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Este protocolo descreve um método não enzimático e direto para isolar células da medula óssea de camundongos neonatais de 7 a 9 dias de idade e gerar macrófagos diferenciados usando um sobrenadante de células L929 como fonte de fator estimulador de colônias de granulócitos (M-CSF). Os macrófagos derivados da medula óssea foram posteriormente analisados quanto aos antígenos de superfície F4/80, CD206, CD11b e competência funcional.
O escopo deste estudo é entender algumas das limitações na resposta imune no início da vida à infecção bacteriana. Para isso, precisamos desenvolver e utilizar modelos de pesquisa específicos para neonatos. O isolamento da medula óssea de um filhote de um dia de sete anos é desafiador e não está bem estabelecido.
Os macrófagos derivados da medula óssea neonatal são sensíveis e propensos ao estresse quando comparados a outros BMDM. A técnica utilizada neste protocolo é simples e reprodutível. Este método orienta os usuários no isolamento da medula óssea de camundongos neonatais de sete a nove dias de idade sem o uso de nenhuma enzima.
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